[發(fā)明專利]一種燕麥鐮孢菌及其菌劑和應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210029932.X
• 申請日: 2012-02-10
• 公開（公告）號: CN102604839A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設計）人: 程亮;郭青云;朱海霞;魏有海;翁華;郭良芝
• 申請（專利權）人: 青海省農(nóng)林科學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P13/02;C12R1/77
• 代理公司: 西寧金語專利代理事務所 63101
• 代理人: 哈慶華

技術領域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)微生物領域，具體涉及一種燕麥鐮孢菌，以及利用該燕麥鐮孢菌生產(chǎn)的微生物菌劑和應用。?

背景技術

野燕麥（Avena?fatua?L.）屬于禾本科（Poaceae）、燕麥屬（Avena），是一年生草本植物，又稱鈴鐺麥。中國各省均有分布。該屬有34種。株高30～150厘米。須根；莖叢生；葉鞘松弛，葉舌大而透明；圓錐花序；穎果紡錘形。野燕麥是小麥的伴生雜草，由于發(fā)生的環(huán)境條件一致，苗期形態(tài)相似，難以防除，危害極大。野燕麥的生長習性不僅與小麥相似，而且出苗不一致，長勢兇猛，繁殖率高。成熟比小麥早。小麥因野燕麥危害后，株高降低；分孽數(shù)減少，穗粒數(shù)減少，千粒重降低，導致大幅度減產(chǎn)。在我國野燕麥發(fā)生嚴重的地區(qū)，小麥一般減產(chǎn)20～30%，重者達40～50%，更重者造成絕產(chǎn)。在小麥地，每平方米30～40株野燕麥的草害程度，每公頃造成300～600公斤損失，每平方米146株的嚴重草害情況下，導致?lián)p失高達每公頃90O斤。據(jù)報導，田間野燕麥穗數(shù)每畝0～127.8萬個密度下，野燕麥穗數(shù)每增加1萬穗，小麥產(chǎn)量損失2.7公斤。目前防除野燕麥的方法主要是采用耕作、栽培技術措施或使用化學藥劑。但是由于野燕麥種子產(chǎn)生量大，種子在土壤中持續(xù)4～5年均能發(fā)芽，有的經(jīng)過火燒和牲畜胃、腸后仍能發(fā)芽，使得現(xiàn)有技術措施的防除效果非常差。?

利用雜草的病原微生物研制專化性強、對目標雜草以外的植物影響小、環(huán)境負效應少、安全性高的生物除草劑，有可能成為防除雜草的有效途徑。?

張宗儉（張宗儉等《中國生物防治》1996.12（4）：171-173）從自然罹病的野燕麥植株分離到一株燕麥葉枯菌，用該菌絲體接種整株幼苗或離體葉片試驗表明，該菌只侵染野燕麥而不感染小麥，是一種潛在的防除野燕麥的真菌除草劑菌株。燕麥鐮孢菌GD-2（朱海霞等.中國生物防治.2010.26（增刊）：84-89）對野燕麥的種子萌發(fā)具有顯著的抑制作用，并造成野燕麥種子萌芽管損傷，溫室接種試驗表現(xiàn)對野燕麥較強的致病作用，表現(xiàn)葉片失水黃化、植株矮小，鮮重抑制率高，對油菜表現(xiàn)安全。“燕麥B”（程亮.作物雜志.2008.6：52-55）菌株在孢子濃度1×10⁷個/mL對野燕麥的發(fā)病率和病情指數(shù)分別為70%和40以上。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種用于野燕麥生物防治的燕麥鐮孢菌菌株，該菌株可高效、長效抑制在小麥田的野燕麥，并且對環(huán)境友好。?

本發(fā)明的另一目的在于提供利用上述燕麥鐮孢菌菌株生產(chǎn)的微生物菌劑及其制備方法。?

本發(fā)明第三個目的在于提供上述燕麥鐮孢菌及其微生物菌劑在防治油菜田野燕麥上的應用。?

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術方案如下：?

一種燕麥鐮孢菌（Fusarium.avenaceum）菌株GD-2，已于2011年12月20日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.5579；保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所；分類命名：Fusarium??avenaceum。

利用上述燕麥鐮孢菌GD-2生產(chǎn)的微生物菌劑，其活性成份為菌體和/或它的胞外代謝產(chǎn)物。?

上述微生物菌劑可以為液體制劑。?

上述微生物菌劑可以為可濕性粉劑。?

上述微生物菌劑的制備方法，包括如下步驟：?

（1）菌種活化：將低溫保存的菌株GD-2在PDA平板培養(yǎng)基上活化擴繁備用；

（2）種子液的制備：按常規(guī)方法制作PDB液體培養(yǎng)基，高壓濕熱滅菌后，接入步驟（1）活化的菌株GD-2，在24～28℃下振蕩培養(yǎng)48～72h，得種子液；

（3）發(fā)酵培養(yǎng)：將以葡萄糖和尿素分別作為碳、氮源（C/N為6:1～5:1）。其它組份用量同查彼（Czapek）培養(yǎng)液，121℃高壓濕熱滅菌滅菌30分鐘，待滅菌培養(yǎng)液冷卻至室溫時，將步驟（2）的種子液按按5～10%的比例接入發(fā)酵液，24～28℃振蕩黑暗培養(yǎng)5～7天。

（4）檢測發(fā)酵液中的分生孢子數(shù)量，待發(fā)酵液中分生孢子數(shù)量達到10⁸個/mL，停止發(fā)酵培養(yǎng)，得到菌株發(fā)酵液。?

（5）菌劑的制備：將液體發(fā)酵獲得的菌液與吐溫-80、水按1:0.005：1（V/V）混勻，即得液體制劑。?

GD-2可濕性粉劑的制備?