[發明專利]自組裝多肽及其在促進腫瘤細胞形成多細胞球體中的應用

有效

• 申請號: 201210014956.8
• 申請日: 2012-01-17
• 公開（公告）號: CN102558304A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 任輝;黃斌;董友玉;韓藍青;張曙光
• 申請（專利權）人: 海貍（廣州）生物科技有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K7/08;C12N5/09
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉

技術領域

本發明涉及一種可自組裝形成水凝膠的多肽及其在促進腫瘤細胞形成多細胞球體中的應用。

背景技術

多肽具有獨特的生物學活性。1999年，美國國家衛生研究院(National?Institutes?of?Health，NIH)公布了兩種人類免疫缺陷病毒(HIV-I)多肽疫苗對人體進行的I期臨床試驗結果，證實這兩種多肽疫苗能刺激機體產生特異性抗體和特異性免疫細胞，并有較好的安全性。清華大學也證實HIV-I膜蛋白內一段多肽具有很強的免疫原性。丙肝病毒多肽疫苗也顯示有良好的發展前景，國外學者從丙肝病毒(HCV)外膜蛋白E2內篩選出一段多肽，它可刺激機體產生保護性抗體?？偹苤?，病毒通過與宿主細胞上的特異受體結合吸附細胞，依賴其自身的特異蛋白酶進行蛋白加工及核酸復制。因此，如果從肽庫內篩選能與宿主細胞受體結合的多肽或能與病毒蛋白酶等活性位點結合的多肽，那么這些多肽就可用于抗病毒的治療。此外，多肽還能夠模擬細胞因子，具有細胞因子活性的多肽可開發成新型藥物。

綜上所述，多肽存在獨特的生物學活性，具有多方面的用途，因此，近些年來，生命科學與材料科學領域對多肽的研究也越來越多。其中，自組裝多肽納米纖維材料(self-assembling?peptide?nanofiber?scaffold，SAPNS)更是因其具有良好的材料——細胞界面相容性和生物學活性越來越受關注。

在生命科學研究領域，對于細胞的體外培養，關注的不僅僅是細胞的分裂生長，更為重要的是它們經過傳代后能否維持體內生長時的性狀。在很多情況下，常規單層細胞培養技術(二維細胞培養，Two-dimensional，2D)所取得的研究成果和體內的情況并不符合。細胞在體外二維環境下增殖，細胞的基因表達、信號傳導和形態學特征都與體內的有異，細胞會逐漸喪失原有的性狀，導致科研人員無法獲得可靠的實驗數據。

體外細胞培養的一個重要原則是模擬細胞體內生長的環境，該環境不僅能讓細胞生長傳代，還能最大程度地維持細胞在體內生長時的性狀，并分化產生新的組織結構，以便全面研究發育過程。

人體組織為三維(Three-dimensional，3D)結構，但是目前科學界對人體組織結構、功能、病理等方面進行研究時卻往往依賴體外的2D細胞培養或動物模型。由于體外2D細胞培養所創造的細胞培養環境與細胞體內生長環境有很大不同，如細胞與細胞、細胞與基質的相互作用等，因此利用體外2D細胞培養不足以反映細胞真實的生長狀況。動物模型由于與人體存在種屬差異，同樣不能真實地反映體內細胞生長特征。在此情況下，三維細胞培養技術應運而生。三維細胞培養技術(three?dismensional?cell?culture，TDCC)是將具有三維結構的載體與各種不同種類的細胞在體外共同培養，使細胞能夠在載體的三維立體空間結構中遷移、生長，構成三維的“細胞——載體復合物”體系。

目前，國內市場銷售的三維細胞培養材料雖然在一定程度上提高了細胞培養效果，但由于其中多數產品是采用非生物降解材料或化學材料制成，其降解產物和殘留有機溶劑往往對細胞有一定的毒副作用，常引起細胞無菌性炎癥，影響實驗結果和數據的可靠性；部分產品雖然是采用生物可降解材料制成，但一些生物材料含有大量未鑒定成分，這為臨床研究帶來巨大風險；此外，一部分生物材料制成的三維細胞培養產品具有保質期短，不易保存和應用的特點。

發明內容

為了克服現有技術的缺點與不足，本發明的首要目的在于提供一種可自組裝形成水凝膠的多肽。

本發明的另一目的在于提供上述自組裝多肽在促進腫瘤細胞形成多細胞球體中的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種自組裝多肽，包含一段由3-20個連續的疏水氨基酸組成的氨基酸片段，在該氨基酸片段的N末端或C末端或同時在N末端和C末端連接特定多肽；

所述特定多肽的序列為GYRGDS(SEQ?ID?NO.1)、GYRGDSPRGDS(SEQ?ID?NO.2)、YRGDS(SEQ?ID?NO.3)、PFSSTKT(SEQ?ID?NO.4)、SKPPGTSS(SEQ?ID?NO.5)、YRGDSPRGDS(SEQ?ID?NO.6)或PRGDS(SEQ?ID?NO.7)；

所述的疏水氨基酸為丙氨酸(單字母縮寫A)、纈氨酸(V)、異亮氨酸(I)、亮氨酸(L)、苯丙氨酸(F)、脯氨酸(P)、酪氨酸(Y)或甘氨酸(G)；