[發(fā)明專利]充質(zhì)干細胞及其提取方法在制備銀屑病的藥物中的應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210002647.9
• 申請日: 2012-01-06
• 公開（公告）號: CN103191154A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發(fā)明（設計）人: 王宏林;柯芳
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學醫(yī)學院
• 主分類號: A61K35/36
• 分類號: A61K35/36;A61P17/06;A61P37/04;C12N5/0775
• 代理公司: 上海大邦律師事務所 31252
• 代理人: 袁洋

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及充質(zhì)干細胞在制備免疫調(diào)節(jié)功能藥物中的應用，特別是皮膚間充質(zhì)干細胞（Skin-derived?Mesenchymal?Stem?Cells）在制備治療銀屑病的藥物中的應用。

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背景技術(shù)

銀屑?。╬soriasis）是一種常見的免疫相關(guān)性、復發(fā)性的皮膚慢性炎癥，其特征是真皮內(nèi)濃密的以T細胞、DC、自然殺傷T細胞和巨噬細胞為主的炎性細胞浸潤。銀屑病患者皮膚的表皮過度增生且無法正常分化，使其表皮顯著增厚、結(jié)痂增多(Nestle?et?al.,?2009)。銀屑病的確切發(fā)病原因還不清楚，環(huán)境因子（諸如感染、外傷、壓力等）和遺傳因子等綜合因素決定了個體的易感性。銀屑病目前尚無根治的藥物(Nestle?et?al.,?2009)，早期治療多使用類固醇等非生物性的免疫抑制劑，此類非專一性免疫抑制劑具有相當程度的副作用。近年來，生物制劑如腫瘤壞死因子制劑Etanercept（依那西普）等也被用于銀屑病治療，此類藥物多為人源化抗體，用于阻隔銀屑病相關(guān)炎癥細胞因子與受體間的作用。由于許多炎癥細胞因子在機體正常免疫反應中不可缺少，沒有選擇性地阻擋炎癥細胞因子亦會導致用藥后的副作用，停藥后疾病容易反彈。此外，抗體類藥物生產(chǎn)成本高、價格昂貴、普通病人很難能承受。我國從1984年以來我國約有超過400萬患者被診斷為銀屑病，自主研究開發(fā)我國有知識產(chǎn)權(quán)的治療銀屑病的新藥物勢在必行。

充質(zhì)干細胞（mesenchymal?stem?cell）是一種未分化、能自我增生、且能分化成多種間充質(zhì)組織細胞的多能性細胞(Nestle?et?al.,?2009)。早期，間充質(zhì)干細胞多從骨髓中取得，骨髓間充質(zhì)干細胞具有抑制免疫應答和誘導外周免疫耐受的特質(zhì)(Nestle?et?al.,?2009)，曾被應用于抑制骨髓移植時所導致的移植體對宿主排斥反應（graft-versus-host?disease,?GVHD）(Nestle?et?al.,?2009)。除了骨髓以外，間充質(zhì)干細胞也存在于其他成體組織中。不同于骨髓間充質(zhì)干細胞，在皮膚真皮層中的間充質(zhì)干細胞，除了能分化成中胚層（mesodermal）相關(guān)組織細胞（如脂肪細胞、平滑肌細胞），還具有分化成神經(jīng)細胞、造血細胞、肝細胞等多種非中胚層組織細胞的特性，因此在臨床上有極大的應用價值(Nestle?et?al.,?2009)。由于大量的皮膚樣本較骨髓易于取得，從皮膚樣本提取治療用間充質(zhì)干細胞實屬可行性高、用途廣、侵入性小、且具經(jīng)濟效益的選擇。然而，皮膚間充質(zhì)干細胞的免疫調(diào)節(jié)功能目前尚未被發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明將就此問題進行研究。

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發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種充質(zhì)干細胞在制備具有免疫調(diào)節(jié)功能的藥物中的應用，以及相關(guān)充質(zhì)干細胞的提取方法：

充質(zhì)干細胞在制備治療具有免疫調(diào)節(jié)功能的藥物中的應用。

充質(zhì)干細胞在制備治療銀屑病的藥物中的應用。

所述的充質(zhì)干細胞在制備治療具有免疫調(diào)節(jié)功能的藥物中的應用，其中所述的充質(zhì)干細胞來源于皮膚真皮層中。

所述的充質(zhì)干細胞在制備治療銀屑病的藥物中的應用，其中所述的充質(zhì)干細胞來源于皮膚真皮層中。

所述的應用中所述的充質(zhì)干細胞通過下列方法提取：剪取背部皮膚置于dispase酶中,消化過夜后清洗，剝?nèi)ケ砥?，將真皮置于膠原酶中消化，消化完成后再添加DNase?I消化，用PBS洗一遍，用滴管吹打成單細胞懸液，過濾后接種于培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)后，棄去懸浮細胞，將貼壁細胞繼續(xù)培養(yǎng)，待長滿瓶底大部分后，胰酶消化，常規(guī)傳代。

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