[發明專利]純化多肽的方法

在審

• 申請號: 201180025404.0
• 申請日: 2011-05-25
• 公開（公告）號: CN102905718A
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發明（設計）人: H·F·劉;B·D·凱利;D·E·麥爾斯;B·麥庫伊;K·M·佩蒂
• 申請（專利權）人: 弗·哈夫曼-拉羅切有限公司
• 主分類號: A61K38/00
• 分類號: A61K38/00;G01N30/02;G01N31/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 凌立;黃革生

1.用于從包含多肽和至少一種污染物的組合物純化多肽的方法，其中，所述方法包括(i)或(ii)：

(i)(a)按高于約150g/L陽離子交換材料的加樣密度將所述組合物加樣至陽離子交換材料上和(b)將從所述陽離子交換材料回收的組合物加樣至混合型材料上的順次步驟；或

(ii)(a)將所述組合物加樣至混合型材料上和(b)按高于約150g/L陽離子交換材料的加樣密度將從混合型材料回收的組合物加樣至陽離子交換材料上的順次步驟。

2.權利要求1的方法，其中所述多肽具有約6和約10之間的pI。

3.權利要求2的方法，其中所述多肽具有約7和約9之間的pI。

4.權利要求1-3中任一項的方法，其中所述多肽是抗體或免疫黏附素。

5.權利要求4的方法，其中所述多肽是免疫黏附素。

6.權利要求4的方法，其中所述多肽是抗體。

7.權利要求6的方法，其中所述抗體是單克隆抗體。

8.權利要求7的方法，其中所述單克隆抗體是嵌合抗體、人源化抗體或人抗體。

9.權利要求7的方法，其中所述單克隆抗體是IgG單克隆抗體。

10.權利要求6的方法，其中所述抗體是抗原結合片段。

11.權利要求10的方法，其中所述抗原結合片段選自Fab片段、Fab’片段、F(ab’)₂片段、scFv、Fv和雙抗體。

12.權利要求1-11中任一項的方法，其中所述至少一種污染物是中國倉鼠卵巢蛋白質(CHOP)、浸出的A蛋白、DNA、聚集蛋白質、細胞培養基成分、慶大霉素和病毒污染物中的任意一種或多種。

13.前述權利要求中任一項的方法，其中(i)和/或(ii)中的順次步驟是連續的。

14.權利要求1-13中任一項的方法，其中所述方法是(i)。

15.權利要求1-13中任一項的方法，其中所述方法是(ii)。

16.權利要求1-15中任一項的方法，其中所述加樣密度在約150g/L和約2000g/L陽離子交換材料之間。

17.權利要求16的方法，其中所述密度在約500g/L和約1000g/L陽離子交換材料之間。

18.權利要求1-17中任一項的方法，其中所述陽離子交換材料包含羧酸官能團或磺酸官能團。

19.權利要求18的方法，其中所述官能團是磺丙基、磺乙基、磺異丁基或羧基。

20.權利要求1-19中任一項的方法，其中所述陽離子交換材料是膜、monolith或樹脂顆粒。

21.權利要求20的方法，其中所述陽離子交換材料是樹脂。

22.權利要求1-17中任一項的方法，其中所述陽離子交換材料是Mustang?S、Sartobind?S、SO3?Monolith、S?Ceramic?HyperD、Poros?HS50、Poros?HS20、磺丙基-Sepharose?Fast?Flow(SPSFF)、SP-Sepharose?XL(SPXL)、CM?Sepharose?Fast?Flow、Capto?S、Fractogel?Se?HiCap、Fractogel?SO3或Fractogel?COO。

23.權利要求1-22中任一項的方法，其中所述混合型材料包含能夠進行陰離子交換和疏水作用的官能團。

24.權利要求23的方法，其中所述混合型材料是Capto-Adhere樹脂、MEP?HyperCel樹脂、HEA?HyperCel樹脂、PPA?HyperCel樹脂或ChromaSorb膜。

25.權利要求1-24中任一項的方法，其中所述方法包括隨同所述陽離子交換材料和/或混合型材料使用平衡緩沖液、洗滌緩沖液和/或加樣緩沖液，且所述平衡緩沖液、洗滌緩沖液和/或加樣緩沖液的電導率在約2mS/cm至約25mS/cm之間。