[發(fā)明專利]適合白色念珠菌與葡萄球菌共同生長的固體培養(yǎng)基

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210008890.1
• 申請日: 2012-01-12
• 公開（公告）號: CN102517240A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發(fā)明（設計）人: 孫淑娟;高媛;劉萍
• 申請（專利權(quán)）人: 山東省千佛山醫(yī)院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;C12R1/44;C12R1/725
• 代理公司: 濟南圣達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 鄧建國

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及適合白色念珠菌與葡萄球菌共同生長的固體培養(yǎng)基。

背景技術(shù)

近年來，隨著惡性腫瘤、艾滋病、自身免疫病等發(fā)病率的增多，導管插管和器官移植等技術(shù)的開展，廣譜抗生素、皮質(zhì)激素和免疫抑制劑的廣泛使用，真菌感染的發(fā)病率急劇上升(Georgopapadakou?NH.Antifungals：mechanism?of?action?and?resistance，established?and?novel?drugs[J].Current?Opinion?in?Microbiology，1998，1(5)：547-557.)，特別是呼吸機與大量生物材料的應用，使得生物膜(biofilm，BF)相關(guān)性真菌的感染發(fā)生率不斷增加。生物膜是微生物生活的普遍形態(tài)。生物膜(bioflim，BF)是一種附著于組織或生物材料表面，由其自身產(chǎn)生的胞外基質(zhì)(extracellular?maxtrix)包裹的有結(jié)構(gòu)的一種或多種菌細胞群體。Bill?Costerton經(jīng)過30年的研究發(fā)現(xiàn)，生物膜是微生物(細菌和真菌)生存的普遍形式(Tom?Coenye，Hans?J.Nelis?In?vitro?and?in?vivo?model?systems?to?study?microbial?biofilm?formation.Journal?of?Microbiological?Methods?2010，83：89-105)。BF可以由一種菌形成，也可由多種微生物混合生長形成。

人體內(nèi)存在多種BF混合感染的情況，白色念珠菌和葡萄球菌是常見的混合感染分離菌。念珠菌是人體內(nèi)常見的共生菌，根據(jù)美國院內(nèi)感染控制組織的資料，白色念珠菌是第4位引起院內(nèi)血流感染的病原微生物，但卻是死亡率最高的致病菌，死亡率可高達40％。白念具有較強的形成生物膜的能力，幾乎于所有的醫(yī)療設備上均能形成生物膜。

葡萄球菌是院內(nèi)感染的主要條件致病菌，大多數(shù)植入相關(guān)的感染都是由葡萄球菌引起的，特別是金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌(Brian?M.Peters，Mary?Ann?Jabra-Rizk，Mark?A.Scheper，Jeff?G.Leid，John?William?Costerton?and?Mark?E.Shirtliff.Microbial?interactions?andprotein?expression?in?Staphylococcus?aureus?Candida?albicans?dual-species?biofilms.FEMS?Immunol?Med?Microbiol?2010，59：493-503)。研究表明白色念珠菌形成生物膜的骨架結(jié)構(gòu)，細菌生長依附于白念的菌絲周圍，形成混合BF。其中金黃色葡萄球菌對白念的吸附能力最強。另有研究指出，在混合生物膜內(nèi)表皮葡萄球菌和白色念珠菌表現(xiàn)出廣泛的交互作用，并且某些表皮葡萄球菌株產(chǎn)生的胞外聚合物能阻止氟康唑滲入混合真菌-細菌生物膜(Adam?B，Baillie?GS，Douglas?LJ，et?al.Mixed?species?biofilms?of?Candida?albicans?and?Staphylococcus?epidermidis[J].Journal?Of?Medical?Microbiology，2002，51(4)：344-349)。據(jù)報道，27％院內(nèi)白色念珠菌血液感染伴有細菌感染，金黃色葡萄球菌是第三個常見的復合感染菌。真菌角膜炎是臨床常見感染，研究表明，在亞洲30-60％的真菌角膜炎伴細菌混合感染(Douglas?L.J.Candida?biofilms?and?their?role?in?infection[J].Trends?Microbiol.2003，11(1)：30-36)。在50例口炎中，39例為白色念珠菌與葡萄球菌混合定植，這些混合共生菌群通常以混合生物膜的方式存在，治療非常困難。

目前，有關(guān)抗真菌與細菌混合感染的研究不斷增多，適合真菌與細菌分別培養(yǎng)與藥效研究的培養(yǎng)基已有現(xiàn)成的產(chǎn)品。細菌培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是營養(yǎng)瓊脂。YPD(Yeast?Extract?Peptone?Dextrose?Medium)培養(yǎng)基，又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基，主要配方是：1％Yeast?Extract(酵母膏)，2％Peptone(蛋白胨)，2％Dextrose(glucose)(葡萄糖)，若制固體培養(yǎng)基，加入2％瓊脂粉，主要用于酵母菌的培養(yǎng)，是目前常用的培養(yǎng)白色念珠菌的固體培養(yǎng)基之一，但適合念珠菌與葡萄球菌共同培養(yǎng)的培養(yǎng)基目前還沒有成熟的產(chǎn)品可供使用。