[發明專利]一種肝暢制劑的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201210047555.2
• 申請日: 2012-02-28
• 公開（公告）號: CN102590433A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 孫泰俊;江玉娟;馬宏偉;楊敬燕;魏永義
• 申請（專利權）人: 山東阿如拉藥物研究開發有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/88
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 趙龍群

1.一種原料藥組成為松石20.1重量份、天竺黃20.1重量份、紅花40.0重量份、西紅花8.0重量份、綠絨蒿59.6重量份、甘青青蘭40.1重量份、塞北紫堇40.1重量份、巖精膏40.1重量份、丁香20.1重量份、人工牛黃4.0重量份、印度獐牙菜20.1重量份、波棱瓜子12.0重量份、木香馬兜鈴12.0重量份、石花4.0重量份、麝香1.6重量份、銀朱1.7重量份的肝暢制劑的質量檢測方法，其特征在于，該方法包括如下鑒別和/或含量測定方法中的一種或幾種：

鑒別：

A.紅花的鑒別：

取肝暢制劑2g-6g，加體積百分比70％-80％丙酮15-20ml，密塞，振搖20-30分鐘，靜置，吸取上清液，作為供試品溶液；另取紅花對照藥材0.5g-1.5g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗，吸取上述兩種溶液各5μl-10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積份數比為4-12∶1-3∶1-3的醋酸乙酯-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

B.波棱瓜子的鑒別：

取肝暢制劑2.5g-7.5g，加乙醚20-30ml，加熱回流1-1.5小時，濾過，濾液濃縮至2-3ml，作為供試品溶液；另取波棱瓜子對照藥材1.0g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗，吸取上述兩種溶液各5μl-10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積份數比為5-12∶0.5-1.5的環己烷-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干；噴以重量體積份數比5％香草醛硫酸溶液，于105℃加熱至斑點清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

含量測定：

A.西紅花的含量測定：

照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ?D)測定；

色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-體積份數比0.1％甲酸溶液為流動相；流動相的體積份數比為20-30∶70-80；檢測波長440nm；理論板數按西紅花苷-I峰計算應不低于3500；

對照品溶液的制備：取西紅花苷-I對照品、西紅花苷-II對照品適量，加甲醇分別制成每1ml含20μg和10μg的溶液，即得；

供試品溶液的制備：肝暢制劑研細后，取粉末0.6-1g，置具塞的錐形瓶中，精密加入甲醇50-60ml，密塞，稱定重量，超聲處理30-40min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

測定法：分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；

B.紅花的含量測定：

照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ?D)測定；

色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-體積份數比0.5％甲酸溶液為流動相；流動相的體積份數比為28-30∶72-75；檢測波長403nm；理論板數按羥基紅花黃色素A峰計算應不低于3000；

對照品溶液的制備：取羥基紅花黃色素A對照品適量，加體積百分比25％甲醇制成每1ml含0.13-0.15mg的溶液，即得；

供試品溶液的制備：肝暢制劑研細后，取粉末3-5g，置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比25％甲醇水溶液50-60ml，密塞，稱定重量，超聲處理40-50min，放冷，再稱定重量，用體積百分比25％甲醇水溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；

C.人工牛黃的含量測定：

照高效液相法(中國藥典2010年版一部附錄VI?D)測定；

色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-四氫呋喃-體積份數比0.5％醋酸溶液為流動相；流動相的體積份數比為80-83∶10-13∶10-13檢測波長為450nm；理論板數按膽紅素峰計算應不低于2000；

對照品溶液的制備：稱取膽紅素對照品適量，加二氯甲烷制成每1ml含10ug的溶液，即得；

供試品溶液的制備：肝暢制劑研細后，取粉末4-5g，置具塞的錐形瓶中，精密加入二氯甲烷50-60ml，密塞，稱定重量，超聲30-40min，放冷，再稱定重量，用二氯甲烷補足減失的重量，搖勻，濾過，即得；

測定法：分別：吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；

D.印度獐牙菜的含量測定：

照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ?D)測定；

色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水為流動相；流動相的體積份數比為22-25∶78-80；檢測波長237nm；理論板數按獐牙菜苦苷峰計算應不低于2500；

對照品溶液的制備：取獐牙菜苦苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.12mg的溶液，即得；

供試品溶液的制備：肝暢制劑研細后，取粉末5-7g，置具塞的錐形瓶中，加入甲醇25-30ml，密塞，稱定重量，超聲處理30-40min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

測定法：分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；

E.丁香的含量測定：

照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ?D)測定；

色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水為流動相；流動相的體積份數比為62-65∶38-40；檢測波長280nm；理論板數按丁香酚峰計算應不低于3000；

對照品溶液的制備：取丁香酚對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得；

供試品溶液的制備：肝暢制劑研細后，取粉末0.5-1g，置具塞的錐形瓶中，精密加入甲醇25-30ml，密塞，稱定重量，超聲處理30-40min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

測定法：分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；

F.麝香的含量測定：

照氣相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ?E)測定；

色譜條件與系統適用性試驗：以體積百分比50％苯基-甲基硅酮OV-17為固定相，涂布濃度為2％；柱溫180℃；理論板數按麝香酮峰計算應不低于1500；

對照品溶液的制備：取麝香酮對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得；

供試品溶液的制備：肝暢制劑研細后，取粉末3.5g，置具塞的錐形瓶中，加入乙酸乙酯50-60ml，密塞，稱定重量，超聲處理30-40min，放冷，再稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液25ml，40℃以下減壓濃縮，殘渣加無水乙醇使溶解并定容至2ml，濾過，取續濾液，即得；

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，測定，即得。