[發明專利]海參多糖的電離輻射降解法

有效

• 申請號: 201210007582.7
• 申請日: 2012-01-03
• 公開（公告）號: CN102585023A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 陳士國;吳念;劉東紅;胡亞芹;陳建初;孫玉敬;吳丹;葉興乾
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

技術領域

本發明涉及一種多糖類化合物的降解法，特別是涉及一種電離輻射降解海參多糖的方法。

背景技術

海參多糖主要有海參硫酸軟骨素(sea?cucumber?chondroitin?sulfate，SC-CHS)(J?Biol?Chem?1996，271，(39)，23973-84；J?Biol?Chem?1988，263，(34)，18176-83；Journal?of?Biological?Chemistry?1991，266，(21)，13530-13536)和海參巖藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)(Carbohydr?Res?1994，255，225-40)兩種多糖，其中SC-CHS是從海參體壁中提取的一種多糖，可來源于多種海參，雖其化學結構不盡相同，但生物學活性相似。Yutaka?Kariya(J?Biochem?2002，132，(2)，335-43)對日本刺參中SC-CHS的進行提取，糖組成分析表明其中巖藻糖(Fuc)∶乙酰氨基半乳糖(GalNAc)∶葡萄糖醛酸(GlcA)∶硫酸根(SO₄^2-)為2.5∶0.47∶0.53∶1.73。Paulo?Mourao(J?Biol?Chem?1996，271，(39)，23973-84)課題組提純了L.grisea中的SC-CHS，糖組成分析表明其含有Fuc∶GalNAc∶GlcA∶SO₄^2-約為1∶1∶1∶2.7。

硫酸巖藻糖分支結構與SC-CHS的多種生物學活性相關，其特異性的空間排列是SC-CHS抗凝活性的基礎，SC-CHS延長激活的部分凝血活酶時間(APTT)的作用明顯強于具有相同硫酸化程度的線性巖藻糖同源性多聚體(Thromb?Haemost?2008，100，(3)，420-8)。脫巖藻糖和脫硫酸酯后，SC-CHS喪失抗凝作用。Mourao(Thromb?Res?2001，102，(2)，167-76；Thromb?Res?1999，93，(3)，129-35)等在兔靜脈血栓形成模型中進一步驗證了硫酸巖藻糖支鏈對SC-CHS抗血栓活性的重要性。用人活化血清激活內源性凝血途徑和純化的FVIII激活外源性凝血途徑后，靜脈注射SC-CHS可減少血栓形成，而去除硫酸巖藻糖分支后，SC-CHS作用消失(Blood?2006，107，(10)，3876；Br?J?Haematol?1998，101，(4)，647-52)。硫酸巖藻糖支鏈還與SC-CHS降血脂(Atherosclerosis?1996，126，(2)，185-195)、促進臍靜脈內皮細胞增殖和移位、促進血管再生作用相關(Mol?Cancer?Res?2002，1，(2)，96-102)。Lubor?Borsig(J?Biol?Chem?2007，282，(20)，14984-91)等人發現支鏈巖藻糖還與其抑癌活性密切相關。

因此制備富含巖藻糖支鏈的低分子量海參硫酸軟骨素具有重要的意義。目前海參硫酸軟骨素(SC-CHS)的降解方法常見的有用稀酸法和氧化降解法。而先前Yutaka?Kariya(JBiochem?2002，132，(2)，335-43)和Paulo?Mourao(J?Biol?Chem?1996，271，(39)，23973-84)等課題組均采用了稀酸法制備寡糖方法，容易導致硫酸基和支鏈硫酸巖藻糖的脫落，影響相關的活性。而氧化分解法操作繁瑣，過程難以控制，重現性差。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種工藝簡潔、效率高的海參多糖的電離輻射降解法。

為了解決上述技術問題，本發明提供一種海參多糖的電離輻射降解法，依次包括以下步驟：

1)、將海參多糖完全溶于蒸餾水中，得到海參多糖的水溶液；

2)、于常溫下采用⁶⁰Co進行電離輻射降解海參多糖水溶液，吸收劑量為2kGy～200kGy；

3)、將步驟2)的所得物經靜置沉降或離心除去非降解沉淀(蛋白質和殘渣等)得到清液；將所述清液干燥，得到低分子量的寡糖。

作為本發明的海參多糖的電離輻射降解法的改進：海參多糖的水溶液中海參多糖的質量濃度為0.1％～10％。

作為本發明的海參多糖的電離輻射降解法的進一步改進：海參多糖為海參硫酸軟骨素或海參巖藻聚糖硫酸酯。

作為本發明的海參多糖的電離輻射降解法的進一步改進：輻射劑量率為45kGy/min。