[發(fā)明專利]一種與鴨生長和屠宰性狀相關(guān)的分子標(biāo)記及應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210046938.8
• 申請日: 2012-02-28
• 公開（公告）號: CN102604939A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳艷;杜金平;皮勁松;潘愛鑾;申杰;梁振華;蒲躍進(jìn);孫靜;陳志華
• 申請（專利權(quán)）人: 湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68
• 代理公司: 武漢帥丞知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42220
• 代理人: 朱必武;李南平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于畜禽基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種與鴨生長和屠宰性狀相關(guān)的分子標(biāo)記、其制備方法及應(yīng)用，該分子標(biāo)記可應(yīng)用于鴨標(biāo)記輔助選擇育種。

背景技術(shù)

鴨肉屬紅肉，低膽固醇，低脂肪，高蛋白含量，具有更高的營養(yǎng)價值，在歐美日等國，屬高檔肉類，價格昂貴；在國內(nèi)，人們的飲食觀念正在發(fā)生著變化，隨著肉鴨烹飪水平不斷提高，鴨肉消費(fèi)呈上升趨勢。培育生長速度快、肉質(zhì)優(yōu)良的鴨品種是滿足消費(fèi)者對鴨肉需求增長的有效途徑。

生長性狀和屠宰性狀均屬于數(shù)量性狀，由多基因控制。根據(jù)表型生長性狀進(jìn)行選擇雖然取得了較大的遺傳進(jìn)展，但是隨著表型值的提高，通過直接表型選擇進(jìn)一步提高鴨生長速度取得的遺傳進(jìn)展有限，而且表型選擇存在遺傳改良時距長的缺點(diǎn)，抑制了鴨生長速度改良的遺傳進(jìn)展。

另外，有研究表明，隨著生長速度的提高，鴨肉品質(zhì)存在下降的趨勢，主要表現(xiàn)在肌內(nèi)脂肪含量下降、水分含量上升，鴨生長速度和肌肉品質(zhì)性狀間存在負(fù)相關(guān)。因此，如何在進(jìn)一步提高鴨生長速度的同時，使肌肉品質(zhì)保持在一定水平，是目前亟需解決的問題。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們可以通過尋找控制生長或肉質(zhì)性狀的主基因(major?gene)或與其連鎖的分子標(biāo)記，從而通過分子標(biāo)記實施早期選擇及間接選擇。同時，基因的多效性也決定了通過基因型的選擇達(dá)到選擇鴨生長速度的同時，使肉質(zhì)性狀保持在一定的水平具有可行性。

目前，盡管在鴨肌肉生長和肉質(zhì)性狀相關(guān)候選基因鑒定和應(yīng)用方面取得了一些進(jìn)展，但能夠真正用于育種實踐的影響生長和肉質(zhì)的分子標(biāo)記還很有限，進(jìn)一步尋找鴨生長和肉質(zhì)相關(guān)的候選基因及分子標(biāo)記是非常必要的。

GH基因是位于腦垂體生長通路中又一個關(guān)鍵基因，處于腦垂體生長軸上游發(fā)揮作用，能促進(jìn)細(xì)胞的增生與分化、提高動物瘦肉率以及降低脂肪沉積。到目前為止，現(xiàn)有技術(shù)沒有研究鴨GH基因功能的報道。由于生長激素對機(jī)體的生長發(fā)育具有重要意義，因此研究GH基因在鴨生長中的作用關(guān)系，并尋找其與鴨生長和屠宰相關(guān)的DNA分子標(biāo)記，具有非常重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于通過克隆鴨GH基因部分序列(內(nèi)含子2與部分外顯子序列)，提供一種與鴨生長和屠宰性狀相關(guān)的分子標(biāo)記及其制備方法，從而實現(xiàn)為鴨標(biāo)記輔助育種提供分子標(biāo)記。

本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：

一種與鴨生長和屠宰性狀相關(guān)的分子標(biāo)記，它的核苷酸序列為SEQ?ID?NO：1。

所述的與鴨生長和屠宰性狀相關(guān)的分子標(biāo)記，其中SEQ?ID?NO：1所示序列的第170位堿基處有一個C170-T170的堿基突變，導(dǎo)致BsmFI-RFLP酶切多態(tài)性。

一種擴(kuò)增權(quán)利要求2所述分子標(biāo)記的引物對，它的核苷酸序列為如下所示：

正向引物：5’-GTACAAAGAGTTCGTAAGTGTC-3’

反向引物：5’-GGGAATTTCTTTTGGTGTG-3’。

一種上述與鴨生長和屠宰性狀相關(guān)的分子標(biāo)記的制備方法，包括如下步驟：

根據(jù)已克隆的鴨GH基因cDNA序列，與雞GH基因基因組序列進(jìn)行比對，劃分外顯子與內(nèi)含子區(qū)域，然后根據(jù)劃分的鴨GH基因外顯子2和外顯子3序列設(shè)計引物，進(jìn)行鴨外顯子2、3與內(nèi)含子2序列的擴(kuò)增；對擴(kuò)增后所得目的片段進(jìn)行回收測序、查找突變位點(diǎn)與相應(yīng)的內(nèi)切酶；然后對實驗群體每個個體的DNA進(jìn)行擴(kuò)增與酶切鑒定；最后分析酶切多態(tài)位點(diǎn)與生長與屠宰性狀之間的相關(guān)性，獲得SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列。

所述的與鴨生長和屠宰性狀相關(guān)的分子標(biāo)記可以應(yīng)用于鴨標(biāo)記輔助選擇育種中。

本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)和顯著的進(jìn)步：(1)為鴨標(biāo)記輔助育種提供了一種新的分子標(biāo)記。(2)提供了一種與鴨生長和屠宰性狀相關(guān)的分子標(biāo)記的制備方法及引物對，便于鴨標(biāo)記輔助育種，豐富了現(xiàn)有技術(shù)。

附圖說明

圖1：是本發(fā)明分子標(biāo)記的BsmF?I-RFLPs的三種基因型(TT、CT、CC)電泳檢測結(jié)果圖。其中：M為DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)(DS^TM2000)，1、3、7均為突變純合子個體，4、6、9、10為野生型純合子個體，5、8為雜合子個體。此檢測結(jié)果與測序結(jié)果完全相符。

圖2：是本發(fā)明中鴨GH基因內(nèi)含子2區(qū)T170C多態(tài)位點(diǎn)測序峰圖。

具體實施方式