[發(fā)明專利]耐鹽堿絨毛白蠟SCAR標(biāo)記及其在輔助選擇育種中的應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210006441.3
• 申請(qǐng)日: 2012-01-10
• 公開（公告）號(hào): CN102533745A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 燕麗萍;夏陽;劉翠蘭;李雙云;李麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省林業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 李健康

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種SCAR標(biāo)記及其應(yīng)用，尤其涉及一種耐鹽堿絨毛白蠟SCAR標(biāo)記及其在輔助選擇育種中的應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

白蠟屬全世界約70余種，大多數(shù)分布在北半球暖溫帶，中國已有34種，其中原產(chǎn)26種，國外引進(jìn)8種。絨毛白蠟(Fraxinus?VelutinaTorr.)為木犀科(Oleaceae)白蠟屬(Fraxinus?Linn.)落葉喬木，原產(chǎn)為美國，生長(zhǎng)快，樹干通直，木質(zhì)結(jié)構(gòu)均勻，紋理美觀，易繁殖、抗逆，是優(yōu)良鹽堿地造林、園林綠化和珍貴的用材樹種。早在1911年引種到濟(jì)南(孟昭和等，2001)，1953年被轉(zhuǎn)引到天津(楊瑞興等，1996)，80年代后在華北華東地區(qū)廣泛栽培。目前已成為我國華北、華東主要沿海城市及鹽堿地區(qū)造林和園林綠化優(yōu)良樹種(時(shí)明芝，1996；王勤等，2000；倪國祥等，1995；王友平等，2007)。

國內(nèi)關(guān)于白蠟生態(tài)特性、生長(zhǎng)習(xí)性方面的研究較多，主要側(cè)重于白蠟的耐鹽堿性、苗木繁育、造林技術(shù)等方面。樊寶敏(1992)報(bào)道，絨毛白蠟對(duì)呈堿性反應(yīng)的濱海鹽土較為敏感；孟康敏(1999)對(duì)5個(gè)濱海鹽堿地引種的樹種幼苗進(jìn)行盆栽耐鹽性試驗(yàn)，根據(jù)光合速率、葉綠素含量、細(xì)胞膜透性、丙二醛含量、游離脯氨酸含量等5個(gè)耐鹽性生理指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)判，結(jié)果表明絨毛白蠟?zāi)望}力最強(qiáng)；劉德璽等(2008)以鹽漬生境下1-3年生紅梣為材料，對(duì)不同樹齡紅梣的各營養(yǎng)器官中鹽離子分布規(guī)律進(jìn)行了研究；王友平等(2009)研究了鹽漬生境下1-3年生絨毛白蠟不同營養(yǎng)器官中鹽離子分布規(guī)律。近年來國外報(bào)導(dǎo)多集中在歐洲白蠟(F.excelsior)的核DNA微衛(wèi)星、葉綠體微衛(wèi)星標(biāo)記、EST-SST標(biāo)記篩選分離，以及微衛(wèi)星標(biāo)記在種群遺傳分析與系統(tǒng)發(fā)生生物地理學(xué)研究上。Heurtz等(2004)通過對(duì)全歐洲野生F.excelsior群體的葉綠體DNA與葉綠體微衛(wèi)星分析認(rèn)為，較低的單倍體多態(tài)是由于風(fēng)媒植物的基因流影響。Bacles等(2008)利用微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行了大尺度景觀下蘇格蘭F.excelsior群體的花粉基因流的父本分析，花粉基因流的交換取決于群體大小，而不是地理位置。Goto等(2006)利用5個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)對(duì)日本北部濱海森林的F.mandshurica?var.japonica的親本與后代的基因型分析，結(jié)果表明小范圍內(nèi)親本的個(gè)體分析可以為風(fēng)媒植物提供定量的分析。對(duì)絨毛白蠟(F.Velutina)的相關(guān)DNA標(biāo)記序列未能在GenBank上檢索到，遺傳學(xué)基礎(chǔ)研究十分薄弱，遺傳背景信息匱乏，這在很大程度上限制了選擇育種工作的順利開展。因此開展相應(yīng)的遺傳學(xué)基礎(chǔ)研究、定位重要經(jīng)濟(jì)性狀是我國白蠟選育工作中首先需要解決的問題。此外，傳統(tǒng)的白蠟分類主要依靠果實(shí)形狀和果翅數(shù)目的不同，該分類方法無法有效的在幼樹早期進(jìn)行應(yīng)用。因此利用分子生物學(xué)辦法、建立有效、快捷的種質(zhì)鑒別方法對(duì)解決我國白蠟樹良種選育具有重要的意義。

分子標(biāo)記輔助選擇育種是一種新型的育種方式，應(yīng)用分子標(biāo)記輔助選擇育種，可有效的檢測(cè)基因型，進(jìn)行QTL定位，直接通過標(biāo)記基因輔助選擇含有目標(biāo)基因型的個(gè)體。與傳統(tǒng)的育種方法相比，分子標(biāo)記輔助選擇育種方法，直接以DNA形式出現(xiàn)，在植物體的各個(gè)組織、各發(fā)育時(shí)期均可檢測(cè)到，不受季節(jié)、環(huán)境的限制，不存在表達(dá)與否的問題；數(shù)量多，遍及整個(gè)基因組；多態(tài)性高，利用大量引物、探針可完成覆蓋基因組的分析；中性標(biāo)記，即不影響目標(biāo)性狀的表達(dá)，與不良性狀無必然的連鎖共顯性標(biāo)記，能夠鑒別出純合的基因型與雜合的基因型，提供完整的遺傳信息。RFLP標(biāo)記、AFLP標(biāo)記操作較為繁瑣，而RAPD標(biāo)記準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性較差，均不適合于大規(guī)模的田間材料的鑒定工作；SCAR標(biāo)記操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確性高、穩(wěn)定性高克服了上述標(biāo)記的缺點(diǎn)，為首選的分子標(biāo)記方法。由于林木育種周期長(zhǎng)，要改變?cè)诮q毛白蠟育種領(lǐng)域上的落后局面，關(guān)鍵在于盡快廣泛收集品種資源，走現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)與常規(guī)育種相結(jié)合的道路，縮短育種年限，加快分子標(biāo)記輔助選擇利用的研究。因此，獲得耐鹽堿絨毛白蠟SCAR標(biāo)記，對(duì)于絨毛白蠟良種選育具有重要的意義，為我國耐鹽堿林木種質(zhì)的選育研究提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)體系；豐富耐鹽堿綠化樹種的遺傳多樣性，扼制土地鹽漬化，提高土地生產(chǎn)力；增加生態(tài)、社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益都具有現(xiàn)實(shí)而深遠(yuǎn)的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種耐鹽堿絨毛白蠟SCAR標(biāo)記及其在用于輔助選擇育種中的應(yīng)用。

本發(fā)明所述的耐鹽堿絨毛白蠟SCAR標(biāo)記，其特征在于，該SCAR標(biāo)記是全長(zhǎng)592bp的特異片段S20-592，其核酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。