[發(fā)明專利]一種常山堿的提取工藝

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210015939.6
• 申請(qǐng)日: 2012-01-18
• 公開（公告）號(hào): CN102600217A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭志廷;梁劍平;羅曉琴;雷宏?yáng)|
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所
• 主分類號(hào): A61K36/185
• 分類號(hào): A61K36/185;A61P33/02;C07D401/06
• 代理公司: 北京中恒高博知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11249
• 代理人: 夏晏平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種藥物提取工藝，具體地，涉及一種常山堿的提取工藝。

背景技術(shù)

中獸藥是近年來的新興產(chǎn)業(yè)，簡(jiǎn)單說，就是將中醫(yī)藥理論應(yīng)用于動(dòng)物身上，由于中藥既可預(yù)防和治療疾病、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，又不會(huì)產(chǎn)生危害人體健康的藥物殘留，因此，逐步受到廣大獸藥生產(chǎn)企業(yè)和畜禽養(yǎng)殖者的重視，中獸藥的生產(chǎn)和使用比例逐年擴(kuò)大。目前，許多大型畜禽養(yǎng)殖企業(yè)已將中獸藥作為預(yù)防、治療疾病及促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)的重點(diǎn)使用對(duì)象，中小型養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)的中獸藥使用也日益廣泛，中獸藥更是成為獸藥生產(chǎn)企業(yè)研制和開發(fā)的首選項(xiàng)目。

中藥常山(Dichroa?febrifuga?Lour)是一種重要的植物資源，全世界共有13種，我國(guó)有3?種，廣泛分布于陜、甘、川、藏等省區(qū)，常山根、莖、葉、花均可入藥。常山堿為常山中主要有效成分之一，國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，常山堿及其衍生物(如常山酮)具有良好的退熱、抗炎、抗瘧疾、抗腫瘤、抗流感、降血壓以及治療糖尿病、硬皮病等藥理作用。眾所周知，常山酮具有良好的抗球蟲效果，但作為一種化學(xué)合成藥，國(guó)外只有法國(guó)一家公司生產(chǎn)(商品名為速丹)，國(guó)內(nèi)目前尚無(wú)常山酮工業(yè)化的報(bào)道，產(chǎn)品主要依靠進(jìn)口，價(jià)格昂貴，在臨床中全面推廣幾乎不可能。最新研究發(fā)現(xiàn)，常山堿同樣具有良好的抗球蟲效果，且作為一類新型抗球蟲提取藥，具有成本低廉、安全高效和綠色環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)，市場(chǎng)應(yīng)用前景廣闊。試驗(yàn)結(jié)果表明，純度為0.24%的常山堿按照0.05?g/kg飼料添加給藥，對(duì)人工感染雞柔嫩艾美爾球蟲病具有良好的治療效果，抗蟲指數(shù)ACI可達(dá)169.01。

球蟲病是呈全球性分布的常見禽病之一，禽類5%～10%的死亡率是由球蟲病引起的，并導(dǎo)致家禽生長(zhǎng)受阻、飼料轉(zhuǎn)化率降低和肉蛋品質(zhì)下降。全世界每年由雞球蟲病造成的經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)50億美元，我國(guó)為30億元人民幣。球蟲病流行的雞群生長(zhǎng)嚴(yán)重滯后，隨之誘發(fā)大腸桿菌病、支原體病等，進(jìn)一步加大養(yǎng)雞業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失。在球蟲感染中，柔嫩、堆型和巨型艾美耳球蟲對(duì)雞群威脅最大。目前，用球蟲疫苗免疫預(yù)防尚處于起步階段，疫苗的穩(wěn)定性和劑型等方面存在諸多不足。常用的抗球蟲化學(xué)藥物很多，但容易產(chǎn)生耐藥性，且不能提高機(jī)體免疫力，氯羥吡啶，鹽酸氨丙啉等藥物甚至對(duì)免疫力有明顯的抑制效應(yīng)，導(dǎo)致防治效果降低。

常山堿是農(nóng)業(yè)部獸用藥物創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提取分離得到的抗球蟲組分，包括α、β和γ三種，藥理毒理試驗(yàn)表明該藥具有廣譜高效、低毒低殘留和不易產(chǎn)生耐藥性的特點(diǎn)，對(duì)雞、火雞、兔子、豬、牛、羊、魚和部分野生動(dòng)物球蟲病均有良好的防治作用。球蟲引發(fā)雞大量死亡的一個(gè)最主要原因是導(dǎo)致雞盲腸、小腸嚴(yán)重出血，進(jìn)而造成機(jī)體免疫力下降和繼發(fā)其它疾病。我們研究發(fā)現(xiàn)，常山堿不僅對(duì)雞球蟲有良好的抑殺作用，而且可激發(fā)機(jī)體抗感染的免疫力和增強(qiáng)白細(xì)胞的吞噬作用，進(jìn)而顯著提高抗球蟲效果。

提取工藝是生物堿工業(yè)化生產(chǎn)的首要環(huán)節(jié)，特別是其提取和分離操作。常山中常山堿的含量極低，僅為萬(wàn)分之三，提取分離非常困難。傳統(tǒng)的生物堿提取分離方法能耗、物耗大，?雜質(zhì)多，效率低，如浸漬、煎煮、溶劑回流、滲漉等。超聲輔助提取技術(shù)主要是靠超聲波空化產(chǎn)生的極大壓力造成被破碎物細(xì)胞壁及整個(gè)生物體瞬間破裂，同時(shí)超聲波產(chǎn)生振動(dòng)作用加強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散及溶解，加速植物中有效成分滲透進(jìn)入溶劑而使提取效率獲得顯著提高。利用超聲技術(shù)可以縮短提取時(shí)間，提高提取率，提取過程溶劑用量相對(duì)較少，可以降低成本，并且整個(gè)過程無(wú)需加熱，提高了熱敏性生物堿的提取率且對(duì)其生理活性基本沒有影響。常用的純化方法包括有機(jī)溶劑萃取和大孔樹脂吸附等方法；有機(jī)溶劑萃取雖然操作簡(jiǎn)單，但存在有機(jī)溶劑用量大、對(duì)人危害大和純化效果差等缺點(diǎn)；大孔樹脂吸附法純化效果較好，但前處理繁瑣，費(fèi)時(shí)費(fèi)力成本高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有的缺陷，提供了一種安全、低成本、高效率的常山堿提取工藝。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

本發(fā)明所提常山堿的提取工藝具有以下有益效果：

本發(fā)明中將常山粉碎后，利用稀鹽酸酸化、超聲波萃取的方法提取常山堿，顯著縮短了提取時(shí)間，提高了常山堿得率；利用二氯甲烷萃取，結(jié)合硅膠柱層析的方法進(jìn)行純化，提高了常山堿的純度，同時(shí)，工藝本身操作簡(jiǎn)單，使用安全，成本低廉，特別適于工業(yè)化生產(chǎn)；所用試劑毒性小，價(jià)格便宜，可回收利用；超聲提取技術(shù)效率高、周期短、效果好；硅膠色譜法純化效果好，一次純化后常山堿含量可達(dá)0.63%-1.38%，為常山堿的工業(yè)化生產(chǎn)和球蟲病防治奠定了基礎(chǔ)。

附圖說明

圖1：鄰氨基苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2：供試藥材、對(duì)照藥材和β-常山堿標(biāo)準(zhǔn)品的TLC圖譜。