[發(fā)明專利]木聚糖酶變體及編碼其的多核苷酸無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201180022458.1 | 申請日: | 2011-03-02 |
| 公開(公告)號: | CN102884182A | 公開(公告)日: | 2013-01-16 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | J.林;J.葉;A.瓊斯;S.奧塔尼;T.許;P.卡斯蘭德;E.弗里斯 | 申請(專利權(quán))人: | 諾維信股份有限公司;諾維信公司 |
| 主分類號: | C12N9/24 | 分類號: | C12N9/24;C12P19/14;D21C5/00;C12N15/56 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律師事務(wù)所 11105 | 代理人: | 史悅 |
| 地址: | 美國加利*** | 國省代碼: | 美國;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 聚糖 變體 編碼 多核苷酸 | ||
1.一種親本木聚糖酶的分離的變體,其在對應(yīng)于SEQ?ID?NO:2或SEQ?IDNO:4的成熟多肽的位置2,17,21,28,38,41,55,56,57,60,62,74,81,104,111,121,151,159,161,183,186,188,和192的一個或多個位置處包含取代,其中所述變體具有木聚糖酶活性。
2.權(quán)利要求1的變體,其中所述親本木聚糖酶為
(a)多肽,其與SEQ?ID?NO:2或SEQ?ID?NO:4的成熟多肽具有至少60%序列同一性;
(b)多肽,其由多核苷酸編碼,所述多核苷酸在至少低嚴格條件下與以下雜交:SEQ?ID?NO:1或SEQ?ID?NO:3的成熟多肽編碼序列,或其全長互補鏈;
(c)多肽,其由多核苷酸編碼,所述多核苷酸與SEQ?ID?NO:1或SEQ?IDNO:3的成熟多肽編碼序列具有至少60%序列同一性;或
(d)SEQ?ID?NO:2或SEQ?ID?NO:4的成熟多肽的片段,其具有木聚糖酶活性。
3.權(quán)利要求1或2的變體,其中所述親本木聚糖酶包含或組成為SEQ?IDNO:2或SEQ?ID?NO:4的成熟多肽,或它們具有木聚糖酶活性的片段。
4.權(quán)利要求1-3任一項的變體,其與親本木聚糖酶的氨基酸序列具有至少60%,例如至少65%,至少70%,至少75%,至少80%,至少85%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%同一性,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,但少于100%的序列同一性。
5.權(quán)利要求1-4任一項的變體,其中取代數(shù)為1-23,例如1-15,1-10和1-5,如1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,或23個取代。
6.權(quán)利要求1-5任一項的變體,其包含一個或多個選自下組的取代:V2I,F(xiàn)17L,A21S,E28V,S38Y,F(xiàn),N41D,G55D,R56H,P,R57H,T60S,S62T,T74A,S,N81D,T104S,T111I,N121Y,N151D,H159R,M161L,N183D,L186I,V,T188A,和G192D。
7.權(quán)利要求1-6任一項的變體,其在對應(yīng)于位置19,23,84,和88的一個或多個位置處進一步包含取代。
8.權(quán)利要求7的變體,其中進一步取代的數(shù)量為1-4,如1,2,3或4個取代。
9.權(quán)利要求7或8的變體,其包含一個或多個選自下組的取代:T19A,G23P,V84P,和I88T。
10.一種分離的多核苷酸,其編碼權(quán)利要求1-9任一項的變體。
11.一種宿主細胞,其包含權(quán)利要求10的多核苷酸。
12.一種產(chǎn)生具有木聚糖酶活性變體的方法,其包括:(a)在適于表達所述變體的條件下培養(yǎng)包含權(quán)利要求10的多核苷酸的宿主細胞;和
(b)回收所述變體。
13.一種轉(zhuǎn)基因植物、植物部分或植物細胞,其是用權(quán)利要求10的多核苷酸轉(zhuǎn)化的。
14.一種產(chǎn)生權(quán)利要求1-9任一項的變體的方法,其包括:
(a)在有助于產(chǎn)生所述變體的條件下培養(yǎng)包含編碼變體的多核苷酸的轉(zhuǎn)基因植物或植物細胞;和
(b)回收所述變體。
15.一種用于獲得權(quán)利要求1-9任一項的變體的方法,包括在對應(yīng)于SEQID?NO:2或SEQ?ID?NO:4的成熟多肽的位置2,17,21,28,38,41,55,56,57,60,62,74,81,104,111,121,151,159,161,183,186,188,和192的一個或多個位置處將取代引入親本木聚糖酶,其中所述變體具有木聚糖酶活性;和回收所述變體。
16.一種降解含木聚糖材料的方法,其通過用權(quán)利要求1-9任一項的變體處理所述材料。
17.一種處理紙漿的方法,其包括將紙漿與權(quán)利要求1-9任一項的變體相接觸。
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