[發明專利]用于檢測血管緊張素II的磁微粒化學發光試劑盒

無效

• 申請號: 201210006880.4
• 申請日: 2012-01-11
• 公開（公告）號: CN102539419A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 吳學煒;趙鵬;陳科;李文娟;王敏;付光宇;秦東春;鄭立運;陸瑩;馬建軍;渠海;劉功成
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖綠科生物工程有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/52
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 王霞

技術領域

本發明涉及醫用診斷試劑領域，尤其是涉及一種利用化學發光技術結合磁微粒偶聯和分離技術檢測血管緊張素II含量的試劑盒。

背景技術

血管緊張素是一種能夠收縮血管升高血壓的多肽，它是腎素-血管緊張素-醛固酮系統的一部分。許多降血壓藥物以血管緊張素為靶分子。血管緊張素也能夠刺激腎上腺皮質分泌醛固酮。醛固酮促進遠端腎單位的鈉潴留，同時也能夠升高血壓。

血管緊張素II是腎素-血管緊張素-醛固酮系統調節血壓的一個直接作用物質。同時，血管緊張素II也能夠作為促生長因子直接促進血管內皮細胞的增生。最近的研究發現，血管緊張素II直接和血管內皮細胞增生，血管狹窄和動脈血管阻力增加有直接關系。因此，血管緊張素II用于高血壓的診斷和治療效果的檢測被越來越重視。

攝取ACEI后，活性腎素和ANG1的水平會立即升高，同時伴有血漿血管緊張素II水平的降低。因此，短期內血漿血管緊張素II的水平體現了RAS系統對ACEI的一個調整和適應過程。長期ACEI的治療通常會伴有血漿血管緊張素II水平的反彈。這可能主要是由于血管緊張素II的其他合成途徑的代償升高。血管緊張素II的水平反彈提示，在高血壓的長期治療過程中，要對血管緊張素II的水平進行連續和不間斷的監測。

血管緊張素II的檢測是一個非常有幫助的工具，能夠監測藥物的作用和效果，評價療效。同時對于充血性心力衰竭和高血壓的治療可以起到很好的評價和指導作用。

目前檢測血管緊張素II的方法以放射免疫技術為主，采用放射免疫技術測定血管緊張素II，其靈敏度和抗干擾能力嚴重不足，由于在測定血管緊張素II方面操作方法的復雜性，操作過程不易控制，造成測定結果的重復性差、變異大，另外放射免疫方法存在檢測時間長、穩定性差的缺陷，同時還存在放射源污染的問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種快速準確且污染小的用于檢測血管緊張素II的磁微粒化學發光試劑盒。

為實現上述目的，本發明可采取下述技術方案：

本發明所述的用于檢測血管緊張素II的磁微?；瘜W發光試劑盒，包括偶聯有兔抗血管緊張素II抗體的磁微?；鞈乙海势罚锼嘏悸摰难芫o張素II抗原，辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素，化學發光底物A、化學發光底物B以及洗液。

????所述偶聯有兔抗血管緊張素II抗體的磁微粒先包被羊抗兔IgG，再間接包被兔抗血管緊張素II抗體。

所述校準品以0.05M的Tris-NaCl和2%的酪蛋白組成pH7.4的緩沖液為基質，加入血管緊張素II純品配制而成。

所述生物素偶聯的血管緊張素II抗原以0.01M的PBS和2%BSA作為緩沖液基質，工作濃度為1:10000。

所述辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素以0.01M的PBS和2%BSA作為緩沖液基質，工作濃度為1:6000。

所述化學發光底物A由Luminol?0.15mM、羥基香豆素0.59?mM、沒食子酸0.35?mM、Tris-HCl緩沖液0.2M組成，最后調pH7.4；化學發光底物B?由0.2M乙酸-乙酸鹽緩沖液、維生素C?0.12?mM、氨基酸氧化酶0.85?mM組成，最后調pH7.4。

本發明的優點在于可實現操作的簡便性、自動化性，檢測結果具有更好的重復性和準確性，檢測時間短，穩定性可達12個月，不存在放射污染。

附圖說明

圖1是本發明試劑盒檢測血管緊張素II的校準曲線圖。

具體實施方式

本發明所述的用于檢測血管緊張素II的磁微?；瘜W發光試劑盒，包括偶聯有兔抗血管緊張素II抗體的磁微?；鞈乙?，校準品，生物素偶聯的血管緊張素II抗原，辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素，化學發光底物A、化學發光底物B以及洗液。

????偶聯有兔抗血管緊張素II抗體的磁微粒上先偶聯羊抗兔IgG，再間接免疫偶聯兔抗血管緊張素II抗體，采用氨基戊二醛法；校準品以0.05M的Tris-NaCl和2%的酪蛋白組成pH7.4的緩沖液為基質加入血管緊張素II純品配制而成；生物素偶聯的血管緊張素II抗原以0.01M的PBS和2%BSA作為緩沖液基質稀釋到1:10000的工作濃度；辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素以0.01M的PBS和2%BSA為緩沖液基質稀釋至1:6000的工作濃度；