[發(fā)明專利]一種用于毛細(xì)管培養(yǎng)法檢測或篩選微生物的裝置

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210006004.1
• 申請日: 2012-01-10
• 公開（公告）號: CN102517198A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉嵐錚;李健;劉輝;胡光春;張濟(jì);時玉雯
• 申請（專利權(quán)）人: 濟(jì)南市疾病預(yù)防控制中心
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 楊琪

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于毛細(xì)管培養(yǎng)法檢測或篩選微生物的裝置。

背景技術(shù)

目前，國內(nèi)外微生物檢驗(yàn)過程中分離培養(yǎng)主要是預(yù)增菌、增菌、選擇性平板分離培養(yǎng)的方法，上世紀(jì)七十年代，以酶底物法顯色為基本原理的顯色培養(yǎng)基的發(fā)明大大提高了致病菌分離培養(yǎng)的特異性和敏感性。其基本原理為選擇性增菌，劃線分散成單個菌體，單菌體生長為單菌落并分解顯色底物顯色，需要兩步，且需要大量的培養(yǎng)基及有經(jīng)驗(yàn)的人工劃線技術(shù)，耗時36-48小時。而眾所周知，在化學(xué)物質(zhì)和生物大分子分離過程中，以色譜層析或電泳為基本原理的分離方法快速省時且敏感性、特異性、準(zhǔn)確性都比較高。但由于微生物不具溶解性，無法進(jìn)行分配，因此不可能利用色譜層析。而且由于微生物個體太大無法進(jìn)行有效常規(guī)電泳，有些科學(xué)家摸索了高效毛細(xì)管電泳的效果，結(jié)果表明在分離致病性球菌，如葡萄球菌和鏈球菌以及大腸桿菌方面有一定的有效性，但受生長環(huán)境、條件和生長時期等多種因素的影響，同種微生物會表現(xiàn)比較大的荷質(zhì)比差異性，導(dǎo)致重現(xiàn)性很低，大大限制了它的適用性。

那么是否可以想一種辦法間接模擬色層原理呢？就如數(shù)字模擬信號解決數(shù)字信號的問題。從文獻(xiàn)分析，導(dǎo)管裝入半固體瓊脂，一端接種沙門氏菌，可以在毛細(xì)管另一端解離出具有鞭毛的沙門氏菌；或在一端接種某菌種，導(dǎo)管中若添加某化學(xué)物質(zhì)，可以檢測其對該物質(zhì)的趨藥性。因此可否設(shè)計(jì)以微生物的運(yùn)動性或趨藥性為基本動力(模擬色譜層析中的動力)，以選擇性雜菌抑制劑為選擇性基礎(chǔ)物質(zhì)(模擬色譜層析中的固相分配劑)，以半固體瓊脂為載體(模擬色譜層析中液相分配劑)的基本方法，即把毛細(xì)管一端放入樣品增菌液，混合菌體經(jīng)過裝有特異性比較強(qiáng)的選擇性雜菌抑制劑的半固體瓊脂毛細(xì)管，隨著混合菌體向前生長移動會受到反復(fù)的抑制性選擇，最終雜菌會被全抑制，理論上講最后目標(biāo)菌會被徹底釋放到毛細(xì)管另一端，如此就類似化學(xué)成分在色譜中不斷進(jìn)行再分配的結(jié)果，從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)菌的快速高效分離。且從理論上分析，一大部分微生物具有鞭毛，具運(yùn)動性；其它微生物可以利用其趨藥性，因此動力上能夠保證；而且從目前選擇性培養(yǎng)基，如科瑪嘉類顯色培養(yǎng)基的顯色選擇性來分析，對大多數(shù)致病微生物可以篩選到特異性比較強(qiáng)的選擇性雜菌抑制物質(zhì)。因此用毛細(xì)管選擇性半固體培養(yǎng)法理論上可以分離大部分微生物。迄今為止，尚未見到有用毛細(xì)管培養(yǎng)法檢測或篩選微生物的報道。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種用于毛細(xì)管培養(yǎng)法檢測或篩選微生物的裝置，可用于檢測或篩選微生物，大部分菌屬的檢測或分離時間由現(xiàn)有技術(shù)中的36～48小時縮短為12～24小時，具有快速、高效、省時省力、特異性好、敏感性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種用于毛細(xì)管培養(yǎng)法檢測或篩選微生物的裝置，包括毛細(xì)管，所述毛細(xì)管為管徑小于0.5cm、管長大于1cm的直管或彎管。

所述毛細(xì)管的材質(zhì)為玻璃、塑料、合成樹脂或硅膠中的一種，材質(zhì)要求硬質(zhì)不透水，透氣或不透氣根據(jù)目標(biāo)微生物好氧情況選定，優(yōu)選使用透明材質(zhì)，透明材質(zhì)易于觀察培養(yǎng)基裝填效果，也便于終點(diǎn)判定。最優(yōu)選耐高壓硬質(zhì)無毒透明的材料。

所述毛細(xì)管為管徑為0.5～2mm、長度為2～20cm的直管或彎管。

所述用于毛細(xì)管培養(yǎng)法檢測或篩選微生物的裝置，還包括檢測管，毛細(xì)管的一端伸入檢測管中。

所述檢測管上設(shè)有透氣或不透氣的密封蓋(塞)，毛細(xì)管的一端穿過密封蓋(塞)伸入檢測管中。

所述檢測管的側(cè)壁上設(shè)有平面貼壁，以方便與待檢測樣品的增菌容器內(nèi)或外壁貼緊，防止脫落或丟失，檢測時用膠帶或磁條將此平面固定于增菌容器內(nèi)或外壁上。

所述檢測管側(cè)壁內(nèi)或外設(shè)有磁鐵，使用時，該磁鐵可以通過與含鐵的物品或其它磁鐵的配合，而將檢測管固定住，防止脫落或丟失。

使用時，向毛細(xì)管中填裝培養(yǎng)基(培養(yǎng)基為半固體培養(yǎng)基或液體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基；培養(yǎng)基中含有供目標(biāo)微生物生長的營養(yǎng)物質(zhì)；培養(yǎng)基中含有或不含有選擇性雜菌抑制劑或/和目標(biāo)微生物顯色劑)，然后將填裝后的毛細(xì)管的一端接入待檢樣本或待檢樣本的稀釋液或增菌液中，或：將待檢樣本接入毛細(xì)管的一端(當(dāng)有檢測管時，同時向檢測管中加入培養(yǎng)基，并將毛細(xì)管的另一端接入檢測管的培養(yǎng)基中)，培養(yǎng)0＜t≤96h后，進(jìn)行以下操作之一：

①當(dāng)培養(yǎng)基中含有選擇性雜菌抑制劑時，直接觀察毛細(xì)管的另一端，判斷是否有菌生長，若有菌生長，則證明待檢樣本中含有目標(biāo)微生物，若無，反之；