[發明專利]轉Bt基因抗蟲農作物標準質粒及其應用無效
| 申請號： | 201210008313.2 | 申請日： | 2012-01-12 |
| 公開（公告）號： | CN102586301A | 公開（公告）日： | 2012-07-18 |
| 發明（設計）人： | 崔海峰;俞曉平;葉子弘;付賢樹;金榮愉;趙煦泓 | 申請（專利權）人： | 中國計量學院 |
| 主分類號： | C12N15/63 | 分類號： | C12N15/63;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州天正專利事務所有限公司 33201 | 代理人： | 黃美娟;冷紅梅 |
| 地址： | 310018 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | bt 基因 農作物 標準 質粒 及其 應用 | ||
1.一種轉Bt基因抗蟲農作物標準質粒，由SEQ?ID?No.1所示核苷酸片段兩端添加Pst?I酶切位點后，所得片段插入克隆載體制得。
2.如權利要求1所述的轉Bt基因抗蟲農作物標準質粒，由SEQ?ID?No.2所示核苷酸片段插入pEASY-T3載體制得。
3.如權利要求1所述轉Bt基因抗蟲農作物標準質粒在檢測轉Bt基因農作物的轉基因含量中的應用。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述轉Bt基因抗蟲農作物標準質粒用于檢測下列之一的Bt外源基因：(1)CryIA(a)，(2)CryIA(b)，(3)CryIA(c)，(4)CryIab/ac。
5.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述農作物為下列之一：水稻、玉米、大豆、棉花、油菜。
6.一種轉Bt基因農作物的熒光定量PCR檢測試劑盒，主要包括特異性引物和探針、PCR緩沖液、脫氧三磷酸核苷混合物和DNA聚合酶和轉Bt基因抗蟲農作物標準質粒，其特征在于：所述特異性引物和探針序列如下：
Bt-F-Primer：5’-GTAAGGTCGTTGTAACGGCTATTG-3’
Bt-R-Primer：5’-CGCCTTGACCACAGCTATCC-3’
Bt-Probe：5’-(FAM)CCACCTTTGCCCAAACACGCTAACG(Eclipse)-3’，其中FAM為熒光報告基團，Eclipse為熒光淬滅基團；
所述轉Bt基因抗蟲農作物標準質粒由SEQ?ID?No.2所示核苷酸片段插入pEASY-T3載體制得。
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