[發明專利]一種沒藥烷倍半萜二聚體類化合物及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 201210009795.3
• 申請日: 2012-01-05
• 公開（公告）號: CN102584547A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 王長云;邵長倫;孫玲玲
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C07C43/23
• 分類號: C07C43/23;C07C43/295;C07C39/12;C12P7/22;A61P35/00;C12R1/66
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技術領域

本發明涉及一種從海綿內生真菌的菌體中提取分離的沒藥烷倍半萜二聚體類化合物及其制備方法和作為抗腫瘤藥的應用。?

背景技術

來自于海洋生物(珊瑚，海綿等)和海洋微生物的沒藥烷型倍半萜是一類具有廣泛藥理活性的化合物。研究表明，該類化合物多具有抗腫瘤，抗菌，抗病原微生物，酶抑制等藥用價值。然而關于該類化合物的二聚體及其生物活性的報道還極為少見。到目前為止，僅有一例關于該類化合物二聚體的報道。本發明人研究發現來自于海綿(Xestospongia?testudinaria)內生真菌Aspergillus?sp.的液體發酵產物的粗提物顯示較強的細胞毒活性，遂對其活性成分進行了研究，結果發現了具有抗腫瘤活性的沒藥烷型倍半萜二聚體化合物。目前尚未見任何對這些化合物的化學結構及抗腫瘤活性的研究報道，市場上也未見與此有關的藥物。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種來源于海洋真菌的沒藥烷型倍半萜二聚體化合物及其制備方法與作為抗腫瘤藥的應用，它能彌補現有技術的上述需求。菌種保藏信息：保藏單位名稱：中國科學院微生物研究所；保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號；保藏日期：2011年11月03日；保藏編號：5440；分類命名：曲霉Aspergillus?sp.。?

一種沒藥烷型倍半萜二聚體化合物，其特征在于分子式為C₃₀H₄₆O₅，結構式為：?

式中R₁＝OH，?或?或R₁＝OH，?

上述沒藥烷型倍半萜二聚體的制備方法，其特征在于先在菌種培養基中對海洋真菌進行菌種培養，再在發酵培養基中發酵培養，將所得發酵液過濾，得到濾液和菌體。將所得濾液用乙酸乙酯提取，得到濾液乙酸乙酯粗提物；將所得菌體先用丙酮提取，提取液合并濃縮后，再用乙酸乙酯提取，得到菌體乙酸乙酯粗提物。再將所得的兩部分乙酸乙酯粗提物合并，減壓濃縮后進行色譜分離，將所得洗脫液濃縮，得無色油狀物，即為沒藥烷型倍半萜二聚體化合物。?

上述的沒藥烷型倍半萜二聚體化合物在制備抗腫瘤藥中的應用。?

本發明制備的沒藥烷型倍半萜二聚體化合物對人肝癌細胞HepG-2和人宮頸癌細胞Caski具有較強的細胞毒活性，可用作抗腫瘤藥物，并且原料可以進行大規模生產，應用前景廣闊。?

具體實施方式

制備本發明的化合物時，采取下述各步驟：?

(1)先在菌種培養基中對海洋真菌(Aspergillus?sp.)進行菌種培養，所用的培養基含有葡萄糖1.0％(重量百分數，下同)、酵母膏0.1％、蛋白胨0.2％、瓊脂1.0％、氯化鈉3.0％，其余為水。使用時將其制成試管斜面，上述真菌菌株在30℃下培養5天。?

所述的菌種培養基含有葡萄糖0.1％-5.0％、酵母膏0.01％-1％、蛋白胨0.01％-1％、瓊脂0.1％-3.0％、氯化鈉0.05％-5％，其余為水。培養溫度為15-35℃，培養時間為3-10天。?

(2)上述培養所得的真菌菌種進行發酵培養，所用的發酵培養基含有葡萄糖1.0％、酵母膏0.1％、蛋白胨0.2％、氯化鈉3.0％，其余為水。真菌菌株于25℃?培養30天。?

所述的發酵培養基含有葡萄糖0.1％-5.0％、酵母膏0.01％-1％、蛋白胨0.01％-1％、氯化鈉0.05％-5％，其余為水。培養溫度為15-35℃，培養時間為7-40天。?

(3)化合物的提取分離?