[發明專利]一種從山茱萸果核中提取白樺脂酸的方法

有效

• 申請號: 201210000733.6
• 申請日: 2012-01-04
• 公開（公告）號: CN102558281A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 李軍;姜華;路西明;張倩;李曉明;李曉寧
• 申請（專利權）人: 河南科技大學
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙) 41120
• 代理人: 李宗虎

技術領域

本發明涉及白樺脂酸的提取方法，具體的說是一種從山茱萸果核中提取白樺脂酸的方法。

背景技術

白樺脂酸是一種三萜類化合物，具有抗腫瘤細胞生長的作用，對腫瘤細胞具有廣譜性的細胞毒性，如對成神經細胞瘤、神經膠質瘤、惡性腦瘤、卵巢癌、肺癌等惡性腫瘤以及已經對阿霉素產生抗性的腫瘤細胞都表現出很好的活性，而對正常細胞沒有傷害。同時研究發現白樺脂酸對人口腔上皮癌細胞(KB)、結腸腺癌細胞(LS-1747)、肝癌細胞(SMMC-7721)、肺癌細胞(A?549)、HepG2、S180肉瘤細胞以及人類乳腺癌細胞(MCF-7)的增殖均有抑制作用。并且在抗艾滋病方面還有許多新的作用機制，引起人們廣泛的關注，這使得白樺脂酸成為很有開發前景的藥物。

白樺脂酸目前的主要來源有三種途徑：第一，從天然植物中提取分離得到；第二，以白樺脂醇為前體，通過有機合成得到白樺脂酸。這種方式已經應用于工業生產，可以得到工業規模的白樺脂酸，是現在市場上白樺脂酸的主要來源；第三，以白樺脂醇為前體，通過微生物轉化生成白樺脂酸。

山茱萸（Cornus?officinalis?Sieb.?et?Zucc.），為落葉喬木或小喬木，在我國河南、浙江、陜西等省有大量的分布。山茱萸的干燥成熟果肉為常用種中藥，具有補益肝腎，澀精固脫的作用，臨床用于眩暈耳鳴，腰膝酸痛，陽痿遺精，遺尿尿頻，崩漏帶下，大汗虛脫，內熱消渴等癥。由于每年山茱萸的果肉在我國消費量巨大，而在山茱萸果肉加工制備過程中產生的大量果核在實際生產中被作為廢物丟掉。因此，對山茱萸果核的利用方法進行研究，可有效的進一步發揮山茱萸的使用價值，具有較強的現實意義。

山茱萸果核中含有白樺脂酸，雖然已有報道從山茱萸果核中分離出白樺脂酸，由于該方法是采用硅膠柱色譜分離法，操作復雜，制備周期較長，制備規模小，因此不適合與工業化大規模的生產。

發明內容

為解決現有從山茱萸果核中提取白樺脂酸方法存在的不足，拓寬白樺脂酸的提取來源，充分利用廢棄的山茱萸果核，本發明提供了一種從山茱萸果核中提取白樺脂酸的方法。

本發明為解決上述技術問題采用的技術方案為：一種從山茱萸果核中提取白樺脂酸的方法，包含以下步驟：

一）取干燥的山茱萸果核粉碎，稱取其重量后置于滲漉罐內，然后按照每克果核5-10mL石油醚的比例加入石油醚進行滲漉脫脂，脫脂時間為5-8h，脫脂結束后得山茱萸果核藥渣；再將山茱萸果核藥渣中按照每克果核5-10mL提取溶劑的比例加入提取溶劑再次進行提取，提取結束后得提取液，然后將提取液中的溶劑回收，得到膏狀提取物，備用；

所述的提取溶劑為二氯甲烷、乙醇溶液、氯仿、甲醇或丙酮中的一種；

所述的山茱萸果核藥渣再次提取時的提取方式為滲漉提取、加熱回流提取、超聲提取、微波提取或冷浸提取中的一種；

二）將步驟一中得到的膏狀提取物用質量濃度為50-80%的乙醇進行分散，然后上樣于弱極性或非極性大孔吸附樹脂吸附柱，徑高比為1:5-8，吸附流速為2-4?BV/h；上樣結束后用質量濃度為50-80%的乙醇洗脫，流速為2-5BV/h；洗脫結束后，再用質量濃度為80-100%的乙醇洗脫進行洗脫，流速為2-5?BV/h，洗脫結束后，收集本次洗脫的洗脫液，回收洗脫液中的乙醇溶劑后得到白樺脂酸的粗提物，備用；

所述的膏狀提取物在用質量濃度為50-80%的乙醇中進行分散時，乙醇的加入量按照每克果核0.3-0.7mL的比例加入；

所述的弱極性或非極性大孔吸附樹脂吸附柱，樹脂的用量按照每克果核2-6mL的比例加入樹脂；

用50-80%的乙醇洗脫時，乙醇的加入量按照每克果核5-10mL乙醇的比例加入；

用80-100%的乙醇洗脫時，乙醇的加入量按照每克果核5-10mL乙醇的比例加入；

三）將步驟二中得到的白樺脂酸的粗提物，于乙醇或甲醇中進行重結晶，得到白樺脂酸。

本發明中，山茱萸果核粉碎后用石油醚提取，其作用是脫去果核中的油脂。

本發明中，在使用大孔徑吸附樹脂吸附柱吸附有機物時，一般不用或極少用高濃度的乙醇洗脫有效成分，高濃度乙醇一般是用于樹脂的再生，研究發現白樺脂酸與樹脂之間形成的范德華力較大，吸附較牢固，一般的洗脫溶劑很難洗脫，只有用樹脂再生時的高濃度乙醇才可將其從樹脂上面洗脫下來，因此在制定樹脂富集方法時，可先用80%以下的乙醇盡可能的將雜質除去，然后再使用高濃度的乙醇洗脫，從而使白樺脂酸的純度提高。

本發明中，白樺脂酸的粗提物在進行重結晶時優選在甲醇中重結晶。