[發(fā)明專利]一種白花丹參總酚酸提取物、制備方法及用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210031890.3
• 申請日: 2012-02-13
• 公開（公告）號: CN102552396A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫隆儒;朱海林;謝婷婷;曹春泉;張大偉;季梅
• 申請（專利權(quán)）人: 山東大學
• 主分類號: A61K36/537
• 分類號: A61K36/537;A61P9/00
• 代理公司: 濟南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37219
• 代理人: 趙龍群

1.一種白花丹參總酚酸提取物，以白花丹參的根為原料，通過溶劑提取、溶劑萃取、柱層析純化制備而成，主要含有丹酚酸B、丹酚酸A、迷迭香酸、丹酚酸E、丹酚酸L和紫草素，總酚酸的含量大于90％，其中丹酚酸B和丹酚酸A的質(zhì)量總含量不低于65％，丹酚酸A和丹酚酸B的質(zhì)量比為0.10～0.40∶1。

2.如權(quán)利要求1所述的白花丹參總酚酸提取物，其特征在于是按以下方法制備的：

以白花丹參的根為原料，粉碎后，以10wt％～90wt％甲醇、10wt％～90wt％乙醇、水或pH＝3～5的酸水為提取溶劑進行提取，所述溶劑量與原料的重量比為6～30∶1，重復(fù)提取2～3次，合并濾液；進行以下處理，得酸性濾液：

i.對于所述提取溶劑為濃度10～90wt％甲醇水溶液、10～90wt％乙醇提取得到的濾液，濃縮后，用有機溶劑萃取脫去脂溶性雜質(zhì)，將水層以2.5N鹽酸調(diào)pH＝3～5，濾過，得酸性濾液；或者，

ii.對于所述提取溶劑為水得到的提取液，以2.5N鹽酸調(diào)pH＝3～5，濾過，得酸性濾液；或者，

iii.對于所述提取溶劑為pH＝3～5的酸水得到的提取液，直接過濾，得酸性濾液；

將所得酸性濾液直接進行大孔吸附柱層析，先以水洗脫，再分別以pH＝3～5的50wt％、70wt％酸性乙醇洗脫，收集50wt％、70wt％酸性乙醇洗脫液，以NaHCO₃水溶液調(diào)pH至中性，在50℃條件下減壓濃縮至無乙醇，然后加水稀釋，加水量為原料重量的2倍，以2.5N鹽酸調(diào)pH＝3～5，濾過，將濾液直接加到C18反相硅膠柱的頂端，進行反相硅膠柱層析純化，先以水洗脫，再以50wt％乙醇洗脫，收集50wt％乙醇洗脫液，在50℃條件下減壓蒸干，即得白花丹參總酚酸提取物。

3.權(quán)利要求1所述的白花丹參總酚酸提取物制備方法，步驟如下：

(1)溶劑提取

原料白花丹參的根經(jīng)過粉碎后，以10～90wt％甲醇水溶液、10～90wt％乙醇、水或pH＝3～5的酸水為提取溶劑進行提取，所用溶劑量與原料的重量比為6～30∶1，重復(fù)提取2～3次，除去藥渣，合并濾液；

優(yōu)選的，所述的提取溶劑是50～70wt％乙醇、水或pH＝3～5的酸水，最優(yōu)選的為pH＝3～5的酸水；

(2)濃縮，脫脂

對于所述提取溶劑為10wt％～90wt％甲醇水溶液、10wt％～90wt％乙醇所得到的提取液，在50℃條件下減壓濃縮至無乙醇，然后加水稀釋，加水量為原料重量的4～6倍，再以等體積的有機溶劑萃取，重復(fù)萃取2次，棄去石油醚層，將萃取后的水層以2.5N鹽酸調(diào)pH＝3～5，得酸水溶液；

所述萃取脫脂用的有機溶劑是石油醚、二氯甲烷或氯仿，優(yōu)選的石油醚或二氯甲烷；

(3)大孔吸附樹脂柱層析

a.步驟(1)中以pH＝3～5的酸水為提取溶劑時，得酸性濾液；

b.步驟(1)中以水為提取溶劑時，所得水提液以2.5N鹽酸調(diào)pH＝3～5，得酸性濾液；

c.步驟(2)所得的酸水溶液，濾過，得酸性濾液；

將上述a、b或c中所述的酸性濾液直接加到大孔吸附樹脂柱的頂端，使其緩慢流過大孔吸附樹脂柱，然后以水洗脫6～8個保留體積，再分別以pH＝3～5的50wt％乙醇洗脫4～6個保留體積，pH＝3～5的70wt％乙醇洗脫6～8個保留體積，收集50wt％、70wt％酸性乙醇洗脫液，以10wt％NaHCO₃水溶液調(diào)pH至中性，在50℃條件下減壓濃縮至無乙醇；

優(yōu)選的，所述大孔吸附樹脂為YWD06大孔吸附樹脂；

(4)C18反相硅膠柱層析

將步驟(3)中濃縮后的洗脫液加水稀釋，加水量為原料重量的2倍，以2.5N鹽酸調(diào)pH＝3～5，過濾，將濾液加到C18反相硅膠柱的頂端，進行反相硅膠柱層析純化，先以水洗脫6～8個保留體積，再以50wt％乙醇洗脫4～6個保留體積，在50℃條件下減壓蒸干，即得白花丹參總酚酸提取物。

4.如權(quán)利要求3所述的白花丹參總酚酸提取物制備方法，其特征在于步驟(1)中所述的提取方法是用加熱提取法、超聲提取法、滲濾提取法或植物組織破碎提取法；其中優(yōu)選的，加熱提取法、超聲提取法和植物組織破碎提取法中所用的提取溶劑用量為原料重量的6～10倍，滲濾提取法中所用的提取溶劑用量為原料重量的20～30倍。