[發明專利]一種提高產油微生物發酵生產微生物油脂的方法

有效

• 申請號: 201210026602.5
• 申請日: 2012-02-07
• 公開（公告）號: CN102559790A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 徐靜陽;杜偉;劉德華;趙雪冰
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12P39/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;王加嶺

1.一種提高產油微生物發酵生產微生物油脂的方法，其特征在于，在發酵過程中向培養基內添加0.5～4g/L的陰離子表面活性劑和/或其結構類似物，培養產油微生物細胞；

其中，所述陰離子表面活性劑為油酸鹽、油酸酯、正辛酸鹽、正辛酸酯、1-辛基磺酸鹽、木質素磺酸鹽中的一種或多種；

陰離子表面活性劑的結構類似物為中長鏈脂肪酸、極性脂肪和/或中長鏈脂肪酸酯。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述陰離子表面活性劑為油酸鈉、油酸甲酯、正辛酸鈉、1-辛基磺酸鈉、木質素磺酸鈉中的一種或多種。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，陰離子表面活性劑和/或其結構類似物的添加時機為發酵初始階段，或對數生長期的中期、后期，或在流加物料的同時進行；添加方式為一次性、分步多次或流加添加。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述產油微生物細胞為胞內油脂含量占總生物量20％以上的產油微生物。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述產油微生物細胞為圓紅冬孢酵母(Rhodosporidium?toruloides)、粘紅酵母(Rhodotorula?glutinis)、解脂耶式酵母(Yarrowia?lipolytica)中的一種或多種。

6.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其特征在于，產油微生物細胞的培養方式為批式發酵、兩階段批式發酵、流加批式發酵或連續發酵。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述批式發酵具體為：將保存于固體培養基中的產油微生物菌種接入種子培養基中進行活化培養，然后將活化后的菌種接種于營養條件適宜的發酵培養基中，使菌體快速增殖并積累大量油脂。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述兩階段批式發酵具體為：將保存于固體培養基中的產油微生物菌種接入種子培養基中進行活化培養，然后將活化后的菌種接種于營養豐富的第一階段發酵培養基中，使菌體快速大量增殖；最后在菌體生長達到對數期或對數期的中后期時，將菌體離心并重懸于營養條件適宜的第二階段發酵培養基中，繼而使菌體大量積累油脂。

9.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述流加批式發酵具體為：將保存于固體培養基中的產油微生物菌種接入種子培養基中進行活化培養；然后將活化后的菌種接種于營養條件適宜的發酵培養基使菌體增殖并積累油脂，并在此期間向培養基中一次性、分步多次或連續流加碳源及其他必要的營養成分，從而進一步促進油脂快速大量積累。

10.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述連續發酵具體為：將保存于固體培養基中的產油微生物菌種接入種子培養基中進行活化培養，然后將活化后的菌種接種于營養條件適宜的發酵培養基中培養一段時間，最后進入連續培養狀態：即以一定的稀釋率補加新鮮發酵培養基，并以同樣的速率排出發酵液，一段時間后培養進入穩態。