[發(fā)明專利]具有雙重結(jié)合活性的抗MRSA-PBP 2a的單克隆抗體

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210034300.2
• 申請日: 2012-02-15
• 公開（公告）號: CN102887952A
• 公開（公告）日: 2013-01-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃若磐;張英
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州瑞博奧生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C07K7/08;C07K14/31;G01N33/577
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫

1.一種具有雙重結(jié)合活性的抗MRSA-PBP?2a的單克隆抗體，其生物特征型是，該單克隆抗體對MRSA菌表達的PBP2a蛋白抗原表位具有特異的高親和結(jié)合力，而不能結(jié)合MSSA菌表達的蛋白，從而能特異性地鑒定出MRSA和MSSA兩種菌。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單克隆抗體，其特征在于，該單克隆抗體能夠特異性結(jié)合S.aureus表達的PBP2a蛋白的27-46位的DKEINNTIDAIEDKNFKQVY氨基酸片段和375-400位的SNEEYNKLTEDKKEPLLNKFQITTS氨基酸片段以及兩者的結(jié)合的抗原表位。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的單克隆抗體，其特征在于，所述的單克隆抗體能夠特異性結(jié)合S.aureus菌表達的PBP2a蛋白的27-46位的DKEINNTIDAIEDKNFKQVY氨基酸片段，分泌此抗體的細胞株命名為10A10.F2。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的單克隆抗體，其特征在于，所述的單克隆抗體能夠特異性結(jié)合S.aureus表達的PBP2a蛋白的376-400位的SNEEYNKLTEDKKEPLLNKFQITTS氨基酸片段，分泌此抗體的細胞株命名為4B10.B6。

5.所鑒定出的抗體結(jié)合MRSA菌的PBP2a蛋白抗原表位，其特征在于，所述抗體僅特異性地結(jié)合此表位，用以鑒定MRSA和MSSA兩種菌。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗原表位，其特征在于，該抗原表位分別位于S.aureus(金黃色葡萄球菌)PBP2a蛋白的氨基酸序列的27-46位，DKEINNTIDAIEDKNFKQVY和375-400位SNEEYNKLTEDKKEPLLNKFQITTS。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗原表位，其特征在于，所述的抗原表位包括核心氨基酸EDK。

8.根據(jù)權(quán)利要求5和4所述的抗原表位，其特征在于，所述的抗原表位能被4B10.B6細胞株產(chǎn)生的單克隆抗體特異性的識別。

9.根據(jù)權(quán)利要求5和4所述的抗原表位，其特征在于，所述的抗原表位能被10A10.F2細胞株產(chǎn)生的單克隆抗體特異性的識別。

10.一種鑒定MRSA和MSSA兩種金黃色葡萄球菌的方法，其主要步驟包括：

(i)分離制備耐藥性及非耐藥性葡萄球菌，并獲取菌體培養(yǎng)上清及裂解液為鑒定樣品；

(ii)將能結(jié)合MRSA菌來源的PBP2a蛋白抗原表位而不能結(jié)合MSSA菌來源的PBP2a蛋白抗原表位的單克隆抗體與生物樣本作用，所述的單克隆抗體還具有能夠區(qū)分MRSA和MSSA菌的特性；

(iii)檢測單克隆抗體與生物樣本的結(jié)合物，由此，鑒定生物樣本中的MRSA菌。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述為4B10.B6細胞株產(chǎn)生的單克隆抗體。

12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述為10A10.F2細胞株產(chǎn)生的單克隆抗體。