[發(fā)明專利]惡性腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201180034414.0
• 申請(qǐng)日: 2011-07-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103003695A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 海老沼宏幸;田久保耕平;深町勇;吉田彩舟;武城英明;中世古知昭;齋藤康
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 積水醫(yī)療株式會(huì)社
• 主分類號(hào): G01N33/574
• 分類號(hào): G01N33/574;A61K39/395;A61P35/00;G01N33/68
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 金世煜;苗堃

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及惡性腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

在腫瘤細(xì)胞表面特異性表達(dá)的蛋白質(zhì)可用作使用了患者的外周血、骨髓細(xì)胞、組織等的癌癥診斷的細(xì)胞表面標(biāo)記，通過(guò)檢查其有無(wú)表達(dá)，從而也可應(yīng)用于癌癥治療的效果判定、復(fù)發(fā)的監(jiān)測(cè)。

進(jìn)而，近年來(lái)廣泛進(jìn)行以在腫瘤細(xì)胞表面特異性表達(dá)的蛋白質(zhì)為靶標(biāo)的抗體醫(yī)藥品的開(kāi)發(fā)。基于抗體醫(yī)藥品的治療方法通過(guò)選擇在正常細(xì)胞中不表達(dá)或表達(dá)量非常少的抗原作為靶標(biāo)，從而作為對(duì)正常細(xì)胞造成的影響為最小限度且可期待對(duì)腫瘤細(xì)胞選擇性高的治療效果的治療方法而備受關(guān)注。作為抗體醫(yī)藥品有效成分的抗體的作用機(jī)制（mechanism）多種多樣，例如使用針對(duì)在B細(xì)胞中特異性表達(dá)的CD20抗原制作的單克隆抗體的屬于B細(xì)胞淋巴瘤治療藥的利妥昔單抗（rituximab）對(duì)腫瘤細(xì)胞具有誘導(dǎo)凋亡、抗體依賴性細(xì)胞毒（antibody-dependent?cellular?cytotoxicity：ADCC）活性、補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒（complement-dependent?cytotoxicity：CDC）活性等作用。另外，使放射性同位素鍵合于抗CD20單克隆抗體而得的釔（⁹⁰Y）替伊莫單抗（ibritumomab?tiuxetan）在利用抗體對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行攻擊的基礎(chǔ)上，還可預(yù)見(jiàn)基于放射線的治療效果，對(duì)復(fù)發(fā)、難治性B淋巴瘤治療的有用性得到確認(rèn)。

但是，現(xiàn)狀是對(duì)腫瘤的治療有用的單克隆抗體被限定在轉(zhuǎn)移性乳腺癌、急性骨髓性白血病、頑固性慢性淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤等某些腫瘤種類。

因此，正在廣泛開(kāi)展可應(yīng)用于癌癥診斷、基于抗體醫(yī)藥品的癌癥治療的對(duì)腫瘤細(xì)胞特異的新型細(xì)胞表面標(biāo)記的探索。

LR11（LDL?receptor?relative?with11ligand-binding?repeats）被鑒定為具有LDL受體家族中特征性結(jié)構(gòu)的新型LDL受體樣蛋白質(zhì)（專利文獻(xiàn)1、非專利文獻(xiàn)1）。LR11被報(bào)告在因平滑肌細(xì)胞游走和增殖而形成的血管內(nèi)膜肥厚部位，表達(dá)特異性亢進(jìn)（非專利文獻(xiàn)2）。本發(fā)明人等發(fā)現(xiàn)哺乳動(dòng)物的血液中存在可溶性LR11，以及動(dòng)脈硬化性疾病患者血液中的可溶性LR11濃度與健康人相比顯著地為高值（專利文獻(xiàn)2）。進(jìn)而，本發(fā)明人等開(kāi)發(fā)了簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確地測(cè)定血液、脊髓液中的可溶性LR11的方法（專利文獻(xiàn)3、非專利文獻(xiàn)4），測(cè)定了在各種疾病中的可溶性LR11濃度，結(jié)果確認(rèn)在惡性腫瘤、特別是白血病、惡性淋巴瘤之類的造血器官腫瘤疾病中呈現(xiàn)異常高值，發(fā)現(xiàn)血液中的可溶性LR11成為新的腫瘤標(biāo)記（專利文獻(xiàn)4）。但是，可溶性LR11不一定在所有造血器官腫瘤疾病患者的血液中均呈現(xiàn)異常高值，其理由仍不明確。

另一方面，非專利文獻(xiàn)5中報(bào)告了LR11的mRNA在寬范圍的來(lái)源于人的組織（神經(jīng)組織、肝臟、腦、外周血白細(xì)胞）中表達(dá)。進(jìn)而，記載有如下內(nèi)容：在人骨髓細(xì)胞中的干細(xì)胞存在的CD34＋CD38－組分（骨髓性白血病細(xì)胞）中，LR11的mRNA表達(dá)亢進(jìn)，以及雖然未示出數(shù)據(jù)，但LR11的mRNA在部分造血器官腫瘤培養(yǎng)細(xì)胞中也表達(dá)。但是，非專利文獻(xiàn)5僅進(jìn)行了在含有培養(yǎng)細(xì)胞的血液前體細(xì)胞方面的概括性的基因表達(dá)分析，沒(méi)有關(guān)于在蛋白質(zhì)水平上表達(dá)LR11的組織的記載，也完全沒(méi)有關(guān)于造血器官腫瘤與LR11mRNA表達(dá)的關(guān)系的記載。

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：日本特開(kāi)平9-163988號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)2：WO2008/155891

專利文獻(xiàn)3：WO2009/116268

專利文獻(xiàn)4：日本特愿2009-285492號(hào)公報(bào)

非專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：J.Biol.Chem.1996;271,24761-24768

非專利文獻(xiàn)2：Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.1999;19,2687-2695

非專利文獻(xiàn)3：J.Clin.Invest.2008;118,2733-2746

非專利文獻(xiàn)4：Clin.Chem.2009;55,1801-1808

非專利文獻(xiàn)5：Experimental?Hematology2000;28,1286-1296

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的課題在于提供通過(guò)測(cè)定在惡性腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)的蛋白質(zhì)標(biāo)記而進(jìn)行的惡性腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)方法。

另外，本發(fā)明的課題在于提供以對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞的表面蛋白質(zhì)特異的抗體為有效成分的惡性腫瘤治療藥。