[發明專利]一種利用分子標記篩選具有優良生長潛力德國鏡鯉選育系的方法

無效

• 申請號: 201210024334.3
• 申請日: 2012-02-03
• 公開（公告）號: CN102534021A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 胡雪松;石連玉;李池陶;賈智英
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黑龍江水產研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 韓末洙

技術領域

本發明涉及一種利用分子標記篩選具有優良生長潛力德國鏡鯉選育系的方法。

背景技術

德國鏡鯉選育系是黑龍江水產研究所在引進的德國鏡鯉原種的基礎上，歷時十年培育而成，其生長、抗寒、抗病力較原種均有較大提高，1996年被國家評定為良種。目前是黑龍江、吉林、遼寧、內蒙和新疆等多個省市的主要養殖鯉魚品種。然而，近年來，由于養殖戶的隨意擴繁、近交等問題導致其優良性狀，特別是生長性能衰退嚴重。因此，對生長性能進行選育改良勢在必行。

傳統選擇需要等到鯉魚發育至商品規格，生長性狀得以顯現后方能進行。在東北地區，受氣候條件影響，魚類生長期短，每年只有4個月左右，在越冬期，其體重不增反降，這給性狀表現較晚的生長選育帶來較大困難；此外，北方鯉魚性成熟晚(一般需4年)，世代間隔長，這在很大程度上增加了利用子代表型性狀評估親本育種潛力的難度。上述原因導致傳統表型選擇辦法存在選育周期長、準確性低的問題。

發明內容

本發明提供一種利用分子標記篩選具有優良生長潛力德國鏡鯉選育系的方法，該方法可在早期進行選擇，并提高選擇的準確性。

本發明利用分子標記篩選具有優良生長潛力德國鏡鯉選育系的方法，按以下步驟進行：一、從待測的1齡德國鏡鯉選育系鰭條組織中提取基因組DNA；二、以提取的基因組DNA為模板，以IGF1F和IGF1R為引物進行PCR擴增，獲得PCR產物；三、用1.5％的瓊脂糖凝膠對PCR產物進行電泳檢測，選擇電泳結果為單條帶的635bp的PCR產物所對應的德國鏡鯉選育系，即完成篩選；其中步驟二中PCR擴增所用引物IGF1F的序列為5′-TCAGCACGCAAACGAAAGAC-3′，引物IGF1R的序列為5′-ACTCGATCCATTGGGGTCAG-3′。

本發明的優點：

本發明采用分子標記的方法，可直接對攜有優良基因標記的個體進行早期選擇。使用該方法篩選的個體，其1齡體長、2齡體重，凈重及體重越冬損失等性狀均顯著優于其他個體，該方法的準確性高，操作過程簡潔，用時短。

附圖說明

圖1是德國鏡鯉選育系基因型為DD型的測序峰圖；圖2是德國鏡鯉選育系基因型為II型的測序峰圖；圖3為具體實施方式四中PCR檢測結果。

具體實施方式

本發明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式，還包括各具體實施方式間的任意組合。

具體實施方式一：本實施方式利用分子標記篩選具有優良生長潛力德國鏡鯉選育系的方法，按以下步驟進行：一、從待測的1齡德國鏡鯉選育系鰭條組織中提取基因組DNA；二、以提取的基因組DNA為模板，以IGF1F和IGF1R為引物進行PCR擴增，獲得PCR產物；三、用1.5％的瓊脂糖凝膠對PCR產物進行電泳檢測，選擇電泳結果為單條帶的635bp的PCR產物所對應的德國鏡鯉選育系，即完成篩選；其中步驟二中PCR擴增所用引物IGF1F的序列為5′-TCAGCACGCAAACGAAAGAC-3′，引物IGF1R的序列為5′-ACTCGATCCATTGGGGTCAG-3′。

本實施方式步驟一所述的提取基因組DNA的方法為常規方法。

本實施方式采用分子標記的方法，可直接對攜有優良基因標記的個體進行早期選擇。使用該方法篩選的個體，其1齡體長、2齡體重，凈重及體重越冬損失等性狀均顯著優于其他個體，該方法的準確性高，操作過程簡潔，用時短。

具體實施方式二：本實施方式與具體實施方式一不同的是：步驟二中PCR擴增的反應體系為20μL反應體系，由下列成分組成：

其它與具體實施方式一相同。

具體實施方式三：本實施方式與具體實施方式一或二不同的是：步驟二中PCR擴增的條件為：94℃變性5min，94℃變性30s，59℃退火15s，72℃延伸45s，共30個循環，再72℃延伸5min，4℃保溫。其它與具體實施方式一或二相同。