[發明專利]用氣相色譜-氮化學發光檢測法測定烤煙中的八種生物堿的方法

有效

• 申請號: 201210004832.1
• 申請日: 2012-01-09
• 公開（公告）號: CN102565231B
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 向章敏;蔡凱;耿召良;周淑平;張婕
• 申請（專利權）人: 貴州省煙草科學研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 吳無懼

技術領域

本發明屬于煙草中生物堿的檢測領域，具體涉及一種用氣相色譜-氮化學發光檢測法測定烤煙中的八種生物堿的方法。

背景技術

吸煙已經成為危害公眾健康最大的因素之一，文獻報道，吸煙能潛在增加肺癌的發生率及死亡率。已經被證實，中國大概有一億吸煙人口(0-29歲)死亡，如果現在中國的吸煙狀況持續下去，到2050年死亡人數將會達到每年3百萬。煙草生物堿已經被廣泛認為與煙草的品質密切相關，且也是高致癌物質-特有亞硝胺的前體物質。煙草及煙氣中含有大量相似結構的生物堿，常見的有尼古丁，去甲基煙堿，假木賊堿，新煙草堿，二烯煙堿，麥斯明，2,?3-聯吡啶，可替寧等八種生物堿。因此，發展一種簡單可靠的分析方法對檢測煙草生物堿具有重要的意義。

在過去的20年中，由于氣相色譜的高分離能力及氮化學發光檢測器的高選擇性，NCD已經成為了GC和全二維氣相色譜（GC×GC）重要的檢測器之一。NCD一般的檢測原理為：從色譜柱流出的含氮化合物，在富氧狀態下生成一氧化氮后，由真空泵將其送入到有過量臭氧的化學反應池內，臭氧與一氧化氮反應生成二氧化氮，二氧化氮衰減，在1200?nm處發出近紅外光，用光電倍增管檢測化學反應產生的光的強度，從而得到含氮化合物的信號。反應過程如下圖所示：

由于各種痕量含氮化合物需要高選擇性的GC檢測器，GC-NCD和GC×GC-NCD已經被廣泛應用于石油，食品及飲料等行業。

?NCD具有很多其它檢測器不具有的優點，如它對含氮化合物產生線性等摩爾響應，此外，它與其它化學發光檢測器不同，它在無光的背景下產生光子進行檢測，不受到其它光源的干擾，使其具有對含氮化合物很高的靈敏度。由于它的高專一性，在檢測煙草生物堿時，無需目標分析物與其它的物質之間完全色譜分離也能很好的進行定量。

為了定量檢測煙草中的生物堿，GC，LC和HPCE都被廣泛的應用。常見的方法有GC-FID，GC-NCD，GC–MS,?HPLC-UV,?CZE?或MEKC-UV。但是，大多數方法都具有靈敏度和選擇性不高的缺點。

本發明針對現有分析技術中存在的不足進行改進，專門設計了一種氣相色譜-氮化學發光檢測法?(GC-NCD)?測定烤煙中八種生物堿，能對煙草中尼古丁、去甲基煙堿、假木賊堿、新煙草堿、二烯煙堿、麥斯明、2,?3-聯吡啶和可替寧八種生物堿進行同時測定。該方法比現有的方法靈敏度更高，準確性更好，分析速度快。

發明內容

本發明的要解決的技術問題是克服現有技術存在靈敏度和選擇性不高的缺點，本發明提供一種靈敏度更高，準確性更好，分析速度快，并且能同時分析煙草中尼古丁、去甲基煙堿、假木賊堿、新煙草堿、二烯煙堿、麥斯明、2,?3-聯吡啶和可替寧八種生物堿。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現：

用氣相色譜-氮化學發光檢測法測定烤煙中的八種生物堿的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）樣品前處理：將煙葉粉末加入離心管中，加入NaOH溶液，渦旋振蕩后加入體積比為3:1的二氯甲烷/甲醇提取溶劑，振蕩提取，離心，取下層有機相清液用針式過濾器過濾后直接進樣分析；

（2）分析儀器采用氣相色譜-氮化學發光檢測器對樣品中的尼古丁、去甲基煙堿、假木賊堿、新煙草堿、二烯煙堿、麥斯明、2,?3-聯吡啶和可替寧八種生物堿進行分析。

所述的一種用氣相色譜-氮化學發光檢測法測定烤煙中的八種生物堿的方法，氮化學發光檢測器的等離子炬的裂解溫度為950^?C，氧氣流量為10?mL/min，氫氣流量為4?mL/min。

所述的一種用氣相色譜-氮化學發光檢測法測定烤煙中的八種生物堿的方法，所述的針式過濾器孔徑為0.45μm。

所述的一種用氣相色譜-氮化學發光檢測法測定烤煙中的八種生物堿的方法，氣相色譜分析條件：色譜柱為DB-17毛細管柱，He為載氣，流量為1?mL/min，進樣量：2μL，進樣口溫度：250^?C，分流進樣，分流比為10:1，初始溫度為110^?C保持1?min，以4^?C?/min升至180^?C保持1?min，再以20^?C?/min升至250^?C保持1?min，共運行26?min，檢測器的數據采集頻率為25?Hz。