[發(fā)明專利]NAD、氫氧化鋁復(fù)合佐劑及含該復(fù)合佐劑的疫苗

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210040896.7
• 申請日: 2012-02-22
• 公開（公告）號: CN102580081A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王琳;胡云章;胡凝珠;王海漩
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/29;A61P1/16;A61P31/20
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責(zé)任公司 53100
• 代理人: 徐玲菊

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種復(fù)合佐劑，具體涉及一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸與氫氧化鋁的復(fù)合佐劑，屬于免疫學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

近年來，隨著免疫學(xué)研究的不斷深入及基因工程技術(shù)的迅速發(fā)展，活載體疫苗、DNA疫苗和蛋白質(zhì)疫苗等新型疫苗的研究取得了可喜的進(jìn)步。這些新型疫苗純度高、特異性強(qiáng)，但免疫原性弱，誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答不夠強(qiáng)，因此應(yīng)用佐劑來增強(qiáng)其免疫原性或增強(qiáng)宿主對抗原免疫應(yīng)答就顯得尤為重要。

人們在尋找新型佐劑的同時，對常規(guī)佐劑的改良研究也更加重視起來。雖已涌現(xiàn)不少新型佐劑，但都處于試驗(yàn)研究階段。目前在疫苗產(chǎn)業(yè)中鋁佐劑是最傳統(tǒng)、最重要也是應(yīng)用最多的疫苗佐劑。

鋁佐劑的作用機(jī)理主要是在組織中形成抗原貯藏庫產(chǎn)生顆粒性抗原，促進(jìn)抗原遞呈給免疫細(xì)胞，使抗原滯留，緩慢釋放，從而吸引活性淋巴細(xì)胞，激活補(bǔ)體系統(tǒng)。但作為疫苗佐劑，其靶向性存在缺陷，不能引起機(jī)體的特異性細(xì)胞免疫應(yīng)反應(yīng)。而其他一些正在研究中的已證實(shí)有佐劑作用的物質(zhì)，由于安全性、有效性或經(jīng)濟(jì)方面問題，未能被批準(zhǔn)用于人體。

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）是生物代謝過程中的一種重要輔酶，其結(jié)構(gòu)式如圖所示（圖1）。它的基本生理功能是維持細(xì)胞的生長、分化和能量的代謝，不僅對細(xì)胞內(nèi)的氧化還原狀態(tài)具有重要的調(diào)節(jié)作用，而且常被作為活體內(nèi)的代謝指標(biāo)，與細(xì)胞的代謝、節(jié)律、衰老、病變、死亡等重大生命過程有著極其緊密的聯(lián)系。Friedrich?Haag證實(shí)NAD是一種細(xì)胞內(nèi)源性危險信號。同時其可作為T細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)分子，誘導(dǎo)鼠類CD4⁺及CD8⁺T細(xì)胞的凋亡，但其是否具有佐劑作用尚不明確。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有疫苗佐劑存在毒副作用、價格昂貴等問題，本發(fā)明提供一種安全、有效、穩(wěn)定、便宜的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸與氫氧化鋁的復(fù)合佐劑。

本發(fā)明還提供一種含有煙酰胺腺嘌呤二核苷酸與氫氧化鋁的復(fù)合佐劑的疫苗。

????本發(fā)明提供的是這樣一種NAD、氫氧化鋁復(fù)合佐劑，其特征在于由下列質(zhì)量比的組分組成：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸︰氫氧化鋁＝1～5︰50～100。

所述煙酰胺腺嘌呤二核苷酸為市購醫(yī)用產(chǎn)品，分子式為C₂₁H₂₆N₇O₁₄P₂，分子量為663.4177，結(jié)構(gòu)式如圖1所示，在人體中的推薦劑量為10～50μg。

所述氫氧化鋁為目前常用的氫氧化鋁膠體佐劑，其制法參照《中國藥典（三部）》，（國家藥典委員會.北京:人民衛(wèi)生出版社.2005:118-119），在人體中的劑量為1.8～2.7?mg。

本發(fā)明提供的是這樣一種含有復(fù)合佐劑的疫苗，其特征在于在每100μL抗原液中加入0.51～1.05mg的復(fù)合佐劑，且復(fù)合佐劑由下列質(zhì)量比的組分組成：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸︰氫氧化鋁＝1～5︰50～100。

所述抗原液是在每100μL生理鹽水中，混溶有2μg抗原。

所述抗原為常規(guī)乙肝表面抗原。

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸與氫氧化鋁的復(fù)合佐劑誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)為體液免疫反應(yīng)。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有下列優(yōu)點(diǎn)和效果：（1）本復(fù)合佐劑無毒、副作用，不積累毒性，在免疫劑量范圍內(nèi)使用是安全可靠的；（2）本復(fù)合佐劑能夠有效的誘導(dǎo)抗原特異性的體液免疫應(yīng)答，且其所誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答效果優(yōu)于單一的鋁佐劑及單一的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸；（3）本復(fù)合佐劑原料易得，均為市售產(chǎn)品，制備工藝簡單，成本低，性能穩(wěn)定，可作為乙肝疫苗、蛋白疫苗及病毒疫苗等佐劑；（4）本復(fù)合佐劑與疫苗聯(lián)合應(yīng)用能有效增強(qiáng)疫苗體液免疫應(yīng)答，增強(qiáng)效果優(yōu)于單一的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸佐劑和單一的氫氧化鋁佐劑。

附圖說明

圖1為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸分子結(jié)構(gòu)式；

圖2為使用實(shí)施例1提供的復(fù)合佐劑后，14周內(nèi)，各實(shí)驗(yàn)組小鼠血清抗-HBsIgG抗體水平；

圖3為使用實(shí)施例2提供的復(fù)合佐劑后，14周內(nèi)，各實(shí)驗(yàn)組小鼠血清抗-HBsIgG抗體水平；

圖4為使用實(shí)施例3提供的復(fù)合佐劑后，14周內(nèi)，各實(shí)驗(yàn)組小鼠血清抗-HBsIgG抗體水平；

圖5為使用實(shí)施例4提供的復(fù)合佐劑后，14周內(nèi)，各實(shí)驗(yàn)組小鼠血清抗-HBsIgG抗體水平。

具體實(shí)施方式