[發明專利]一種沙丁胺醇酶聯免疫試劑盒及其使用方法

無效

• 申請號: 201210038858.8
• 申請日: 2012-02-21
• 公開（公告）號: CN102608310A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 鐘凱
• 申請（專利權）人: 天津康利緣生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N21/31
• 代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司 12209
• 代理人: 劉玲

1.一種沙丁胺醇酶聯免疫試劑盒，其特征在于：組成如下：

包括包被板、校準品、酶標記物工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液，濃縮提取液，

所述包被板為孔底包被有抗沙丁胺醇多克隆抗體；包被量為1μg/ml，包被溫度4℃過夜；

所述校準品為不同濃度的系列校準品；

所述酶標記物工作液含有標記HRP的鹽酸克倫特羅半抗原，為過碘酸鈉法將HRP同鹽酸克倫特羅半抗原結合；

所述底物液A為過氧化氫脲溶液、B為TMB溶液；

所述終止液為2M硫酸。

2.根據權利要求1所述的沙丁胺醇酶聯免疫試劑盒，其特征在于：所述濃縮洗滌液為20X濃縮洗滌液，使用前以蒸餾水按照1∶19v/v的比例稀釋，混勻后使用。

3.根據權利要求1所述的沙丁胺醇酶聯免疫試劑盒，其特征在于：所述濃縮提取液20X濃縮提取液，使用前以蒸餾水按照1∶19v/v的比例稀釋，混勻后使用。

4.根據權利要求1所述的沙丁胺醇酶聯免疫試劑盒，其特征在于：所述包被板的包被步驟如下：

A)抗體包被：用抗沙丁胺醇多克隆抗體最佳包被濃度包被酶標板，100ul/孔，4℃過夜，最佳包被量為1μg/ml，0.05M?pH9.6?CBS作為稀釋液用于包被固相載體；

B)洗板：將孔內液體甩干，用洗滌液250μl/孔充分洗滌4-5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干；

C)封閉：將1％BSA+10％sucrose封閉液加入酶標板，100ul/孔，37℃溫育2小時，將孔內液體甩干，用吸水紙拍干，真空干燥，加鋁箔袋真空封裝。

5.一種如權利要求1所述的沙丁胺醇酶聯免疫試劑盒的使用方法，其特征在于：步驟如下：

(1)將所需試劑從冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻；

(2)取出需要數量的微孔板，將不用的微孔板放入鋁鉑袋，保存于2-8℃；

(3)洗滌液在使用前也需回溫；

(4)編號：將樣本和校準品對應微孔按序編號，每個樣本和校準品做2孔平行，并記錄校準孔和樣本孔所在的位置；

(5)加校準品/樣本：加入校準品/樣本50μl到對應的微孔中，隨即加入酶標記物50μl/孔，輕輕振蕩混勻，用封板膜封板后置25℃避光環境中反應30min；

(6)洗板：小心揭開封板膜，將孔內液體甩干，用洗滌液250μl/孔充分洗滌4-5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干；

(7)顯色：加入顯色液100μl/孔，底物A液和底物B液1∶1混勻，輕輕振蕩混勻，用封板膜封板后，置25℃避光環境中反應15min；

(8)測定：加入終止液50μl/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處，測定每孔OD值；

(9)結果：所獲得的校準和樣品吸光度值的平均值除以第一個校準的吸光度值再乘以100。