[發明專利]蛙皮提取物及其提取方法

有效

• 申請號: 201210003755.8
• 申請日: 2012-01-06
• 公開（公告）號: CN102559823A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 馮濤;金愛玉;白鳳英
• 申請（專利權）人: 吉林省宏久生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A61K38/39;A61K38/03;A61P31/04;A61P29/00;A61P1/04;A61P1/12;A61P1/00;A61P9/12;A61P17/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 逯長明

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別涉及蛙皮提取物及其提取方法。

背景技術

膠原蛋白(collagen)是一種含糖蛋白質，在自然界廣泛分布，主要分布在動物的結締組織中，作為皮膚、骨骼、肌腱、韌帶、血管的構成材料；人體成分中有16％左右是蛋白質，膠原蛋白占體內蛋白質總量的30～40％，是人體內含量最多的蛋白質；膠原蛋白富含人體需要的甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸等氨基酸。膠原蛋白是人體組織結構的主要成分之一，也是人體內含量最多的一種蛋白質，約占人體蛋白質總量的1/3，相當于人體體重的6％，它遍及全身的各個組織器官，如：皮膚、骨骼、軟骨、韌帶、角膜、各種內膜、筋膜等，是維持皮膚與組織器官形態、結構的主要成分，也是修復各損傷組織的重要原料物質。當膠原蛋白不足時，不僅皮膚及骨骼會出現問題，對內臟器官也會產生不利影響。膠原蛋白是維持身體正常活動所不可缺少的重要成分，同時也是使身體保持年輕、防止老化的物質。另外，膠原蛋白還可以預防疾病，改善體質，對美容和健康都很有幫助。

膠原蛋白是大分子蛋白質，分子量約為30～50萬道爾頓，而最適宜人體吸收的是分子量小于1500～1800D。并不能被人體直接吸收。食入含膠原蛋白的食物必須經消化道蛋白酶分解成單純的小分子氨基酸，才能被腸道吸收利用，再經過機體復雜的生物化學反應，合成人體需要的膠原蛋白，供給各組織器官的需要。人體吸收是以肽的方式進行，食用蛋白肽的吸收利用率可達100％。肽的分子量、氨基酸排列順序不同所表現的功能不同。

蛙皮是蛙科動物蛙的干燥皮膚，該動物為野生或養殖動物，其富含膠原蛋白、大孔多肽因子、透明質酸等成分。其中的膠原蛋白能有效增強人體皮膚組織細胞的儲水功能，人體經常補充膠原蛋白可增加肌膚彈性，保持皮膚柔軟、細嫩，也能使體內的血管、骨骼和神經保持韌性和彈性，淡化黑斑，降低血壓等功效。蛙皮中的多肽具有廣譜抗菌作用，對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌尤其對耐藥菌株具有明顯的抑制作用，還可以用來治療胃痛、痢疾、腸炎等炎性疾病。

目前提取蛙膠原蛋白的方法收率不高，獲得的蛙膠原蛋白含量較低。因此，提供蛙膠原蛋白含量較高的蛙皮提取物及提取方法，具有現實意義。

發明內容

有鑒于此，本發明提供蛙皮提取物及其提取方法。該提取方法通過生物酶解技術，能夠有效提取獲得蛙皮提取物，獲得的蛙皮提取物中蛙膠原蛋白的純度達54.6～56.2％。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種蛙皮提取物的提取方法，包括如下步驟：

取蛙皮膚經-80～-75℃冷凍干燥4～6h，粉碎過20～40目篩、預處理后，在37～38℃，加醋酸或鹽酸酸化，調節pH值為2～3的條件下，加入酶活力為10萬IU/g的胃蛋白酶和酶活力為140萬IU/g的纖維酶進行酶解12～15h，獲得酶解液，60℃酶滅活后，3000r/min離心收集上清液，用碳酸鈉或氫氧化鈉調節pH值為6～7，加入中性鹽或強酸弱堿鹽經鹽析后收集沉淀，3～5℃透析20～24h后于60℃真空濃縮至相對密度為1.15～1.20，高壓滅菌后經-80～-75℃冷凍干燥10～12h，即得；所述蛙皮膚、所述胃蛋白酶、所述纖維酶的質量比為100∶0.5～1.0∶1.0～1.5；所述透析的截留分子量為500～1500Da。

鹽析過程中，加入中性鹽或強酸弱堿鹽至沉淀不再析出為止。

以蛙皮膚為原料，采用復合生物酶解技術，破壞生物細胞壁，破壞蛙皮中膠原蛋白的纖維網狀結構，解開肽鏈，使溶媒直接深入生物細胞膜內與有效活性成分充分接觸，有利于活性成分的溶出。采用緩沖液透析技術除去膠原蛋白液中的鹽性成分及一些夾雜其中的小分子蛋白。

在本發明的一些實施例中，本發明提供的提取方法，所述預處理為加水在55～60℃保溫1h；以g/mL計，所述蛙皮膚與水的質量體積比為1∶8～10。

在本發明的一些實施例中，本發明提供的提取方法，所述酸化為于37～38℃保溫12～15h。

在本發明的一些實施例中，本發明提供的提取方法，所述高壓滅菌具體為在300～500MPa、15～35℃的條件下滅菌8～10min。本發明還提供了上述提取方法獲得的蛙皮提取物。

本發明提供的蛙皮提取物可以制備革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌抑制劑。

本發明提供的蛙皮提取物可以制備預防或/和治療炎癥藥物。

本發明提供的蛙皮提取物可以制備預防或/和治療胃炎、痢疾、腸炎藥物。

本發明提供的蛙皮提取物可以制備降血壓藥物。