[發明專利]利用復合酶制備黑色素及其前體物質的方法

有效

• 申請號: 201210021828.6
• 申請日: 2012-01-31
• 公開（公告）號: CN102586328A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 張然;牛天貴;薛俊;張蘭真;劉戈
• 申請（專利權）人: 北京源天彩生物科技有限公司
• 主分類號: C12P1/00
• 分類號: C12P1/00;C12P17/10;C12N1/20;C12R1/125
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;王加嶺

1.利用復合酶制備黑色素及其前體物質的方法，其特征在于，利用從產黑色素的芽孢桿菌發酵液中提取的含有酪氨酸酶的復合酶，以酪氨酸和/或其衍生物為底物，通過酶促反應生成黑色素及其前體物質。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述復合酶中還含有互變異構酶。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，還包括向酶及底物的反應體系中加入蛋白酶的步驟，所述蛋白酶為胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶中的一種或多種。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，從芽孢桿菌發酵液中提取復合酶所采用的方法為超濾或離心。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，還包括在進行酶促反應之前對復合酶進行固定化的步驟。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述固定化是使復合酶結合到載體上，所述載體為海藻酸鈉、聚乙烯醇、硅藻土、分子篩中的一種或多種。

7.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述產黑色素的芽孢桿菌為芽孢桿菌(Bacillus?Subtilis)PMR02，保藏號CGMCC?No.5640。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，對芽孢桿菌PMR02進行發酵培養采用的培養基為葡萄糖1～3g/L、(NH₄)₂SO₄1～3g/L、K₂HPO₄0.5～2g/L、CaCO₃1～3g/L、MgSO₄0.5～1g/L，培養條件為：按2％～10％接種量接種種子培養液，34℃～42℃，搖床轉速100～200r/min，發酵16～24h；所述種子培養液在630nm的OD值為0.8。

9.一種產黑色素的芽孢桿菌(Bacillus?Subtilis)PMR02，保藏號為CGMCC?No.5640。

10.權利要求9所述的芽孢桿菌PMR02在制備黑色素及其前體物質中的應用，通過對芽孢桿菌PMR02進行發酵，從發酵液中提取的含有酪氨酸酶的復合酶，以酪氨酸和/或其衍生物為底物，通過酶促反應生成黑色素及其前體物質。