[發明專利]從遠志中分離制備細葉遠志皂苷的方法

有效

• 申請號: 201210010622.3
• 申請日: 2012-01-15
• 公開（公告）號: CN102558256A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 李震宇;王雪潔;秦雪梅;張麗增
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C07H15/256
• 分類號: C07H15/256;C07H1/08
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 楊耀田

技術領域

本發明涉及中藥有效成分的分離制備，具體是從遠志中分離制備細葉遠志皂苷化學對照品的方法。

技術背景

細葉遠志皂苷，全稱遠志皂苷元--3--O--β--D--吡喃葡萄糖苷?，英文名為tenuifolin，其結構式如下，是一類五環三萜類化合物，為遠志總皂苷的堿水解物，從2010版《中國藥典》開始作為中藥化學對照品用于遠志藥材的質量評價。

目前文獻報道已有學者對細葉遠志皂苷提取分離。董曉兵等（遠志皂苷對照品細葉遠志皂苷的制備．董曉兵等．中藥新藥與臨床藥理，第18卷第1期．2007）主要采用以下步驟：藥材提取—大孔柱層析—堿水解—乙酸乙酯萃取—水飽和正丁醇萃取—硅膠柱層析—重結晶。此方法較為繁瑣，成本較大，且在制備過程中需要多種有機材料及化學試劑，對環境污染較大。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從遠志中分離制備細葉遠志皂苷的方法，該方法操作步驟簡單，對環境污染較小，細葉遠志皂苷純度在98%以上，可以作為化學對照品。

本發明提供的一種從遠志中分離制備細葉遠志皂苷的方法，包括如下步驟：

步驟1、將干燥的遠志藥材粉碎，加入5~10倍量的50~90%的乙醇溶液回流提取，提取液經過濾，濃縮，得浸膏；

步驟2、將步驟1所得浸膏加入1~5倍量石油醚超聲或攪拌提取2~3次，每次1.5~4小時，靜置分層，取下層揮干試劑，得干粉；

步驟3、將步驟2所得的干粉中加入20~300倍量質量百分濃度為10%的氫氧化鈉溶液，加熱回流1.5~4小時，冷卻后加入濃鹽酸調節pH至1~5，靜置至析出沉淀，過濾，濾渣干燥，得干粉；

步驟4、對步驟3所得干粉過硅膠柱，以乙酸乙酯:甲醇:水=15~20:2:1體積比的混合液洗脫，薄層層析檢測，合并含細葉遠志皂苷的部分，濃縮，得細葉遠志皂苷粗品；

步驟5、對步驟4所得粗品進行重結晶，所得白色晶體即為高純度的細葉遠志皂苷。其可以作為化學對照品。

所述步驟2中1~5倍量石油醚優選2倍量。

所述步驟4中乙酸乙酯:甲醇:水的體積比優選為15:2:1。

所述步驟4中所述薄層層析的條件為：乙酸乙酯:甲醇:水=11:2:1或氯仿:甲醇:水=75:25:2，顯色劑為硫酸香草醛溶液，105℃加熱至出現藍紫色斑點，出現藍紫色斑點表明含細葉遠志皂苷。

本發明的優點是：操作步驟簡單，所用有機材料及化學試劑較少，對環境污染較小，所獲得的細葉遠志皂苷成本較低，純度高，經高效液相色譜法檢測純度可達98%以上，可作為化學對照品用來控制有關遠志藥材及制劑的質量。

附圖說明

圖1為本發明實施例1制備的細葉遠志皂苷的純度分析色譜圖。

圖2為本發明實施例1制備的細葉遠志皂苷的¹H?NMR圖。

具體實施方式

通過以下實施例進一步詳細說明本發明，但本發明的范圍并不受這些實施例的任何限制。

實施例1

將干燥的遠志藥材粉碎，取150g加入1200ml?75%的乙醇溶液浸泡半小時后，加熱回流提取3小時，3小時后過濾得濾液，重復3次，合并3次提取液，減壓濃縮得浸膏。向浸膏中加入300ml石油醚，超聲提取3小時，3小時后過濾得濾渣，濾渣揮干試劑得干粉。向干粉中加入4500ml為10%的氫氧化鈉溶液，加熱回流2小時，冷卻后加入濃鹽酸調節pH，使pH值為3.5，充分攪拌，靜置至析出沉淀，過濾得濾渣，濾渣干燥，得干粉。對所得干粉進行硅膠柱層析（1:40，g/g），以乙酸乙酯:甲醇:水=15:2:1進行洗脫，并進行薄層層析檢測，薄層層析條件為乙酸乙酯:甲醇:水=11:2:1，顯色劑為硫酸香草醛溶液，合并105℃下加熱后出現藍紫色斑點的部分，減壓濃縮，即得細葉遠志皂苷粗品（干重2.5g，細葉遠志皂苷含量為90%）。對其進行重結晶，得白色晶體2.25g。1H-NMR（600MHz，C5D5N）δ：5.89（1?H，m，H-12），5.10（1?H，d，J=7.5Hz，H-1?of?Glc），1.99，1.54，1.05，1.00，0.85（each?3?H，s）。經高效液相色譜法檢測其純度99.9%。

高效液相色譜（HPLC）

定量方法為面積歸一法

檢測波長為203nm

HPLC條件：

柱子條件Diamonsil?C18(2)?5u?（200×4.6mm）

流速：1.0ml/min