[發明專利]從楊梅葉中提取原飛燕草素的方法

無效

• 申請號: 201210043093.7
• 申請日: 2012-02-24
• 公開（公告）號: CN102617535A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 葉興乾;楊海花
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07D311/32
• 分類號: C07D311/32;C07D311/40
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

技術領域

本發明涉及一種從楊梅葉中制備高純度原飛燕草素的方法，屬于楊梅葉開發與利用技術領域。

背景技術

原飛燕草素(Prodelphinidins)是原花色素(Proanthocyanidins)的一種，而原花色素是一種具有C6·C3·C6結構框架的黃烷-3-醇類物質。根據原花色素組成結構單元的不同，可以將其分為原花青素和原飛燕草素等，它們對應的組成結構單元分別為(表)兒茶素和(表)桔兒茶素等，其結構單元的C3位置可與桔酸發生酯化，生成相應的桔酸酯，如(表)桔兒茶素桔酸酯。目前研究表明植物界分布最多的原花色素為原花青素，而其他原花色素相對較少且往往與原花青素共同存在，單獨存在的相對較少。目前，國內外制備原花色素的主要原料為葡萄籽，產物主要為原花青素。而楊梅葉原花色素的化學結構完全不同于葡萄籽，其完全為原飛燕草素，結構單元主要為表桔兒茶素桔酸酯及少量表桔兒茶素(Yang?H.H.，Ye?X.Q.，Liu?D.H.，Chen?J.C.，Zhang?J.J.，Shen?Y.，Yu?D.Characterization?of?Unusual?Proanthocyanidins?in?Leaves?of?Bayberry(Myrica?rubra?Sieb.et?Zucc.).J?Agric?Food?Chem2011，59：1622-1629)。

大量研究表明，原花色素具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗癌、預防心血管疾病等多種潛在的生理功效。而且它們的這些活性功能與其結構緊密相關，原飛燕草素的抗氧化功能要比原花青素強(Aron?P.M.，Kennedy?J.A.Flavan-3-ols：Nature，occurrence?and?biological?activity.Mol.Nutr.Food?Res.2008，52，79-104.)。

楊梅為楊梅科楊梅屬植物，是我國特產果樹，主要分布在南方省份。楊梅樹四季常青，枝繁葉茂，果農為提高楊梅產量和品質，每年都會對楊梅樹進行修剪，而修剪下來的枝葉往往作為廢棄物而處理掉。已有研究表明，楊梅葉中富含大量活性成分如酚類物質(夏其樂等.楊梅葉提取物抗氧化活性的研究.食品科學，2004，25(8)：80-83)。

目前大多采用大孔樹脂分離制備原花青素(索有瑞，王洪倫.一種提取沙棘籽中原花青素的方法：中國，200810176033.6.2009-03-18；時國慶.葡萄籽中原花色素的提取、分離與抗氧化性研究[D].鄭州：鄭州大學，2004.)。樹脂種類繁多，因此采用此法分離制備原花青素首先要通過吸附試驗選擇出最適合的樹脂，然后用選擇好的樹脂吸附原花青素提取物，用不同極性溶劑洗脫，收集需要的洗脫液，從而得到純化后原花青素。此法雖然比較經濟，但是得到的原花青素往往還含有其他物質，如黃酮等，純度不夠高，所以有時候達不到需要的要求。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種以楊梅葉為原料、方便簡單的制備高純度楊梅葉原飛燕草素的方法。

為了解決上述技術問題，本發明提供一種從楊梅葉中提取原飛燕草素的方法，包括以下步驟：

1)、將楊梅葉放入體積濃度為50～70％的丙酮溶液中浸提，得提取液；過濾提取液，得濾液；

2)、將濾液減壓濃縮，分離出的丙酮進行回收；所得的水溶液進行過濾，得濾后水溶液；濾后水溶液減壓濃縮，得濃縮水溶液；

3)、將上述濃縮水溶液上Sephadex?LH-20柱，依次用體積濃度為50％的甲醇溶液、體積濃度為90％的甲醇溶液、體積濃度為70％的丙酮溶液進行洗脫，所述體積濃度為50％的甲醇溶液、體積濃度為90％的甲醇溶液、體積濃度為70％的丙酮溶液的用量均為2～4倍柱體積，流速均為40～60d/min(drop/min)；收集體積濃度為90％甲醇溶液所對應的在274nm處有吸收而在350nm處無吸收的洗脫液(為后半部分洗脫液)作為洗脫液I，收集體積濃度為70％丙酮溶液所對應的全部洗脫液作為洗脫液II；

4)、洗脫液I進行減壓濃縮，回收甲醇，得原飛燕草素水溶液I；

洗脫液II進行減壓濃縮，回收丙酮，得原飛燕草素水溶液II；

將原飛燕草素水溶液I和原飛燕草素水溶液II合并后干燥，得楊梅葉原飛燕草素。

作為本發明的從楊梅葉中提取原飛燕草素的方法的改進：步驟1)中：所述楊梅葉與體積濃度為50～70％的丙酮的料液比為：1g/10～40ml；浸提的時間為5～7h。

作為本發明的從楊梅葉中提取原飛燕草素的方法的進一步改進：楊梅葉為干燥粉碎后楊梅葉或者新鮮楊梅葉。