[發(fā)明專利]脂質化多抗原表位疫苗

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201180054791.0
• 申請日: 2011-11-15
• 公開（公告）號: CN103380146A
• 公開（公告）日: 2013-10-30
• 發(fā)明（設計）人: 冷治湘;曾琪玲;劉學鴻;劉士任;陳信偉;莊再成
• 申請（專利權）人: 財團法人衛(wèi)生研究院
• 主分類號: C07K17/02
• 分類號: C07K17/02;A61K39/12;A61P31/20;C12N15/00;C12P21/02;C07K14/01;C12N15/70
• 代理公司: 北京中博世達專利商標代理有限公司 11274
• 代理人: 申健

相關申請的交叉引用?

本申請依據2010年11月15日美國第61/413,619號專利臨時申請案，其相關內容已納入供參考。?

背景技術

利用從病原菌鑒定得的抗原表位做為標靶抗原，是一項用于研發(fā)治療性疫苗的重要策略。以多抗原表位進行免疫，能提供較單一抗原表位疫苗更多的優(yōu)點。至今，多抗原表位疫苗的發(fā)展已聚焦在DNA疫苗。然而，關于DNA疫苗，仍存在有各種安全性方面的疑慮。故有需要研發(fā)出能夠克服DNA疫苗障礙的多抗原表位疫苗。?

發(fā)明內容

本發(fā)明是基于發(fā)現，含有復數個抗原表位的脂質化多肽，當投藥給一個體時，能夠在該個體內誘發(fā)免疫反應。?

于一方面，本發(fā)明提供一種單離的脂質化多肽，其包含一位于N-端的脂質部分及復數個抗原表位。該每一復數個抗原表位可能互不相同。于某些具體實施例，該復數個抗原表位全部皆為細胞毒性T淋巴細胞(CTL)抗原表位。?

該復數個抗原表位可全部皆源自單一種病原菌，例如得自人類乳頭狀瘤病毒(HPV)。在有些實例中，該復數個抗原表位包括一或多個位于E6或E7上的抗原表位。于某些實例，該復數個抗原表位包括HPV型-16及型-18的HLA-A2-限制性抗原表位，例如一或多種或所有選自表1所列的肽類。于某些具體實施例，這些復數個抗原表位為相互鄰接的或不鄰接的。于某些具體實施例，該多肽為脂質化A21618-D47(rlipo-A21618-D47)或脂質化A21618-SDSk(rlipo-A21618-SDSk)。?

于另一方面，本發(fā)明是關于一種包含前述脂質化多肽的組成物。?

于又一方面，本發(fā)明亦提供一種制造脂質化多肽的方法。該方法包含：提供一大腸桿菌宿主細胞，其具有一包括編碼一多肽的核酸的表現載體，該多肽包含一細菌脂蛋白訊號肽區(qū)與復數個抗原表位；以及將該大腸桿菌宿主細胞進行培養(yǎng)，以使其表現出呈現脂質化形式的多肽，藉此制得該脂質化多肽。于某些具體實施例，該核酸是經過密碼子最適化以供在大腸桿菌中表現。于某些實例，該脂蛋白訊號肽區(qū)包含Ag473的D1功能域。?

于又另一方面，本發(fā)明是關于一種于個體中引發(fā)免疫反應的方法，該方法包含將一種包含脂質化多肽的組成物投藥予該個體。免疫反應可為一種由CTL-介導的免疫反應。?

本發(fā)明亦關于一種治療人類乳頭狀瘤病毒(HPV)-關連疾病的方法。該方法包含將一有效量的包含本發(fā)明所述脂質化多肽的組成物投藥予一有其需要的個體。?

本發(fā)明亦包括前述的脂質化多肽或組成物用于，在個體中引發(fā)免疫反應或治療HPV-關連疾病的用途。?

“抗原”是指一種含有一或多個會刺激宿主的免疫系統(tǒng)，而使其產生體液性及/或細胞性抗原-專一性反應的抗原表位的分子。術語“抗原”可與“免疫原”交替使用。當“抗原”和適當的細胞接觸后，其會誘發(fā)敏感狀態(tài)或免疫反應，而以可論證的方式，于活體內或活體外與該受敏化的個體的抗體或免疫細胞進行反應。“抗原”能夠專一地被生物體內的抗體辨識及結合。與主要組織兼容性復合體(MHC)結合的抗原，亦能夠被位于T淋巴細胞(T-細胞)表面上的受體辨識及結合，而促使這些T-細胞活化。?

術語“抗原表位”用于本文意指，位于抗原上而被抗體或免疫細胞(例如，B-細胞及T-細胞)辨識的部位。術語“抗原表位”用于本文可與“抗原決定基”或“抗原決定部位”交替使用。細胞毒性T-細胞(CTL)抗原表位意指，能夠活化CTL（已知亦稱做Tc或殺手T細胞），并接著刺?激CTL反應(亦即，誘導異常細胞（例如，受病毒感染的細胞或腫瘤細胞）死亡)的抗原表位。CTL抗原表位（代表性地包括8-11個胺基酸殘基）可與存在抗原-展現細胞表面上的特定第I類MHC分子（包括一重鏈與一β2微球蛋白）形成復合體。此復合體，在與CD₈T細胞（一種CTL）結合時會活化該T細胞，而因此引起CTL反應。?

術語“免疫反應”或“免疫原性反應”意指，個體的免疫系統(tǒng)在對于某一抗原的反應過程中所發(fā)生的任何反應。脊椎動物的免疫反應實例包括(但不限定于)制造抗體、誘發(fā)細胞-介導的免疫作用、補體活化及發(fā)展出免疫耐受性。對于后續(xù)由同一抗原的刺激所產生的免疫反應(又稱之為次級免疫反應)，可能會比初級免疫反應的情況更為快速。?