[發明專利]一種四倍體蘿卜的育種方法

有效

• 申請號: 201210047249.9
• 申請日: 2012-02-28
• 公開（公告）號: CN102613074A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 張振超;潘躍平;戴忠良;秦文斌;姚悅梅;潘永飛;肖燕
• 申請（專利權）人: 江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所;鎮江瑞繁農藝有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102
• 代理人: 何朝旭

技術領域

本發明涉及一種蘿卜的育種方法，尤其是一種四倍體紅心紅皮蘿卜的育種方法，屬于植物育種技術領域。

背景技術

“紅心蘿卜又名胭脂蘿卜，以皮肉全紅、質地脆嫩而聞名，在貴州、四川及重慶等地廣泛栽培”（見科學技術文獻出版社出版的《中國蘿卜》，P172頁）。紅皮紅心蘿卜系十字花科蘿卜屬蘿卜種下的一個地方品種。

主產重慶市涪陵區，臨近縣市及四川、貴州等省也有栽培。其肉質根皮根肉均為紅色，色素含量豐富，其可食部分質地緊密、粗糙、不宜生食但可用于腌制泡菜。近年來，多用紅皮紅心蘿卜提取蘿卜紅色素。蘿卜紅色素是一種天然食用色素，安全、無毒、無任何負作用、資源豐富，而且具有一定營養和藥理作用（Annamaryju等人，Photochmistry,?1997,?45?(4):671-674），是國家添加劑標準委員會允許使用的天然色素之一。在食品、化妝、醫藥領域有著巨大的應用潛力。蘿卜紅色素的開發利用，紅色素含量和產量高的品種是基礎。以前，紅皮紅心蘿卜一直是由農民自繁自種，導致種子混雜、退化嚴重，蘿卜紅色素含量減少。經過科研人員的不懈努力，通過收集、整理傳統資源，現已繁育出不少紅色素含量較高的品種，其紅色素含量在12%左右。除傳統繁育方法之外，還有通過化學處理獲得多倍體植物的方法，所獲得的多倍體植物在產量和營養品質上較同源二倍體品種有明顯優勢，如張紅亮等人（南京農業大學學報，2008，31（3）：47-50）采用秋水仙堿誘導獲得了普通四倍體蘿卜，發現其產量和營養品質各指標如維生素、可溶性糖、有機酸、可溶性糖、還原糖，均較同源二倍體品種有明顯優勢，其植株形態特征均比二倍體高，且差異顯著。雖然多倍體植物體內化學成分含量比同源二倍體含量高很多，但是多倍體往往結實率低或完全不育，紅色素含量的高低更是未知。

發明內容

本發明要解決的技術問題是：針對現有紅皮紅心蘿卜產量和紅色素含量較低的缺陷，提出一種四倍體紅心紅皮蘿卜的育種方法，提高紅心紅皮蘿卜的產量和紅色素含量。

本發明通過以下技術方案解決技術問題，一種四倍體紅心紅皮蘿卜的育種方法，包括以下步驟：

????步驟一、選取健康飽滿的紅心紅皮蘿卜種子，表面消毒30-60秒后，用氯化汞溶液浸泡處理12-15分鐘，再用無菌水沖洗干凈，一般沖洗3-5遍；

步驟二、將無菌的紅心紅皮蘿卜種子接種至MS發芽培養基，在25±3℃、14±2?h·d^-1的條件下培養3-5天，得到無菌紅心紅皮蘿卜苗；

步驟三、將含子葉生長點的無菌紅心紅皮蘿卜苗切取接種至MS液體誘導培養基中，在14±2h·d^-1光照下振蕩誘導培養12～72小時；

步驟四、將誘導培養過的無菌紅心紅皮蘿卜苗接種至固體分化培養基中，在25±3℃、光照時間為14±2?h·d^-1、光照強度為2000±1000lux的條件下培養，直至分化，生成再生芽；

步驟五、切取再生芽接種至生根培養基，經煉苗后移栽至田間，得到再生植株，即四倍體紅心紅皮蘿卜植株。

所用的紅心紅皮蘿卜種子選取純合二倍體紅心紅皮蘿卜種子。

所述MS發芽培養基是由MS培養基1L、蔗糖20g～30g和8g～9g瓊脂組成，pH為5.8～6.0。

所述MS液體誘導培養基由MS培養基1L、0.1～0.2?mg?NAA?、5.0mg?～6.0mg?6-BA、50mg～200?mg?秋水仙堿組成，pH5.8～6.0。

所述固體分化培養基由MS培養基1L、0.1mg～0.2?mg?NAA?、5.0?mg～6.0?6-BA、20?g～30g蔗糖、8～9g瓊脂組成，pH5.8～6.0。

所述生根培養基由MS培養基1L、0.2～0.3?mg?NAA?、20?g～30g蔗糖、8～9?g瓊脂組成，pH5.8～6.0。