[發(fā)明專利]檢測細胞DACT2基因啟動子區(qū)DNA甲基化狀態(tài)的引物對及試劑盒無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210009162.2 | 申請日: | 2012-01-12 |
| 公開(公告)號: | CN102586425A | 公開(公告)日: | 2012-07-18 |
| 發(fā)明(設計)人: | 郭明洲;楊云生;賈巖;于源滋;韓為東;韋立新 | 申請(專利權)人: | 中國人民解放軍總醫(yī)院 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京瑞盟知識產(chǎn)權代理有限公司 11300 | 代理人: | 劉昕 |
| 地址: | 100853*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 細胞 dact2 基因 啟動 子區(qū) dna 甲基化 狀態(tài) 引物 試劑盒 | ||
1.一種用于檢測細胞DACT2基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)的引物對,包括甲基化引物和非甲基化引物,其中,所述甲基化引物的上游引物核苷酸序列為:5’-GCGCGTGTAGATTTCGTTTTTCGC-3’,下游引物核苷酸序列為:5’-AACCCCACGAACGACGCCG-3’;所述非甲基化引物的上游引物核苷酸序列為:5’-TTGGGGTGTGTGTAGATTTTGTTTTTTGT-3’,下游引物核苷酸序列為:5’-CCCAAACCCCACAAACAACACCA-3’。
2.一種檢測肺癌和胃癌細胞的試劑盒,其特征在于:含有權利要求1中所述的甲基化引物或非甲基化引物。
3.根據(jù)權利要求2所述的試劑盒,其特征在于:還含有甲基化對照MSP模板,該模板為硫化修飾后的細胞DACT2基因啟動子區(qū)100%甲基化的癌細胞DNA。
4.根據(jù)權利要求2所述的試劑盒,其特征在于:還含有非甲基化對照MSP模板,該模板為硫化修飾后的細胞DACT2基因啟動子區(qū)100%非甲基化的正常細胞DNA。
5.根據(jù)權利要求2所述的試劑盒,其特征在于:還含有作為雙陰性系統(tǒng)對照的ddH2O。
6.根據(jù)權利要求2至5中任一項所述的試劑盒,其特征在于:還含有MSP反應所需的下列成分:50mM?MgCl2,10×MSP?buffer,10mMdNTP?mixture,Hot?start?Taq酶。
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