[發明專利]一株用于防治棉花黃萎病的芽孢桿菌及其應用

無效

• 申請號: 201210006161.2
• 申請日: 2012-01-10
• 公開（公告）號: CN102443559A
• 公開（公告）日: 2012-05-09
• 發明（設計）人: 唐燦明;趙明文;韓琴;李順鵬
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/125
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

技術領域

本發明屬于生物農藥技術領域，涉及一株用于防治棉花黃萎病的芽孢桿菌及其應用。

背景技術

由大麗輪枝菌(Verficillium?dahliae)引起的黃萎病是棉花的主要病害，對棉花產量和品質均造成極大影響。對于棉花黃萎病的防治，國內外在抗病育種、農業措施和化學防治等方面均做了大量工作，棉花黃萎病為土傳維管束病害，防治困難，難以找到很好的抗源種質資源，因而多年來一直未能培育出高抗黃萎病的棉花新品種，研究開發的病害防治方法和藥劑亦難以達到理想的防治效果。目前生物防治被認為是最具有發展潛力的有效防治方法之一。大量的研究事實證明了生防菌處理植物后能達到促進生長與病害防治的目的。篩選大麗輪枝菌的拮抗細菌用于生物防治，或從拮抗菌中分離抗菌蛋白，克隆抗病基因，是獲得抗病植株的有效手段，而獲得高拮抗活性的菌株是生物防治的基礎。我國在這方面的研究主要在小麥、棉花等作物病害防治上。目前，隨著人們對無公害食品的要求和環境保護意識的日益增強，人們逐漸擺脫了防治病害完全依賴化學農藥的觀點，逐漸把生物防治與病害的綜合治理聯系起來，并成為其中重要組成部分。

植物內生細菌是指那些在其生活史的一定階段或全部階段生活于健康植物的各種組織和器官內部的細菌。被內生細菌感染的宿主植物不表現出外在病癥，可通過嚴格表面消毒的植物組織中分離。內生細菌主要分布于細胞間與維管束組織，廣泛存在于植物的果實、種子、胚、根、莖、葉中。內生細菌具有能促進植物生長，增強宿主植物抗病性的特性，且因定殖在植物體內，能躲避外界環境和和農藥的傷害，與根際細菌相比有更多優勢。

在植物病害生防細菌中，芽孢桿菌是最易從土壤和植株中分離得到，并表現出較好防病作用的一類重要細菌。它是一類嗜溫好氧或兼性厭氧、能產生耐熱抗逆內生孢子的桿狀細菌。由于這類細菌產生的芽孢對高熱、強酸、紫外線、電磁輻射和一些化學藥品有著很強的耐受力，其胞外分泌液中含有蛋白酶、淀粉酶、脂酶等酶類及其他活性代謝產物，因此，這類細菌以芽孢形態廣泛存在于各種自然環境中，可以在一些惡劣的環境中生存，且能分解利用環境中一些其它微生物難以分解的礦物質。在農業生產中，芽孢桿菌在防病的穩定性、與化學農藥的相容性等方面表現出其他種屬細菌所沒有的優勢，加之易于制成粉劑，便于儲藏運輸，利于實現大規模生產，具有很好的應用前景。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的上述不足，提供一株用于防治棉花黃萎病的芽孢桿菌。

本發明的另一目的是提供該芽孢桿菌41B-1的應用。

本發明的目的可通過如下技術方案實現：

枯草芽孢桿菌(Baclillus?subtilis)41B-1，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期：2011年12月13日，保藏號：CGMCC?No.5582。

菌株41B-1分離于陸地棉抗病品系選系R104的根系內部。經菌落和形態的顯微觀察、染色反應、常規生理生化鑒定以及16S?rDNA序列分析，該菌株與枯草芽孢桿菌(Bacillus?subfilis?sfrain?2Re5)的同源性達到99.0％，鑒定為枯草芽孢桿菌株。該菌株形態特征如下：革蘭氏染色陽性，鞭毛多根，長×寬為(0.65-1.0)μm×(3.0-4.5)μm，41B-菌落圓型，芽孢使孢囊膨大，形狀隆起，不光滑，中間褶皺，邊緣成波浪狀，有菌膜(圖1)。淀粉水解、需氧性試驗、硝酸還原試驗、過氧化氫酶反應、V-P試驗、利用糖類(D一葡萄糖、L一阿拉伯搪、D一木糖、D一甘露醇等)產酸和產氣試驗均為陽性，卵磷脂試驗、吲哚陰性，10％Nacl生長、pH?5.7能生長，最適pH為7.0，最適培養溫度為37℃，最佳培養基成分為：蛋白胨10g，酵母提取物5g，Nacl?10g，蒸餾水1000ml，pH?7.0。

所述的保藏號為CGMCC?No.5582的枯草芽孢桿菌41B-1在防治棉花黃萎病中的應用。

有益效果：