[發明專利]一種利用木質纖維素發酵產生微生物油脂的長孢被孢霉PFY及其產生微生物油脂的方法

無效

• 申請號: 201210004558.8
• 申請日: 2012-01-10
• 公開（公告）號: CN102618447A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 姚日生;張鵬;王淮;鄧勝松;張遙;姚力蓉
• 申請（專利權）人: 安徽安生生物化工科技有限責任公司;合肥工業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 安徽合肥華信知識產權代理有限公司 34112
• 代理人: 余成俊

技術領域

本發明涉及一種利用預處理后的木質纖維素為底物發酵生產不飽和脂肪酸的新菌種。?

背景技術

通常用微生物發酵方法對這些廢棄材料進行處理利用時存在生產效率低和生產成本高等問題，而且需要結合其他的物理或化學方法對材料進行預處理，有時需要多步酶解處理和發酵才能得到產品。利用酶解糖化液進行發酵生產，雖然微生物可以很容易的利用酶解產生的糖化液進行發酵，但是這樣需要纖維素酶的加入并因此增加了生產成本。在利用木質類纖維素發酵生產的產品以纖維素乙醇報道較多，但是利用其發酵生產油脂的相關報道較少，而利用單一菌種對木質纖維素直接進行發酵生產生物產品的研究更少。?

微生物油脂(microbial?oil)又稱單細胞油脂(single?cell?oil，SCO)，主要是由酵母、霉菌、細菌和藻類等微生物利用各種碳源和氮源，輔以無機鹽而合成的油脂。微生物油脂脂肪酸組成和一般植物油的組成大致相同，以油酸、棕擱酸、亞油酸和硬脂酸等C16、C18系脂肪酸為主。與生產動、植物油脂相比，微生物油脂的生產有許多優點:原料來源廣泛，價格低廉，而且能利用食品工業的廢棄物，減輕了對環境的污染;生產周期短，能連續大規模生產;同時不受季節、氣候變化的限制。由于微生物油脂中含有多不飽和脂肪酸，多不飽和脂肪酸具有許多生理功能，被廣泛應用于食品、醫藥、化工等領域。另外，利用微生物生產生物柴油已成為國內外生物能源領域研究的重點。?

發明內容

本發明的目的是提供一種株能直接高效利用木質纖維素生產微生物油脂的菌種。?

為了實現上述目的本發明采用如下技術方案：?

利用木質纖維素發酵產生微生物油脂的長孢被孢霉PFY及其產生微生物油脂的方法，其特征在于包括以下步驟：

A、??將長孢被孢霉菌株接種到含有木質纖維素的培養基中進行培養，培養條件為溫度20℃-35℃，搖床轉速120?rpm-180?rpm，氮源為尿素，培養4-7天；

B、??將發酵后的物質烘干、粉碎后，采用石油醚萃取干物中的粗油脂。

所述長孢被孢霉為被孢霉屬真菌，分類命名為長孢被孢霉，經中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏中心登記入冊編號為5070。?

將獲取的土樣梯度稀釋后，稀釋濃度為原樣的10^-1至10^-6,取90-110μl稀釋液均勻涂布到剛果紅培養基上進行培養，挑取生長較快且有透明圈的菌落進行純化培養；篩選得到上述的長孢被孢霉。?

所述的利用木質纖維素發酵產生微生物油脂的長孢被孢霉PFY及其產生微生物油脂的方法，其特征在于：所述的剛果紅培養基配方為：K₂HPO₄?0.5-1.0g/L，MgSO₄?0.2-0.5g/L，微晶纖維素粉1.0-2.0g/L，剛果紅0.1-0.5g/L，瓊脂?10-20g/L和明膠?1-2g/L。?

所述的利用木質纖維素發酵產生微生物油脂的長孢被孢霉PFY及其產生微生物油脂的方法，其特征在于：所述的木質纖維素選自農作物秸稈、木質材料及其下腳料、纖維類的腐殖質、植物果實或果實殘渣。?

所述的利用木質纖維素發酵產生微生物油脂的長孢被孢霉PFY及其產生微生物油脂的方法，其特征在于：所述的木質纖維素中木質素含量不高于20%的木質素基材料，不需要對其進行預處理就可直接進行培養。?

所述的利用木質纖維素發酵產生微生物油脂的長孢被孢霉PFY及其產生微生物油脂的方法，其特征在于：所述的木質纖維素的培養基為（g/L）：木質類纖維素?10-50，尿素1-5，MgSO4?0.1-0.5，K₂HPO₄?0.5-1.0，CaCl₂?0.5-1.0。?

所述的利用木質纖維素發酵產生微生物油脂的長孢被孢霉PFY及其產生微生物油脂的方法，其特征在于：所述的菌體培養后的干物中粗油脂為不飽和脂肪酸酯為主的混合脂肪酸酯，含量為10%-30%。?

所篩菌種已在中國普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)申請了專利菌種保藏，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏日期為2011年7月18日，分類命名為長孢被孢霉(Mortierella?elongata))，保藏編號為CGMCC?No.5070。?

本發明的優點：?

（1）所篩菌種來自于自然界，屬于野生型菌種，抗逆性強，易于培養和生長；