[發(fā)明專利]拜氏梭菌菌株及其篩選方法和應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210034489.5
• 申請日: 2012-02-16
• 公開（公告）號: CN102533612A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發(fā)明（設計）人: 裴建新;黃日波;龐浩;左文樸;陳東;黎貞崇;黃志民
• 申請（專利權）人: 廣西科學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C12Q1/04;C12P7/16;C12R1/145
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司 45114
• 代理人: 鄧曉安

1.拜氏梭菌菌株，其分類命名為拜氏梭菌（Clostridium?beijerinckii）gxas.28，該菌株保存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏登記號：CCTCC?M?2011454。

2.權利要求1所述的拜氏梭菌菌株的篩選方法，其特征在于：將采集的樣品通過富集培養(yǎng)，氣相色譜儀檢測發(fā)酵液，經檢測有丁醇產生的發(fā)酵液稀釋涂平板獲得單菌落，挑單菌落用試管發(fā)酵篩選丁醇產量較高的菌株，具體篩選步驟如下：

a）采樣：采集樣品70余份；

b）富集：每個樣品各稱取1?g置于以糖蜜為主要碳源的培養(yǎng)基中，80℃熱激10?min，冷卻后37℃靜止培養(yǎng)72?h，氣相色譜儀檢測發(fā)酵產物；

c）初篩：將檢測有丁醇產生的發(fā)酵液稀釋涂布含質量百分含量為1.6%丁醇的TYA平板培養(yǎng)基，置于37℃厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24?h；

d）復篩：從TYA平板上挑選單菌落于糖蜜發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃靜止發(fā)酵60?h，篩選丁醇產量較高的菌株進行優(yōu)化。

3.?權利要求1所述的拜氏梭菌gxas.28在發(fā)酵生產丁醇中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述發(fā)酵丁醇的方法是將拜氏梭菌gxas.28接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，于37℃靜止發(fā)酵60?h，得到丁醇、丙酮和乙醇溶液。

5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述接種是將生長至對數期的拜氏梭菌gxas.28按照體積百分含量為10%的接種量接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中。

6.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基是以糖蜜為主要碳源的糖蜜發(fā)酵培養(yǎng)基，糖蜜發(fā)酵培養(yǎng)基中糖蜜的質量百分含量為8%～12%。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于：所述糖蜜發(fā)酵培養(yǎng)基中還含有硫酸銨的質量百分含量為0.1%～0.3%，最適量為0.27%；酵母粉的質量百分含量為0.5%～1.5%，最適量為1.2%?；碳酸鈣的質量百分含量為0.1%～0.4%，最適量為0.34%；過磷酸鈣的質量百分含量為0.02%～0.1%，最適量為0.06%。