[發明專利]一株對美國白蛾具有高致病力的球孢白僵菌菌株及應用

無效

• 申請號: 201210047924.8
• 申請日: 2012-02-29
• 公開（公告）號: CN102634459A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發明（設計）人: 劉寶生;谷希樹;許靜楊;胡霞;孫淑琴;白義川;徐維紅
• 申請（專利權）人: 天津市植物保護研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P7/04;C12R1/645
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 朱紅星

技術領域

本發明屬于微生物殺蟲劑技術領域，涉及一株對美國白蛾具有高致病力的球孢白僵菌菌株及其制備方法，更具體的說是國際重要檢疫性害蟲—美國白蛾篩選到一株對其具有高致病力的球孢白僵菌菌株采集、菌種鑒定和篩選過程。?

背景技術

長期以來，白僵菌作為害蟲生物防治的重要因子受到廣泛關注和研究。我國從上個世紀50年代開始白僵菌的研究和應用，其中應用球孢白僵菌防治松毛蟲、玉米螟是世界上殺蟲真菌應用面積最大、最為成功的事例之一，目前仍保持每年應用面積50萬公頃，應用面積最高年份超過133萬公頃。據不完全統計，1996年我國白僵菌生產廠多達64個。利用白僵菌能夠成功防治的害蟲種類在40種以上（周燚等人，北京：化學工業出版社，2006）。?

美國白蛾是一種重要的國際性檢疫害蟲。自從1979年首次在我國丹東發現至今的30余年已傳至河北、天津、山東、陜西、北京等諸多省市，給我國林業生產以及生態安全造成了重大損失和潛在威脅。趙鐵珍等人（2004年全國美國白蛾疫區的非經濟損失評估[J].林業經濟問題，2006，26（4）：321-326）評估美國白蛾造成的全國非經濟損失總量合計為140.35億元。優先利用各種生物技術與其它非化學防控技術控制美國白蛾是確保我國林業有害生物實現可持續發展的重要保證。如，眾所周知的利用周氏嚙小蜂防控美國白蛾得到大面積推廣應用，效果顯著。利用白僵菌防控美國白蛾在山東也有應用的報道，但是以美國白蛾為防控對象取得農藥登記的白僵菌制劑在我國目前為空白。但是針對美國白蛾篩選高致病力球孢白僵菌菌株的研究在我國才剛剛起步。陸秀君等人（美國白蛾高毒白僵菌菌株篩選及其與高效氯氰菊酯的相容性[J].植物保護學報，2008，35（6）：575-576）報道了美國白蛾高毒白僵菌菌株的篩選結果，在6個球孢白僵菌中各菌株的毒力與致死時間上差異顯著；劉寶生等人（白僵菌Bb08-12菌株生物學研究及其對美國白蛾的致病力[J].植物保護，2011，37（4）：146-149）報道了Bb08-12菌株對美國白蛾的致病性。因此，篩選對美國白蛾具有高致病力的球孢白僵菌菌株是一項重要的基礎研究工作。?

發明內容

本發明涉及的菌株是發明人從感染白僵菌的美國白蛾越冬蛹上分離純化獲得，經過和其它10株不同來源的球孢白僵菌在相同的條件對美國白蛾的室內毒力測定（測定方法相同），篩選出4株高致病力的菌株，對這4菌株再經過田間對美國白蛾的防效試驗，確認發明人自己分離的一株球孢白僵菌Bb10331菌株具有進一步研發潛力和生產使用價值，特此將該菌株申請發明專利。?

本發明的一個目的是公開了一種球孢白僵菌菌株，其保藏號為：CGMCC?No.?5739。?

本發明的另一個目的是公開了CGMCC?No.?5739菌株的制備方法。?

本發明的再一個目的是公開了孢白僵菌菌株在制備作為微生物殺蟲劑防治害蟲方面的應用。特別是作為微生物殺蟲劑防治農林園藝害蟲方面的應用。優選是在防治美國白蛾害蟲方面的應用。?

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為實現上述目的，本發明提供如下的技術方案：

一種球孢白僵菌菌株，特別是對美國白蛾幼蟲具有高致病力的球孢白僵菌菌株（球孢白僵菌菌株（Beauveria?bassiana），代號Bb10331，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏號為：CGMCC?No.?5739。

本發明公開的球孢白僵菌菌株（Beauveria?bassiana），代號Bb10331，于2012年2月1日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其菌株保藏號為CGMCC?No.?5739。保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所。?

本發明公開的球孢白僵菌菌株（Beauveria?bassiana）代號Bb10331，CGMCC?No.?5739所具有的形態、DNA—ITS序列、生物學特征如下：?

(1)菌落形態特征（沙氏培養基上培養）：白色，較平坦，中央2/3面積為乳白色孢子粉層有較為明顯的放射狀脊溝；外呈白色的毛氈狀，放射狀脊溝不明顯或無。菌落初期側面觀為乳突型。

（2）產孢結構及分生孢子特征：分生孢子梗多數為瓶狀，也見有絲狀，單生或簇生；分生孢子梗頂端產孢小梗呈“之”字形；分生孢子著生在產孢梗的折點處。分生孢子多為球形，也有卵圓形，平均大小為2.95（2.16～4.78）×2.10（1.82～2.92）微米。?

（3）該菌株特異性DNA-ITS序列堿基數569bp。?