[發明專利]一種用于孔雀石綠快速檢測的分子印跡-SPR傳感方法

無效

• 申請號: 201210047775.5
• 申請日: 2012-02-29
• 公開（公告）號: CN103293132A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發明（設計）人: 高志賢;寧保安;柳明;董建偉;高娜;彭媛;白家磊;孫思明
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所
• 主分類號: G01N21/55
• 分類號: G01N21/55
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種在SPR傳感器芯片表面原位合成分子印跡薄膜的方法，其特征由以下步驟組成：

(1)稱取20mg引發劑和2mg粘附劑溶于1mL四氫呋喃中，混和均勻。取100μL混合液滴于SPR傳感器芯片表面，在勻膠臺上旋涂均勻；

(2)稱取27mg孔雀石綠與一定比例的功能單體、交聯劑混溶于3.5mL二甲基亞砜中配制預聚合液；

(3)將步驟(2)配置的預聚合液超聲除氣5min后，通氮氣除氧8min。將固定好引發劑的SPR傳感器芯片浸入預聚合液中，繼續通氮5min，密封反應容器，電熱真空干燥箱中60℃聚合16h。聚合完畢后將SPR傳感器芯片浸入甲醇∶冰乙酸＝9∶1的混合溶液中洗脫模板分子6h。

2.一種基于分子印跡膜作為識別元件的SPR傳感器檢測孔雀石綠的方法，其特征由以下步驟組成：

(1)將表面聚合有分子印跡膜的芯片安裝至SPR傳感器(Autolab?ESPRIT，荷蘭)，用去離子水穩定芯片表面，直至基線穩定；

(2)以去離子水作為溶劑和載液，取50μL孔雀石綠溶液在芯片表面進行吸附反應15min，解吸附200s，測得該濃度孔雀石綠SPR傳感響應值。用含0.5％(V/V)冰乙酸的20％乙腈水溶液再塵10min，洗脫除去分子印跡膜吸附的孔雀石綠，以此循環對0.001-5μg/mL濃度范圍內的孔雀石綠溶液進行檢測；

(3)利用測得的信號與對應孔雀石綠濃度繪制檢測方法標準曲線；對自來水樣品進行加標測試，最終確定方法線性范圍：0.01-5μg/mL，最低檢測限：0.001μg/mL，檢測時間小于20min。