[發明專利]一種將液態漆酶制備成高濃度高純度固態漆酶的方法

有效

• 申請號: 201210007912.2
• 申請日: 2012-01-12
• 公開（公告）號: CN102559621A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 張峰;廖祥儒;張明
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種將液態漆酶制備成高濃度高純度固態漆酶的方法，其特點是以2010年9月15日保存于中國典型培養物保藏中心的保藏編號為：CCTCC?M?2010235的Pycnoporus?sp.SYBC-L3高產漆酶的密孔菌屬菌株為生產出發菌株，將各種不同成分的培養基和各種方法生產的液態漆酶粗酶液制備成高濃度固態漆酶，其中包括：

(1)以豆粕或硝酸鈉為氮源，以麥芽糖或葡萄糖或果糖或纖維二糖等為碳源發酵生產制備的液態漆酶。

(2)以馬鈴薯為主要原料發酵高產制備的液態漆酶。

(3)以水稻秸稈為原料固態發酵制備的液態漆酶。

2.一種將液態漆酶制備成高濃度高純度固態漆酶的方法，使用的主要設備是超濾機——選用分子量為1萬-10萬規格的超濾膜和噴霧干燥機——進風溫度150℃至200℃、出風溫度70℃至90℃，將液態漆酶制備成高濃度高純度固態漆酶，其工藝、條件和作用為：

(1)先將發酵生產制備出的漆酶發酵液，用抽濾或壓濾或離心的方法，除去菌體、較大的懸浮物和顆粒，得到漆酶粗酶液，由于菌體是藥用真菌，蛋白質含量高且產漆酶，故收集的菌體起碼可作飼料或生物肥料。

(2)將除去菌體、較大的懸浮物和顆粒的粗酶液，直接用噴霧干燥設備按進風溫度150℃至200℃、出風溫度70℃至90℃的條件噴霧干燥成固態漆酶，固態漆酶的每克酶活是發酵粗酶液每毫升酶活的50倍以上，液態發酵粗酶液體積和重量是固態漆酶體積和重量的100倍以上。

(3)用超濾設備——選用分子量為1萬-10萬規格的超濾膜將除去菌體、較大的懸浮物和顆粒的粗酶液超濾純化并濃縮5-20倍，具體為：先選用1萬分子量的超濾膜，超濾除去分子量在1萬以下的小分子物質，然后用10萬分子量的超濾膜，超濾收集分子量在1-10萬的液體，因為我們制備的漆酶的分子量約為5.8萬，得到純化并濃縮了5-20酶液。

(4)用噴霧干燥機設備，選用進風溫度150℃-200℃、出風溫度70℃-90℃的條件將經超濾純化濃縮了5-20倍的漆酶液噴霧干燥制備成高濃度高純度固態漆酶，固態漆酶的每克酶活是發酵粗酶液每毫升酶活的250倍以上，液態發酵粗酶液體積和重量是固態漆酶的體積和重量的800倍以上。

3.在選擇超濾設備和噴霧干燥機設備的使用條件時，要按下列原則：

(1)超濾設備具體選用何種規格和分子量的超濾膜對粗酶液進行濃縮和純化，需根據發酵制備的漆酶的分子量大小和對純度的要求來決定，因為漆酶的分子量從幾萬到幾十萬不等。

(2)噴霧干燥機設備具體選用進風溫度和出風溫度時，需根據液態酶液所含物質的濃度和酶對溫度的耐熱性來決定，一般來說：酶耐熱性好，進風溫度可高些；進風溫度與出風溫度溫差越大、液態酶液所含物質的濃度越大，則干燥成固態酶的速度越快。