[發(fā)明專利]定量樣品中的核酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201180059102.5
• 申請(qǐng)日: 2011-11-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103261858A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-08-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 哈拉爾德·昆泰爾;艾爾瑪·克里斯蒂安·費(fèi)爾巴切爾;羅曼·格魯勒;斯圖亞特·羅納德·哈金斯;多米尼克·扎爾;馬庫(kù)斯·瑞布霍茲;羅伯特·施爾德
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 凱杰博登湖有限公司
• 主分類號(hào): G01J3/10
• 分類號(hào): G01J3/10;G01J3/36;G01J3/427;G01N21/33
• 代理公司: 中原信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11219
• 代理人: 張穎;謝麗娜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及獨(dú)立權(quán)利要求1的前序部分的光度測(cè)定裝置以及獨(dú)立權(quán)利要求15的前序部分的方法。這樣的裝置和方法可用于對(duì)被布置在小管或小池中的樣品中的核酸進(jìn)行定量。

背景技術(shù)

為了評(píng)估樣品例如特別是液體樣品的組成，通常使用光透射光度測(cè)定法或吸收光譜法。在這種情形中，光是指任何波長(zhǎng)的電磁輻射，包括波長(zhǎng)在約380納米至約780納米范圍內(nèi)的可見(jiàn)光。由此，通常使用具有光源、樣品保持器和檢測(cè)器的適合的光度測(cè)定裝置。在這樣的光度測(cè)定裝置中，樣品被布置在樣品保持器中，并通過(guò)光源提供通過(guò)樣品到達(dá)檢測(cè)器的光束。由光源發(fā)射的光與被檢測(cè)器檢測(cè)到的光的比較數(shù)據(jù)允許確定樣品的光吸收。由于在特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸收能力方面，不同物質(zhì)的吸收性質(zhì)通常不同，因此分析樣品的光吸收允許確定樣品的組成。

例如，在US5,825,478A中示出了一種利用電磁輻射源測(cè)定樣品的電磁輻射吸收的光度測(cè)定儀。具體來(lái)說(shuō)，所述光度測(cè)定儀包含多個(gè)分束器和多個(gè)檢測(cè)器，其中分束器在光已通過(guò)樣品之后將其改變方向到達(dá)檢測(cè)器。因此，可以將每個(gè)檢測(cè)器布置成檢測(cè)在可見(jiàn)光的特定預(yù)定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的波長(zhǎng)。在該光度測(cè)定儀中，可見(jiàn)光至少部分在光纖纖維中傳導(dǎo)，這可能降低光度測(cè)定儀的效率并增加其結(jié)構(gòu)復(fù)雜性。

為了對(duì)樣品中的核酸例如脫氧核糖核酸（DNA）進(jìn)行定量，通常希望確定樣品中的DNA含量、樣品的DNA/鹽的比率和樣品中DNA/蛋白質(zhì)的比率。當(dāng)為此目的使用透射光度測(cè)定法時(shí)，必須分析樣品對(duì)三種不同波長(zhǎng)的紫外光的吸收。具體來(lái)說(shuō)，為了確定樣品中的DNA含量，必須測(cè)定樣品中對(duì)于約260納米的光而言的密度。為了確定樣品中DNA/鹽的比率，必須測(cè)定樣品中對(duì)于約230納米的光而言的密度。為了確定樣品中DNA/蛋白質(zhì)的比率，必須測(cè)定樣品中對(duì)于約280納米的光而言的密度。

為了進(jìn)行這樣的測(cè)定以便對(duì)樣品中的核酸進(jìn)行定量，通常使用各種不同的方法。例如，在一種實(shí)施方式中，將樣品液滴提供在兩個(gè)透鏡之間并利用浸潤(rùn)保持在該處。然后一個(gè)接一個(gè)地測(cè)定液滴中對(duì)于三種波長(zhǎng)的光而言的密度。這樣的測(cè)定可能比較低效，可能具有污染以及樣品損失的風(fēng)險(xiǎn)，可能涉及其他儀器例如移液管，并且可能需要在每次測(cè)定后清潔透鏡。在另一個(gè)類似的實(shí)例中，將樣品提供在特殊的移液管系統(tǒng)中。這樣的測(cè)定也可能比較低效，可能具有污染以及樣品損失的風(fēng)險(xiǎn)，并涉及特殊的儀器即移液管系統(tǒng)。在又一個(gè)類似的實(shí)例中，將樣品提供在微流體芯片中。然而，這樣的測(cè)定也可能涉及在效率、樣品損失的風(fēng)險(xiǎn)以及微流體芯片的高成本方面的缺點(diǎn)。

因此，對(duì)于允許高效定量樣品中的核酸的光度測(cè)定裝置，存在著需求。

發(fā)明內(nèi)容

根據(jù)本發(fā)明，通過(guò)由獨(dú)立權(quán)利要求1的特征所定義的光度測(cè)定裝置和由獨(dú)立權(quán)利要求15的特征所定義的方法，這種需求得以解決。優(yōu)選實(shí)施方式是從屬權(quán)利要求的主題。

本發(fā)明的發(fā)明點(diǎn)在于：用于對(duì)樣品容器中的樣品中的核酸進(jìn)行定量的光度測(cè)定裝置包含光發(fā)射單元、用于容納具有核酸樣品的樣品容器的樣品獲取單元以及檢測(cè)單元。樣品獲取單元被布置在光發(fā)射單元與檢測(cè)單元之間。此外，光發(fā)射單元和檢測(cè)單元被布置成提供從光發(fā)射單元通過(guò)樣品獲取單元到達(dá)檢測(cè)單元的光，使得通過(guò)檢測(cè)單元可以同時(shí)檢測(cè)約230納米（nm）或約280nm的第一波長(zhǎng)的光以及約260nm的第二波長(zhǎng)的光。

在這種情形中，核酸樣品具體地可以是脫氧核糖核酸（DNA）樣品或核糖核酸（RNA）樣品。在這種情形中，樣品容器是指適合于接受和呈遞樣品的任何容器。具體來(lái)說(shuō)，樣品容器可以是小管、小池、微量板、微流體裝置等。在這種情形中，被布置在光發(fā)射單元與檢測(cè)單元之間的是指由光發(fā)射單元所發(fā)射的光的光學(xué)路徑，以致由光發(fā)射單元發(fā)射的光在到達(dá)檢測(cè)單元之前通過(guò)樣品獲取單元。對(duì)于波長(zhǎng)來(lái)說(shuō)，術(shù)語(yǔ)“約”是指在準(zhǔn)確提到的值附近±5nm、±4nm、±3nm、±2nm或±1nm的范圍。在這種情形中，光發(fā)射單元可以包含連續(xù)發(fā)光燈或閃光燈或脈沖燈，例如氘燈、發(fā)光二極管、氙閃光燈等。光度測(cè)定裝置還可以包含評(píng)估單元，所述評(píng)估單元用于分析與檢測(cè)單元所提供的第一波長(zhǎng)的光和檢測(cè)單元所提供的第二波長(zhǎng)的光相關(guān)的光密度數(shù)據(jù)。具體來(lái)說(shuō)，評(píng)估單元可以被實(shí)施為執(zhí)行適合的軟件或計(jì)算機(jī)程序的計(jì)算機(jī)。此外，可以將模擬/數(shù)字（AD）轉(zhuǎn)換器布置在檢測(cè)單元與評(píng)估單元之間，用于將檢測(cè)單元檢測(cè)到的模擬數(shù)據(jù)或信號(hào)轉(zhuǎn)變成可以通過(guò)評(píng)估單元評(píng)估的數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)。