[發(fā)明專利]一種b型流感嗜血桿菌莢膜多糖的純化方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210037245.2 | 申請日： | 2012-02-17 |
| 公開（公告）號： | CN102558382A | 公開（公告）日： | 2012-07-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 吳強(qiáng);羅力心;關(guān)曉峰;伍長華 | 申請（專利權(quán)）人： | 成都?xì)W林生物科技股份有限公司 |
| 主分類號： | C08B37/00 | 分類號： | C08B37/00;A61K39/02;A61K39/102;A61P31/04 |
| 代理公司： | 成都金英專利代理事務(wù)所(普通合伙) 51218 | 代理人： | 袁英 |
| 地址： | 610000 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 流感嗜血桿菌 莢膜 多糖 純化 方法 | ||
1.一種b型流感嗜血桿菌莢膜多糖的純化方法，其特征在于，包括以下步驟：
A．裝填一根羥基磷灰石層析柱，用20mM磷酸鹽緩沖液平衡2個柱體積直至基線平穩(wěn)；
B．將50~150mg?b型流感嗜血桿菌（Hib）莢膜多糖粗糖溶解于50ml?20mM?磷酸鹽緩沖液，將得到的Hib莢膜多糖粗糖溶液上樣于層析柱上；
C．使用20mM磷酸鹽緩沖液洗2個柱體積，收集流穿峰；
D．用高鹽緩沖液洗脫結(jié)合在層析柱上的蛋白質(zhì)，再生層析柱；
E．將收集的流穿峰用G-25葡萄糖凝膠柱進(jìn)行緩沖液置換，流動相為無熱原的注射用水，收集含Hib莢膜多糖的洗脫峰，最終得到Hib莢膜多糖精糖原液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種b型流感嗜血桿菌莢膜多糖的純化方法，其特征在于，所述Hib莢膜多糖粗糖是通過對Hib樣本進(jìn)行處理得到的沉淀物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種b型流感嗜血桿菌莢膜多糖的純化方法，其特征在于，所述20mM磷酸鹽緩沖液的pH值為6.9。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種b型流感嗜血桿菌莢膜多糖的純化方法，其特征在于，所述高鹽緩沖液為由20mM磷酸鹽緩沖液和0.2M氯化鈉組成的混合液體，混合液體pH值為6.9。
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