[發明專利]氣相色譜－質譜檢測尿有機酸的方法

無效

• 申請號: 201210046953.2
• 申請日: 2012-02-28
• 公開（公告）號: CN102621262A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 王軍娟;張民;黃成剛
• 申請（專利權）人: 杭州博圣生物技術有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 杭州之江專利事務所(普通合伙) 33216
• 代理人: 朱楓

1.氣相色譜-質譜檢測尿有機酸的方法，包括如下步驟：1，對待檢尿液樣本完成尿酶處理；2，加入內標品，采用冷凍乙醇進行沉淀蛋白的處理，將樣本吹干；3，對上述樣本進行甲基硅烷化衍生處理；4，采用上述1-3的步驟處理標準有機酸，得到標準有機酸樣本；5，采用氣相色譜-質譜聯用儀對標準有機酸樣本和待檢尿液樣本進行檢測；6，以標準有機酸樣本的檢測結果作為參比曲線，用常規算法對待檢尿液樣本的有機酸進行定量。

2.如權利要求1所述的氣相色譜-質譜檢測尿有機酸的方法，其特征在于：步驟5中的檢測流程是這樣的：采用分離模式進樣，色譜柱：DB-5ms，進樣口溫度：250℃，柱溫箱初溫：100℃，保持4分鐘，以4℃/min速率升溫至250℃保持16分鐘；He氣流速：1.1ml/min；溶劑延遲：5分鐘；離子源模式：+El；離子源溫度：200℃；四極桿溫度：150℃；調諧模式：自動調諧Auto?tune；質荷比范圍30m/z到600m/z，掃描周期0.4s，樣本分析時間60min；計算機系統記錄色譜和質譜圖形，應用之前各有機酸標準品建立的客戶定性譜庫做定性匹配，并采用已有參比鑒定的定量曲線校正方法進行定量。

3.如權利要求1所述的氣相色譜-質譜檢測尿有機酸的方法，其特征在于：步驟2中所述的內標品含有十七烷酸(MGA)，托品酸(IS-2)，二十四烷酸(C24)，重量比例如下：十七烷酸(MGA)35～45％；托品酸(IS-2)15～25％；二十四烷酸(C24)35～40％，混合為濃度為1.2-1.8mg/ml的水溶液。

4.如權利要求1所述的氣相色譜-質譜檢測尿有機酸的方法，其特征在于：步驟4中的標準有機酸包括甲基琥珀酸，尿嘧啶，3-甲基戊二酸，5-氧合脯氨酸，2-羥基馬尿酸，2-羥基異己酸，癸二酸，馬尿酸，其濃度均為0.6-1.0mg/ml。

5.如權利要求1所述的氣相色譜-質譜檢測尿有機酸的方法，其特征在于：檢測結束后用質控品重復步驟1、2、3、5，從而校正標準有機酸的參比曲線，所述的質控品中包括如下重量比的成分：甲基琥珀酸10～20％，尿嘧啶8～12％，3-甲基戊二酸10～20％，5-氧合脯氨酸15～25％，2-羥基馬尿酸10～20，2-羥基異己酸5～10％，癸二酸5～10％，馬尿酸8～12％；將各標準品混合后制成凍干粉而得，使用時復溶為濃度為0.7-1.0mg/ml的水溶液。