[發明專利]一種番茄青枯病拮抗菌及其應用

有效

• 申請號: 201210004589.3
• 申請日: 2012-01-10
• 公開（公告）號: CN102643763A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發明（設計）人: 姚燕來;朱鳳香;薛智勇;王衛平;洪春來;陳曉旸;吳傳珍
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P1/00;C12R1/085
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 周烽

技術領域

本發明涉及番茄青枯病生防領域，尤其涉及一株番茄青枯病拮抗菌及其應用。?

背景技術

番茄青枯病是由茄青枯拉爾氏菌[Ralatonia?solanacearum?(smith)?Yabuuchi?et?al]引起的世界范圍內的毀滅性土傳病害，熱帶、亞熱帶的國家和地區，如：南美洲、日本、印度、菲律賓，我國臺灣、廣東、浙江、福建、江蘇、湖北、四川、重慶等都有嚴重發生。該病可造成植株大面積萎蔫死亡，一般田塊發病率為10%～15%，重病田發病率高達80%～98.5%，導致番茄產量嚴重下降，造成重大的經濟損失。?

R.?solanacearum?是一種土壤習居菌，能夠在無寄主情況下的土壤中存活很長時間。R.?solanacearum主要從根系侵入植株，也可從莖部傷口侵入并直接進入導管系統，在其中大量繁殖并產生代謝物質，阻礙植物體內水分運輸，造成植株萎蔫。目前，針對番茄青枯病缺少有效的化學藥劑，加之青枯菌對化學農藥易產生抗藥性，而且大量使用化學農藥會造成環境污染和生產成本上升。休耕期撒施石灰可減輕病害發生，但易造成土壤板結。抗病育種工作，由于缺乏理想的抗源材料，進展緩慢。水旱輪作要求輪作年限長，且附近無其它宿主存在方可起到良好效果，因而實施起來較困難。土壤滅菌后形成了土壤生物真空，一旦土壤受到病原菌侵染，會導致病原菌的大爆發而造成更為嚴重后果。生物防治作物病害具有可利用資源豐富、成本低廉、能夠避免環境二次污染，被認為是解決土傳病害一條有希望的途徑。利用病原菌拮抗微生物進行生物防治是生物防治的一個重要組成部分。?

發明內容

本發明目的在于針對番茄青枯病缺少有效的化學藥劑，加之青枯菌對化學農藥易產生抗藥性的不足，提供一種番茄青枯病拮抗菌及其應用。?

本發明目的通過以下技術方案來實現：一種番茄青枯病拮抗菌，它的16S?rRNA具有SEQ?ID?No.1所示的基因序列；該番茄青枯病拮抗菌保存在中國專利局指定的保藏單位中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保存編號為：CGMCC?No.3332。?

上述番茄青枯病拮抗菌在防治番茄青枯病方面的應用。?

本發明的有益效果是，本發明分離篩選出的番茄青枯病拮抗菌能夠有效地防治番茄青枯病，對減少大量化肥、農藥的使用，減輕農業面源污染具有重要的作用。?

本發明的番茄青枯病拮抗菌④-37已在中國專利局指定的保藏單位“中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心”保藏，保藏單位地址為：北京市朝陽區大屯路；保藏日期為2009年10月9日，保藏編號為：CGMCC?No.3332；分類命名為：蠟狀芽孢桿菌(Bacillus?cereus)。?

附圖說明

????圖1為番茄青枯病生防效果圖。??

具體實施方式

從浙江嘉善、麗水、杭州等番茄種植基地采集21個土樣，利用牛肉膏蛋白胨培養基進行分離，共分離到細菌420多株；然后進行平板拮抗試驗，得到對番茄青枯病茄青枯拉爾氏菌有較好拮抗效果初篩細菌27株；通過盆栽試驗，進一步篩得對番茄青枯病茄青枯拉爾氏菌具有相對穩定的拮抗效果復篩細菌4株。該菌株④-37為其中一株細菌。根據菌株的形態特征、培養特征和生理生化特征，參照伯杰氏細菌鑒定手冊，對該菌株④-37進行鑒定，初步確認為蠟狀芽孢桿菌，該菌株取樣來自浙江麗水。?

保藏菌株的形態、培養、生理、生化等特征：?

蠟狀芽孢桿菌④-37：屬蠟狀芽孢桿菌（Bacillus?cereus）；在牛肉膏蛋白胨培養基中生長良好，細胞桿狀；在牛肉膏蛋白胨瓊脂平板上培養時菌落表面濕潤、光滑、邊緣整齊且規則、圓形，菌苔厚、不透明、白色。菌株④-37理化試驗結果見下表：

經測定，菌株④-37的16S?rRNA的基因序列如SEQ?ID?No.1所示。

通過以下實施例對本發明作更詳細說明，但以下實施例僅是說明性的，本發明并不受這些實施例的限制。?

對所涉材料的說明：?

蛋白胨：生化制劑，國產；

牛肉膏：生化制劑，國產；

Yeast?extract?(酵母浸膏):生化試劑，國產；

Casein?hydrolysate?(酪蛋白水解物):?生化試劑，國產；

瓊脂:?生化試劑，國產；

NaCl：分析純，國產

K₂HPO₄：分析純，國產；

葡萄糖：分析純，國產；