[發明專利]一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護劑及制備方法

有效

• 申請號: 201210040109.9
• 申請日: 2012-02-22
• 公開（公告）號: CN102526751A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 單虎;王述柏;楊瑞梅;秦曉冰;黃娟;韓先杰;范懿娜
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: A61K47/42
• 分類號: A61K47/42;A61K39/187;A61P31/14
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技術領域

本發明涉及一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護劑及制備方法，屬于動物用病毒活疫苗制造領域。

背景技術

在疫苗制品的領域中，凍干保護劑及其制備工藝是活疫苗生產中的一項關鍵技術，對疫苗的保存、運輸和使用有很大影響。目前，在我國獸用疫苗中，活的凍干疫苗占相當大的比例，國內常用的保護劑主要為牛奶、蔗糖、明膠等，組方簡單，保護功能差。如果在2℃-8℃條件下，保存期只有4-6個月，多需要在-15℃以下保存。加上國內傳統的獸用生物制品保護劑的研制相對滯后，使成品疫苗的長期保存和運輸受限。所以，耐熱凍干保護劑的研究是非常急需的，在20世紀80年代，發達國家就已開始進行耐熱凍干保護劑的研究。我國在耐熱凍干保護劑方面的研究起步較晚，但現在在這方面的研究取得了一定的成果，傅德霞等(1997)將明膠蔗糖保護劑用于雞新城疫弱毒凍干苗和雞傳染性支氣管炎弱毒凍干苗，其免疫效果與牛奶蔗糖保護劑基本相同。王仁耕等(1989)對雞新城疫I系凍干苗的耐熱保護劑的研究表明，2-8℃保存24個月能夠達到《規程》標準，主要為牛奶、蔗糖、谷氨酸鈉、甘露醇等。沈銘強等(1990)對狂犬病凍干苗耐熱保護劑進行了研究，以蔗糖、牛奶、EDTA、甘露醇等材料為主，經2-8℃保存有效期為一年。李道義等(1996)進行了豬瘟凍干苗保護劑的研究，主要成分為CHO、谷氨酸鈉、牛血清、脫脂牛奶等，4-8℃保存15-24個月，25℃100天，37℃7天，經檢驗，物理性狀、真空度、水分、安全效力等測定達部頒標準。王棟等(2002)已經研制出一種耐熱凍干保護劑，用此保護劑凍干的疫苗在2℃-8℃條件下，保存24個月以后，病毒滴度無明顯下降，但仍未達到全面推廣應用。

由于凍干保護劑可影響生物制品的質量、效價和穩定性，改變生物制品的生產工藝，提高產品預測能力并增大產品批次間的穩定性，并且耐熱凍干保護劑有免疫活性但無藥理活性，可在凍干和保存時維持疫苗的穩定性，初次干燥時在適宜的溫度下疫苗不倒塌，企業低成本即可獲取。

發明內容

本發明的目的是提供一種新型豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護劑及其制備方法，降低保護條件，延長使用期并降低使用成本。

一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護劑，以注射用水為溶劑配制溶液，各組分質量百分比濃度為：明膠3％、聚乙烯吡咯烷酮5％、脫水果糖1％、海藻糖3％、甘氨酸3％、山梨醇3％、谷氨酸鈉2％；均為干物質組份。

上述豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護劑的制備方法，(1)對可高壓滅菌的明膠、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶于注射用水，121℃滅菌15分鐘；(2)將不耐高溫的物質組份山梨醇、谷氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶于注射用水中用孔徑0.22μm的濾膜過濾除菌；然后將(1)、(2)混合，即為耐熱凍干保護劑，凍干保護劑中各組分質量百分比濃度為：明膠3％、聚乙烯吡咯烷酮5％、脫水果糖1％、海藻糖3％、甘氨酸3％、山梨醇3％、谷氨酸鈉2％。使用時按1∶1體積比加入病毒抗原液中，分裝后進行冷凍干燥。

本發明的活疫苗耐熱凍干保護劑，降低保存條件，延長保存期，降低使用成本及其提高疫苗的免疫效力，使活疫苗的儲存、運輸和使用都更方便、經濟。本發明的的制劑在2-8℃條件下可保存24個月以上，能達到《中華人民共和國獸醫生物制品質量標準》中規定的各項指標。

具體實施方式

以下結合具體實施例，對本發明進行詳細說明。

一種新型豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護劑，配比為：明膠3g、聚乙烯吡咯烷酮5g、脫水果糖1g、海藻糖3g、甘氨酸3g、山梨醇3g、谷氨酸鈉2g，注射用水80g，可得到100g豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護劑。

豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍干保護劑的制備方法，(1)對可高壓滅菌的明膠、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶于注射用水，121℃滅菌15分鐘；(2)將不耐高溫的物質組份山梨醇、谷氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶于注射用水中用孔徑0.22μm的濾膜過濾除菌；分別完成除菌后將(1)、(2)兩種成分混合，即為耐熱凍干保護劑，使用時按1∶1體積比例加入病毒抗原液中，分裝后進行冷凍干燥。

技術參數及檢測方法

1.產品的物理性狀、無菌檢驗、支原體檢驗、外源病毒檢驗、安全檢驗、剩余水分測定和真空度測定按《中華人民共和國獸醫生物制品規程》的方法及標準進行。

2.凍于周期不超過48h。

3.病毒含量測定及標準