[發明專利]使用來自細胞的微泡治療和診斷癌癥的方法

有效

• 申請號: 201180041981.9
• 申請日: 2011-06-30
• 公開（公告）號: CN103079592A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 高用柗;金晤妍;張壽哲;尹昶閔;金潤根
• 申請（專利權）人: 浦項工科大學校產學協力團
• 主分類號: A61K39/085
• 分類號: A61K39/085;A61K9/133;A61K47/48;A61K49/08;A61P35/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

技術領域

本發明涉及一種使用來自細菌細胞的微泡，治療癌癥和/或診斷癌癥的方法。特別地，本發明涉及一種使用來自細菌細胞的微泡的組分治療癌癥的方法。

背景技術

在1813年，Vautier報道了在同時患有厭氧細菌產氣莢膜梭菌感染引起的氣性壞疽的患者中癌癥的明顯治愈。自那時起，對于有意注射各種細菌進行了廣泛研究，所述細菌除了梭菌之外，還包括鼠傷寒沙門氏菌，即細菌介導的癌癥治療的概念。當癌細胞生長超過一定大小（大約1mm³）時，其經受周圍血管的氧氣供應不足，形成癌組織內缺氧。缺氧狀態下的癌組織提供了厭氧細菌容易增殖的環境，同時其可能使用各種毒素和/或通過未知機制攻擊周圍癌細胞至壞死。已進行了各種嘗試以增強細菌介導的癌癥治療。例如，細菌被轉化以表達抗癌蛋白質，或用于遞送攜帶抗癌蛋白質基因的質粒至癌組織。為了減輕由細菌增殖和毒素產生的副作用，也嘗試將營養缺陷型突變體、孢子和減毒細菌用于癌癥治療。盡管這些努力，但在癌癥治療中使用細菌一直存在癌癥周圍的正常組織或器官中細菌增殖的風險。

廣義上細菌中具有兩種不同類型的細胞壁，稱為革蘭氏陽性和革蘭氏陰性。已知革蘭氏陰性菌，諸如大腸桿菌、腦膜炎奈瑟氏菌、綠膿假單胞菌和福氏志賀氏菌自發地從外膜脫落微泡。來自革蘭氏陰性菌細胞脫落的微泡被稱為外膜囊泡，通常由脂質雙分子層組成。通常其為大小為20～200nm的球狀，并具有各種生物活性物質，諸如脂多糖(LPS)和外膜蛋白、脂質和遺傳物質（DNA，RNA），其影響宿主細胞的炎癥反應。來自細菌細胞脫落的微泡用作信息載體，其在同源細胞之間的蛋白質或遺傳物質輸送中及細胞至細胞的信號傳導中起重要作用，并有助于競爭生物體的去除或細菌的存活。此外，脫落的微泡將毒素傳遞至宿主，因此部分地解釋了細菌性疾病的病原學。在死于嚴重敗血癥的患者血液中發現脫落的微泡的報道表示脫落的微泡在敗血癥的病理學中起重要作用，敗血癥的特征是全身性炎癥反應。發現來自細菌細胞脫落的微泡刺激宿主細胞分泌炎癥性細胞因子和凝結劑的研究也支持上述觀點。

本發明人首次發現，革蘭氏陽性菌，包括枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌產生脫落的微泡。然而，還需要更多關于來自革蘭氏陽性菌細胞脫落的微泡的組分或功能的信息。

已分離并觀察到從各種細菌種類自發脫落的微泡。通常，通過過濾或超速離心從細胞培養物中分離脫落的微泡。此外，已知可用抗生素（諸如慶大霉素）控制脫落的微泡的產生。特別地，建議通過清潔劑處理制備脫落的微泡可能應用為抗腦膜炎奈瑟氏菌（一種細菌性病原體）感染的疫苗。然而，這些生產方法的容量受到嚴格限制。

盡管癌癥和細菌之間的關系，但迄今為止未報道來自細菌細胞脫落的微泡在癌癥發病及發展中的作用，特別地，未報道應用來自細菌細胞脫落的微泡治療癌癥和/或診斷癌癥。

發明內容

技術問題

根據本發明，本發明人徹底深入的研究發現包含來自細菌或轉化細菌的微泡的組合物能有效地抑制癌細胞的生長。

因此，本發明提供了一種使用來自細菌細胞的微泡治療癌癥和/或診斷癌癥的方法，其在癌癥治療中卓有成效并顯著減少副作用，及一種使用負載藥物的來自細菌細胞的微泡，遞送治療或診斷疾病藥物的方法，從而有效并特異性地治療和診斷疾病。

然而，本發明所要達到的目的不限于上述，因此本領域技術人員將理解，可從以下描述中清楚地理解其他目的。

技術方案

根據一方面，本發明涉及用于治療癌癥和/或診斷癌癥的藥物組合物，其包含來自細菌細胞的微泡。本發明中使用的細菌可來自革蘭氏陽性或革蘭氏陰性菌，且其可以是天然的或基因轉化的。該組合物還進一步包含中和微泡毒性的藥物、提高抗癌活性的藥物、負載這種藥物的納米顆粒治療劑和/或細胞治療劑。

所述納米顆粒治療劑是大小為10nm至10μm的顆粒，且其實例包括，但不限于，脂質體、樹枝狀大分子、聚合物和微泡。

根據另一方面，本發明涉及一種治療癌癥和/或診斷癌癥的方法，其包括向需要的受試者施用來自細菌細胞的微泡。所述微泡可與中和微泡毒性的藥物、提高抗癌活性的藥物、負載這種藥物的納米顆粒治療劑和/或細胞治療劑一起同時/順序地施用。

根據還一方面，本發明涉及一種用于治療癌癥和/或診斷癌癥的來自細菌細胞的微泡的制備方法。在本發明的制備方法中，所述來自細菌細胞的微泡可以是從細菌自發脫落的微泡或人工微泡。