[發(fā)明專利]一種具有抗糖尿病腎病作用的香椿子提取物制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210024221.3
• 申請日: 2012-02-05
• 公開（公告）號: CN102526203A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 田景振;李萬忠
• 申請（專利權(quán)）人: 田景振;李萬忠
• 主分類號: A61K36/58
• 分類號: A61K36/58;A61P3/10;A61P13/12;G01N33/15;A61K131/00
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥提取技術(shù)領(lǐng)域，是一種從香椿子中提取抗糖尿病腎病作用的極性部位的方法。

背景技術(shù)

糖尿病腎病(Diabetic?nephropathy，DN)是糖尿病?(diabetes?mellitus，DM)患者常見而難治的遠期慢性微血管并發(fā)癥之一，也是引起DM患者死亡的重要原因。目前我國DM患者達4000余萬，DN發(fā)病率逐年遞增，臨床上40%～50%的1型、10%～20%的2型DM患者伴有明顯的DN，約1/3患者發(fā)展為晚期DN和終末期腎臟病，已成為嚴重威脅人類生命健康的疾病。迄今醫(yī)學(xué)界尚無有效治療方法阻止DN發(fā)生與發(fā)展，近年來中藥在DN治療方面倍受關(guān)注并取得了一定成績。

香椿子，性溫，味辛苦，無毒，入肝、肺經(jīng)，具祛風(fēng)、散寒、止痛功效，主治風(fēng)寒外感、心胃氣痛、風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛、疝氣等。香椿分布于華北、西北、西南、華東等地，尤以山東、河北兩省為多。香椿以栽植最多，加上廣泛分布的野生香椿，整體資源非常豐富。山東省臨沂、聊城等地區(qū)群眾使用香椿子泡水或煎服，對DN具有較好療效,?屬于民間用藥。美國專利（US2005175716）提及香椿子中含有治療DM的天然活性成分，加之香椿子較低的使用毒性，所以香椿子不失為一種具有市場潛力的防治DN的物質(zhì)來源。

香椿是一種用途較廣、來源豐富、成本低廉、藥食兩用的植物,?具有很好的開發(fā)利用價值。目前已發(fā)現(xiàn)香椿子具有降血糖、抗氧化、抗凝血、抗血栓、提高纖溶活性、保護心肌缺血再灌注損傷、改善心肌缺血再灌注的血流動力學(xué)變化、保護神經(jīng)細胞、保護活化和損傷的內(nèi)皮細胞等作用。香椿子藥理研究相對較少，尤其是香椿子提取物在抗DN作用方面尚未見報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種具有抗DN作用的香椿子提取物，為解決此問題，從香椿子的不同極性部位入手，運用動物模型篩選抗DN作用的有效部位。

由于香椿子成分復(fù)雜，有些成分本身可能無活性，但經(jīng)體內(nèi)代謝所得產(chǎn)物具備活性，故尋找香椿子中抗DN作用的極性部位宜采用動物模型篩選，即應(yīng)用雄性Wistar大鼠，注射鏈脲佐菌素（STZ）建立DN模型，觀察香椿子不同極性部位對DN大鼠腎臟的保護作用，從而篩選香椿子中治療DN的物質(zhì)基礎(chǔ)。

為了達到上述目的，本發(fā)明通過下列措施實現(xiàn)：

⑴?稱取干燥香椿子，粉碎，分別用8倍量55%～95%乙醇熱回流提取3次，每次2小時，過濾后合并提取液，減壓濃縮至無醇味。

⑵?濃縮液以水混懸，依次用石油醚(?60～90℃)、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取剩余的部分為水部分。

⑶?分別減壓回收溶液至干，依次得到香椿子的石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位與水部位。

⑷?運用動物模型篩選抗DN作用的極性部位，最終得到由香椿子正丁醇部位和乙酸乙酯部位組成的提取物。

本發(fā)明方法采用系統(tǒng)溶劑法提取不同極性部位，運用DN動物模型，按照“等劑量不等強度原則”進行評價，得到一種具有抗DN作用的香椿子提取物。該發(fā)明為進一步從香椿子中尋找治療糖尿病腎病的活性成分或先導(dǎo)化合物，也為下一步綜合開發(fā)利用我國香椿子天然植物資源提供資料，所以具有一定的科學(xué)意義和實用價值。

下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明的技術(shù)方案進一步的說明。

具體實施方式

實施例1?不同極性部位的香椿子提取物制備

1.熱回流法提取

稱取干燥香椿子10?kg，適當粉碎，分別用8倍量95%、75%、55%乙醇熱回流提取1次，每次2小時，過濾后合并提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至提取液無乙醇味。

2.系統(tǒng)溶劑法萃取

濃縮后的提取液以水混懸，依次用石油醚(?60～90?℃)、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各自萃取3?次，合并各萃取溶液，萃取剩余的部分為水部分。

3.香椿子不同極性部位的提取物制備

系統(tǒng)溶劑法萃取的4個不同極性溶液，各自減壓回收溶劑至干，依次得到香椿子石油醚部位(89.4?g)、乙酸乙酯部位(72.5?g)、正丁醇部位(163.2?g)、水部位(320.6?g)。

實施例2?不同極性部位香椿子提取物對DN大鼠腎臟的保護作用

1.材料與試劑

采用實施例1制備的香椿子極性部位；SPF級Wistar雄性大鼠，體重(200±20)g；STZ，為Sigma公司產(chǎn)品；BT-3000全自動生化分析儀，意大利德爾曼；尿素氮、肌酐、微量白蛋白試劑盒，為南京建成生物公司產(chǎn)品；其它試劑均為國產(chǎn)分析純。

2.實驗方法