[發明專利]將白蛋白固定到自組裝膜上的方法

無效

• 申請號: 201180071334.2
• 申請日: 2011-12-22
• 公開（公告）號: CN103562721A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 畠岡由香利
• 申請（專利權）人: 松下電器產業株式會社
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王靈菇;白麗

技術領域

本發明涉及一種將白蛋白固定到自組裝膜上的方法。

背景技術

為了對試樣中所含的靶物質進行檢測或定量，使用生物傳感器。幾種生物傳感器為了對抗體進行檢測或定量而具備抗原。

當含有抗體的試樣被供給至具備抗原即白蛋白的生物傳感器時，抗體與白蛋白結合，由此被檢測或定量。

專利文獻1公開了具備抗原的現有的生物傳感器。該專利文獻1與日本特表2002-520618號公報對應（參照專利文獻1的第24頁第23行～第26行、第25頁第3行～第20行、第25頁第27行～第26頁第13行、及第26頁第14行～第22行、第28頁第21行～第23行、或者對應公報的第0080、0082、0084、0085、0095、0109、0118及0119段）。圖2表示專利文獻1的圖7所公開的生物傳感器。

根據專利文獻1的與圖7有關的描述，該生物傳感器用于對生物體分子的活性進行篩選。該生物傳感器具備單層7、親和性標記物8、銜接子分子9及蛋白10。單層7由化學式X-R-Y表示的自組裝膜構成（參照專利文獻1的第24頁第23行～第26行、第25頁第3行～第20行、第25頁第27行～第26頁第13行及第26頁第14行～第22行。或者，參照對應公報的第0080、0082、0084、0085段）。X、R及Y的一個例子分別是HS-、鏈烷基及羧基（參照專利文獻1的第25頁第3行～第20行、第25頁第27行～第26頁第13行及第28頁第21行～第23行。或者，參照對應公報的第0084、0085及0095段）。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：國際公開第00/04382號公報

發明內容

發明欲解決的課題

為了提高抗體的檢測靈敏度或定量精度，需要增加該生物傳感器上所固定的白蛋白的量。

本發明者發現，通過使自組裝膜與1分子氨基酸鍵合、然后將白蛋白固定，能夠顯著增加每單位面積的白蛋白的固定量。本發明是基于該認識而完成的。

本發明的目的在于提供使自組裝膜上所固定的白蛋白的量增加的方法及具有通過該方法固定的白蛋白的傳感器。

用于解決課題的手段

以下的項A1～C6解決了上述課題。

A1.一種將白蛋白固定到自組裝膜上的方法，其依次具備以下的工序（a）～（b）：

工序（a）：準備具備1分子氨基酸及所述自組裝膜的基材，其中，所述1分子氨基酸通過以下的化學式（I）所示的肽鍵與所述自組裝膜鍵合，

（R表示所述1分子氨基酸的側鏈）

所述1分子氨基酸選自由半胱氨酸、賴氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、甘氨酸、天冬酰胺、蛋氨酸、絲氨酸、色氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸及纈氨酸組成的20種氨基酸；和

工序（b）：將白蛋白供給到所述基材上，作為所述1分子氨基酸的羧基與所述白蛋白的氨基的反應結果形成以下的化學式（II）所示的肽鍵；

（R表示所述1分子氨基酸的側鏈）。

A2.根據項A1所述的方法，其中，所述工序（a）具備以下的工序（a1）及（a2）：

工序（a1）：準備表面上具備自組裝膜的基材，其中，所述自組裝膜在一端具有羧基，

工序（a2）：將所述1分子氨基酸供給到所述基材上，以所述化學式（I）所示的所述自組裝膜的一端的所述羧基與所述1分子氨基酸的氨基之間發生反應的形式，形成肽鍵。

A3.根據項A1所述的方法，其中，所述工序（a）及所述工序（b）之間還具備所述工序（ab）：

工序（ab）：將所述1分子氨基酸的羧基用N-羥基琥珀酰亞胺和1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽的混合液活化。

A4.根據項A2所述的方法，其中，所述工序（a1）及所述工序（a2）之間還具備所述工序（a1a）：

工序（a1b）：將所述自組裝膜的羧基用N-羥基琥珀酰亞胺和1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽的混合液活化。

A5.根據項A1所述的方法，其中，所述化學式（II）如以下的化學式（III）所示。

（R表示所述1分子氨基酸的側鏈）。

A6.根據項A1所述的方法，其中，所述1分子氨基酸選自由半胱氨酸、賴氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、丙氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、纈氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、色氨酸及天冬氨酸組成的組。