[發明專利]沉默兩個抗性基因防治煙灰虱的方法

有效

• 申請號: 201210025653.6
• 申請日: 2012-02-07
• 公開（公告）號: CN102690837A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 劉方;張保龍;王坤波;陳天子;蔡小彥
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院棉花研究所;江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00
• 代理公司: 北京法思騰知識產權代理有限公司 11318
• 代理人: 高宇

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及沉默兩個抗性基因防治煙灰虱的方法。

背景技術

煙粉虱Bemisia?tabaci(Gennadius)屬同翅目，粉虱科，小粉虱屬，又名棉粉虱或甘薯粉虱，在亞洲、歐洲、非洲、南美洲、中北美洲、大洋洲等大陸地區均有分布。煙粉虱寄主范圍十分廣泛，主要危害十字花科、茄科、葫蘆科、豆科、菊科、錦葵科等植物。煙粉虱的危害主要來自于其成蟲和若蟲。煙粉虱成蟲、若蟲將口針穿過寄主植物細胞間隙深入韌皮部取食，直接刺吸植物汁液，導致寄主作物生長受阻，植株弱小；成蟲產卵時卵柄直接插入葉組織內造成傷口為害；其若蟲和成蟲分泌蜜露，誘發煤污病，密度高時，葉片呈現黑色，嚴重影響光合作用。此外，煙粉虱還傳播70種以上的病毒病，引起寄主作物病毒病流行，給農業生產造成了巨大的經濟損失(A.Rami?Horowitz，Yehezkel?Antignus?and?Dan?Gerling.Management?of?Bemisia?tabaci?Whiteflies.The?Whitefly，Bemisia?tabaci(Homoptera：Aleyrodidae)Interaction?with?Geminivirus-Infected?Host?Plants，2011，293-322，DOI：10.1007/978-94-007-1524-0_11)。

目前，殺蟲劑是控制煙粉虱危害的重要手段。現在防治煙粉虱的常規藥劑主要包括有機磷類(如毒死蜱、乙酰甲胺磷等)、氨基甲酸酯類(如滅多威、丁硫克百威等)、新煙酰類(吡蟲啉、啶蟲脒、烯啶蟲胺等)以及昆蟲生長調節劑(噻嗪酮、蚊蠅醚)等殺蟲劑。由于煙粉虱本身的生物學特性、殺蟲劑用藥的頻繁性和盲目性等原因，煙粉虱在世界范圍內已經對多種化學農藥產生了抗性(Palumbo?JC，Horowitz?AR，Prabhaker?N.Insecticidal?control?and?resistance?management?for?Bemisia?tabaci.Crop?Prot，2001，20：739-765)。對不同類型的殺蟲劑，煙粉虱有著不同的抗藥性分子機制。對抗吡蟲啉的B型和Q型煙粉虱進行熒光定量PCR檢測發現，煙粉虱體內的一個P450基因(CYP6CM1)表達量增加了17倍，從而使其對包括吡蟲啉在內的新煙堿類殺蟲劑產生抗性(Iris?Karunker，Juergen?Benting，Bettina?Lueke，et?al.Over-expression?of?cytochrome?P450?CYP6CM1?is?associated?with?high?resistance?to?imidacloprid?in?the?B?and?Q?biotypes?of?Bemisia?tabaci(Hemiptera：Aleyrodidae).Insect?Biochemistry?and?Molecular?Biology，2008，38：634-644)。煙粉虱對機磷類殺蟲劑的分子抗性機制則可能涉及到羧酸酯酶介導的水解代謝作用的增強和乙酰膽堿酯酶發生點突變而對殺蟲劑的敏感性降低。在抗有機磷類殺蟲劑的B型煙粉虱中，羧酸酯酶基因(coe1)的表達量提高了4倍，同時，乙酰膽堿酯酶基因(ace1)在酰基的活性位點發生了突變，最終導致煙粉虱的抗藥性增強(Alon?M，Alon?F，Nauen?R，et?al.Organophosphates′resistance?in?the?B-biotype?of?Bemisia?tabaci(Hemiptera：Aleyrodidae)is?associated?with?a?point?mutation?in?an?ace1-type?acetylcholinesterase?and?overexpression?of?carboxylesterase.Insect?Biochemistry?and?Molecular?Biology，2008，38：940-949)。