[發(fā)明專利]集成電化學(xué)檢測技術(shù)的定量PCR微流控芯片一體化裝置

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210013323.5
• 申請(qǐng)日: 2012-01-16
• 公開（公告）號(hào): CN102559488A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉愛林;陳偉;林新華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福建醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C12M1/38
• 分類號(hào): C12M1/38;C12M1/36;C12M1/34;C12Q1/68
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司 35208
• 代理人: 王義星

1.一種集成電化學(xué)檢測技術(shù)的定量PCR微流控芯片一體化裝置，包括固定底座（7）、三個(gè)獨(dú)立的恒溫器，一個(gè)PCR微流控芯片和電化學(xué)檢測器，其特征是在固定底座（7）上制作有三個(gè)獨(dú)立的恒溫器，三個(gè)獨(dú)立的恒溫器分別為低溫退火恒溫器、適溫延伸恒溫器和高溫變性恒溫器，所述的低溫退火恒溫器、適溫延伸恒溫器和高溫變性恒溫器是依序并排設(shè)置的，所述的低溫退火恒溫器、適溫延伸恒溫器和高溫變性恒溫器上分別形成有可精確控制溫度的低溫退火區(qū)（1）、適溫延伸區(qū)（2）和高溫變性區(qū)（3）的三個(gè)溫度區(qū)，在低溫退火區(qū)（1）、適溫延伸區(qū)（2）和高溫變性區(qū)（3）分別具有三個(gè)基本PCR反應(yīng)步驟所需的溫度，在上述三個(gè)獨(dú)立的恒溫器的上方放置有PCR微流控芯片（6），在PCR微流控芯片內(nèi)分布有擴(kuò)增反應(yīng)管，擴(kuò)增反應(yīng)管有PCR反應(yīng)進(jìn)液口（4）、PCR反應(yīng)擴(kuò)增后出液口（9）和DNA擴(kuò)增反應(yīng)管，PCR反應(yīng)進(jìn)液口（4）位于高溫變性區(qū)（3）內(nèi)且與微型注射泵連接，擴(kuò)增反應(yīng)管依次穿過高溫變性區(qū)（3）、適溫延伸區(qū)（2）和低溫退火區(qū)（1），擴(kuò)增反應(yīng)管作為PCR微流控芯片中的PCR擴(kuò)增反應(yīng)區(qū)（5），在適溫延伸區(qū)（2）的DNA擴(kuò)增反應(yīng)管中設(shè)置有電化學(xué)檢測器（8），PCR微流控芯片（6）中的PCR反應(yīng)能在低溫退火區(qū)（1）、適溫延伸區(qū)（2）和高溫變性區(qū)中實(shí)現(xiàn)；PCR微流控芯片（6）中各PCR反應(yīng)的高溫變性區(qū)（3）、適溫延伸區(qū)（2）和低溫退火區(qū)（1）相應(yīng)與控制解鏈、延伸和退火的三個(gè)恒溫器位置相對(duì)應(yīng)；所述適溫延伸區(qū)（2）的電化學(xué)檢測器檢測PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程中DNA電化學(xué)雜交指示劑變化量，間接反應(yīng)PCR反應(yīng)后擴(kuò)增產(chǎn)物的量，實(shí)現(xiàn)PCR反應(yīng)擴(kuò)增物的定量檢測。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的集成電化學(xué)檢測技術(shù)的定量PCR微流控芯片一體化裝置，其特征是所述的三個(gè)獨(dú)立的恒溫器是由銅、鋁或不銹鋼材料制成的微型長方形的恒溫器。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的集成電化學(xué)檢測技術(shù)的定量PCR微流控芯片一體化裝置，其特征是DNA擴(kuò)增管的管道設(shè)置長度和管道內(nèi)流體所設(shè)置的流速能控制PCR反應(yīng)液在各個(gè)溫度區(qū)的時(shí)間和周期循環(huán)次。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的集成電化學(xué)檢測技術(shù)的定量PCR微流控芯片一體化裝置，其特征是所述的電化學(xué)檢測器包括工作電極（10）、對(duì)電極（11）和參比電極（12）。

5.權(quán)利要求1-4之任一所述的集成電化學(xué)檢測技術(shù)的定量PCR微流控芯片一體化裝置的PCR反應(yīng)物檢測方法，包括如下步驟：調(diào)節(jié)所需實(shí)驗(yàn)溫度以確保PCR微流控芯片中各PCR反應(yīng)在低溫退火區(qū)（1）、適溫延伸區(qū)（2）和高溫變性區(qū)（3）的三個(gè)溫度區(qū)的溫度恒定；利用微型注射泵將PCR反應(yīng)液在PCR反應(yīng)進(jìn)液口（4）處進(jìn)入DNA擴(kuò)增反應(yīng)管，PCR反應(yīng)液在各個(gè)溫度區(qū)的時(shí)間和周期循環(huán)次是通過DNA擴(kuò)增反應(yīng)管的管道長度和管道內(nèi)的流體流速來調(diào)節(jié)控制；最后利用DNA擴(kuò)增反應(yīng)管內(nèi)的電化學(xué)檢測器檢測PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程中DNA電化學(xué)雜交指示劑變化量，間接反應(yīng)PCR反應(yīng)后擴(kuò)增產(chǎn)物的量，實(shí)現(xiàn)PCR反應(yīng)物的定量檢測。