[發(fā)明專利]調(diào)控斑馬魚(yú)卵黃蛋白原水平的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210007806.4
• 申請(qǐng)日: 2012-01-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102590488A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 程艷;陳會(huì)明;崔媛;謝文平;周新;于文蓮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): G01N33/48
• 分類號(hào): G01N33/48;G01N33/53
• 代理公司: 北京遠(yuǎn)大卓悅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11369
• 代理人: 劉冬梅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及到一種評(píng)價(jià)有機(jī)污染物對(duì)水生生物內(nèi)分泌毒害或干擾的方法，尤其涉及到一種檢驗(yàn)水生生物體內(nèi)內(nèi)分泌是否受到外源環(huán)境中低濃度類雌激素干擾物毒害或干擾的方法，屬于類雌激素干擾物的檢驗(yàn)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

生態(tài)環(huán)境中的化學(xué)污染物質(zhì)干擾人類和野生動(dòng)物的內(nèi)分泌功能，從而對(duì)個(gè)體的生殖、發(fā)育和性行為等產(chǎn)生多方面的影響，甚至?xí)绊懙饺祟惖纳娣毖?Tilghman?S?L，Nierth-Simpson?E?N，Wallace?R，et?al.Environmental?hormones：Multiple?pathways?for?response?may?lead?to?multiple?disease?outcomes[J].Steroids，2010，75(8-9)：520-523)。因而國(guó)際組織和發(fā)達(dá)國(guó)家對(duì)內(nèi)分泌干擾危害效應(yīng)監(jiān)控實(shí)行強(qiáng)制管理，如聯(lián)合國(guó)GHS(全球化學(xué)品統(tǒng)一分類和標(biāo)簽制度)和歐盟REACH(化學(xué)物質(zhì)注冊(cè)、評(píng)估、授權(quán)和限制)法規(guī)1907/2006(EC)中均對(duì)內(nèi)分泌干擾化學(xué)物質(zhì)提出了明確管控要求。

卵黃蛋白原(VTG)是卵黃蛋白的前體，通常受循環(huán)的內(nèi)源性雌激素刺激，由雌性卵生脊椎動(dòng)物肝臟產(chǎn)生，由血流進(jìn)入卵巢，并被發(fā)育中的雌性配子吸收并改變。它是直接通過(guò)雌激素受體調(diào)節(jié)途徑來(lái)合成的，一般只在成熟雌魚(yú)體內(nèi)合成，而在幼魚(yú)或成年雄魚(yú)體內(nèi)含量很低，難以檢測(cè)出。但在受外源性的雌激素的刺激下，肝臟能夠合成并分泌VTG。因此，通過(guò)測(cè)量VTG水平的變化，能夠探索不同化學(xué)物質(zhì)的內(nèi)分泌干擾作用機(jī)制。

全氟碳化合物(PFCs)已成為重要的持久性有機(jī)污染物(POP?s)，廣泛分布于環(huán)境、野生動(dòng)物和人類中。其中代表性的全氟辛烷磺酰基化合物(Perfluorooctanesulphonate，PFOS)、全氟辛酸(Perfluorooctanoic?acid，PFOA)以及它們的衍生物已成為新型持久性有機(jī)污染物質(zhì)，可以通過(guò)呼吸和食物被生物體攝取，有很高的生物蓄積性，可能具有內(nèi)分泌干擾毒性、遺傳毒性、肝臟毒性等(Jensen?A?A，Leffers?H.Emerging?endocrine?disrupters：perfluoroalkylated?substances[J].International?Journal?of?Andrology，2008，31(2)：161-169；Clarke?B?O，Smith?S?R.Review?of‘emerging’organic?contaminants?in?biosolids?and?assessment?of?international?research?priorities?for?the?agricultural?use?of?biosolids[J].Environment?International，2011，37(1)：226-247)，其工業(yè)生產(chǎn)已于2000年禁止。在2009年5月4日-8日在瑞士日內(nèi)瓦召開(kāi)的“有關(guān)持久性有機(jī)污染物的斯德哥爾摩公約”會(huì)議上，鑒于PFOS，其鹽化合物以及全氟辛烷磺酰氟等的劇毒性和持久性，將它們列入斯德哥爾摩公約新增受控化學(xué)物質(zhì)范圍。

當(dāng)水生生物處于高濃度類雌激素干擾物的外源環(huán)境的毒害或污染下會(huì)遭受到急性毒性損傷，從而呈現(xiàn)出較為明顯的形態(tài)特征變化或生理變化，再結(jié)合采用多種生物標(biāo)記物，可以非常準(zhǔn)確和靈敏的檢驗(yàn)出水生生物是否受到外源環(huán)境中高濃度類雌激素干擾物的毒害或污染。當(dāng)水生生物受到低濃度的類雌激素干擾物的毒害或污染時(shí)，無(wú)論是外部的形態(tài)特征還是內(nèi)部的生理指標(biāo)都不會(huì)出現(xiàn)較為明顯的變化；此外，現(xiàn)有的用于評(píng)價(jià)類雌激素干擾物對(duì)于水生生物內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的生物標(biāo)志物均不同程度的存在敏感性較差、準(zhǔn)確率較低的缺陷。建立一種靈敏性好、準(zhǔn)確率高的評(píng)價(jià)水生生物內(nèi)分泌是否受到類雌激素干擾物干擾的方法，對(duì)于展開(kāi)相關(guān)的科學(xué)研究以及環(huán)境污染物監(jiān)控和安全管理等具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明人進(jìn)行了銳意研究，發(fā)現(xiàn)，在暴露于低劑量的諸如全氟辛烷磺酰基化合物(Perfluorooctanesulphonate，PFOS)或全氟辛酸(Perfluorooctanoic?acid，PFOA)等類雌激素干擾物時(shí)，雖然斑馬魚(yú)，特別是雄性斑馬魚(yú)體征沒(méi)有發(fā)生明顯變化，但斑馬魚(yú)的血漿、全魚(yú)勻漿液或頭尾組織勻漿液中的卵黃蛋白原(VTG)的含量明顯升高，通過(guò)檢測(cè)水生生物的血漿、全魚(yú)勻漿液或頭尾勻漿液的卵黃蛋白原(VTG)的含量就可以靈敏、準(zhǔn)確地確定水生生物是否受到外源環(huán)境中低劑量類雌激素干擾物毒害或干擾，由此完成本發(fā)明。