[發明專利]用于治療屋塵螨過敏的低過敏原性多肽

有效

• 申請號: 201180065896.6
• 申請日: 2011-11-30
• 公開（公告）號: CN103339143A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 陳寬偉;蘇珊娜·瓦塔拉;魯道夫·瓦倫塔
• 申請（專利權）人: 碧歐美公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;A61K39/35
• 代理公司: 北京市隆安律師事務所 11323
• 代理人: 劉東方

技術領域

本發明涉及免疫療法領域，其針對IgE介導的過敏，尤其是屋塵螨(HDM)過敏。更具體地，本發明涉及針對HDM過敏的新型重組低過敏原性疫苗的設計。

背景技術

屋塵螨(HDM)是與諸如鼻炎、特應性皮炎和哮喘的過敏疾病的發展相關聯的最重要的風險因素之一(1,2)，并且全世界所有過敏患者中超過50%患有HDM過敏(3)。

目前，23種不同的蛋白質被鑒定并表征為HDM過敏原(4,5)。來自屋塵螨(Dermatophagoides?pteronyssinus)的1類和2類過敏原是臨床上最為重要的HDM過敏原，其具有超過80%的IgE結合頻率(6-9)，并且發現其可以高濃度存在于螨蟲和螨蟲排泄物中(10,11)。

過敏原特異型免疫療法(SIT)是唯一具有長期持續效果的誘因性和疾病修正性方法(12-16)，該方法是基于施用提高劑量的疾病誘發型過敏原而進行的。目前，SIT是使用天然過敏原提取物而實施的。然而近來多項研究已經揭示了來自花粉、動物皮屑和屋塵螨的天然過敏原提取物的質量低下，這或許限制了SIT的臨床效能(17-19)。此外，SIT在過敏患者中可引起嚴重的副作用，其限制了這一治療的廣泛適用性，尤其是針對屋塵螨過敏。

已經進行了大量的嘗試以設計重組的低過敏原性衍生物，從而改善SIT的安全性和效能。并且2類螨蟲過敏原的多種低過敏原性衍生物已被開發并且顯示適合于免疫療法(20-26)。與之對比，僅僅存在少量的1類螨蟲過敏原低過敏原性衍生物未被良好地表征(27,28)。

使用低過敏原性衍生物的大多數策略僅可治療Der?p1或Der?p2過敏，而超過50%的HDM過敏患者與兩種過敏原Der?p1和Der?p2均有反應(29)。雜合分子的優點在于它們在一個分子中包含了全部T細胞表位，并且此前的研究顯示：相比單個較小分子，雜合分子更強和更早地誘導IgG應答(30,31)。

WO2009/118642A2描述了由過敏原Der?p1和Der?p2的片段組成的低過敏原性雜合蛋白。類似的公開內容可見于Asturias等人,(2009)Clinical&Experimental?Allergy?39,1088-1098。但是，Asturias文獻中描述的衍生物中的一種，即QM1，顯示了幾乎與天然過敏原相同的IgE反應性。Asturias所描述的第二種衍生物，即QM2，顯示了降低的IgE反應性，但是并未表明以該衍生物進行的免疫化誘導了特異于Der?p1過敏原的IgG抗體。此外，針對Der?p1和Der?p2混合物的抗QM2IgG抗體的對屋塵螨過敏患者IgE的平均抑制并不高于20%的平均抑制。

Bussières等人(2010)International?archives?of?allergy?and?immunology153/2,141-151描述了對組裝了來自屋塵螨的Der?p1和Der?p2過敏原的重組融合蛋白的研究。這些衍生物對其過敏原活性表現出無降低或僅約10倍的中度降低，并且并未研究以這些衍生物進行的免疫化是否誘導了抑制過敏患者IgE結合的過敏原特異性IgG。

Chen等人(2008)Molecular?Immunology，第45卷，第9期，2486-2498描述了對通過基因工程來降低Der?p2過敏原性的研究。這一衍生物僅包括Der?p2而不包括Der?p1，因此不能用于治療Der?p1過敏患者。

本申請的發明人使用雜合技術來構建低過敏原性組合疫苗以用于HDM過敏的免疫療法。兩種構建的鑲嵌蛋白質由衍生自Der?p1和Der?p2的片段組成。一種構建體包含所述兩種野生型過敏原（Der?p2/1C，本文也稱為Dp2/1C），而在另一構建體中以絲氨酸殘基取代了半胱氨酸殘基（Der?p2/1S，本文也稱為Dp2/1S）。這兩種鑲嵌蛋白質特征在于幾乎完全缺乏IgE反應性和過敏原活性，并且因此而有別于Asturias描述的QM1和Bussieres描述的衍生物。兩種衍生物均包括全部Der?p1序列元件并且因此而有別于Chen描述的衍生物。兩種衍生物所誘導的IgG抗體（即，Der?p2/1C和Der?p2/1S）抑制了過敏患者IgE與各自兩種過敏原Der?p1和Der?p2（表I）的結合，由Asturias制備的QM2所誘導的IgG并未有此表現。