[發明專利]一種具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 201210000465.8
• 申請日: 2012-01-04
• 公開（公告）號: CN103191442A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 熊思東;徐薇;李曉嫚
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K39/295;A61K39/21;A61K39/04;A61P31/18;A61P31/06;C12N15/85;C12N15/66
• 代理公司: 上海世貿專利代理有限責任公司 31128
• 代理人: 嚴新德

1.一種具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗，由一個載體構成，在所述的載體中插入有一段外源目的基因，其特征在于：所述的外源目的基因包括一個人類免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株來源的衣殼蛋白p24的全長基因，在所述的人類免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株來源的衣殼蛋白p24的全長基因中嵌合有來自結核桿菌抗原的4個T細胞表位多肽基因，所述的4個T細胞表位分別是結核分枝桿菌H37Rv株來源的MPT64蛋白的76～84位基因，結核分枝桿菌H37Rv株來源的Ag85A蛋白的242～250位基因，結核分枝桿菌H37Rv株來源的Ag85B蛋白的184～192位基因，結核分枝桿菌H37Rv株來源的TB10.4蛋白的74～82位基因，從人類免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株來源的衣殼蛋白p24全長基因的5’開始，在第1位堿基前插入結核分枝桿菌H37Rv株來源的MPT64蛋白的76～84位基因，在第273位堿基后插入結核分枝桿菌H37Rv株來源的Ag85A蛋白的242～250位基因，在第303位堿基后插入結核分枝桿菌H37Rv株來源的Ag85B蛋白的184～192位基因，在第441位堿基后插入結核分枝桿菌H37Rv株來源的TB10.4蛋白的74～82位基因，所述的人類免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株來源的衣殼蛋白p24全長基因的DNA序列如SEQ?IDNO：2所示，所述的結核分枝桿菌H37Rv株來源的MPT64蛋白的76～84位基因的DNA序列如SEQ?ID?NO：4所示，所述的結核分枝桿菌H37Rv株來源的Ag85A蛋白的242～250位基因的DNA序列如SEQ?ID?NO：6所示，所述的結核分枝桿菌H37Rv株來源的Ag85B蛋白的184～192位基因的DNA序列如SEQ?ID?NO：8所示，所述的結核分枝桿菌H37Rv株來源的TB10.4蛋白的74～82位基因的DNA序列如SEQ?ID?NO：10所示。

2.根據權利要求1所述的一種具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗，其特征在于：嵌合了結核分枝桿菌H37Rv株來源的4個T細胞表位基因的人類免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株來源的衣殼蛋白p24全長基因所構成的外源目的基因的DNA序列如SEQ?ID?NO：12所示。

3.根據權利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗，其特征在于：所述的載體為真核表達質粒，所述的真核表達質粒選自pcDNA3.1質粒或pVAX1質粒中的任意一種。

4.根據權利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗，其特征在于：所述的人類免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株來源的衣殼蛋白p24的氨基酸序列SEQ?ID如NO：1所示。

5.根據權利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗，其特征在于：所述的結核分枝桿菌H37Rv株來源的MPT64蛋白的76～84位基因的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：3所示。

6.根據權利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗，其特征在于：所述的結核分枝桿菌H37Rv株來源的Ag85A蛋白的242～250位基因的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：5所示。

7.根據權利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗，其特征在于：所述的結核分枝桿菌H37Rv株來源的Ag85B蛋白的184～192位基因的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：7所示。

8.根據權利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗，其特征在于：所述的結核分枝桿菌H37Rv株來源的TB10.4蛋白的74～82位基因的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：9所示。

9.根據權利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的結核基因疫苗，其特征在于：嵌合了結核分枝桿菌H37Rv株來源的4個T細胞表位基因的人類免疫缺陷病毒HIV-1株來源的衣殼蛋白p24的全長基因所構成的外源目的基因蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：11所示。